资源描述
实验报告格式,1、实验目的（简单） 2、实验原理（详细） 3、试剂仪器（简单） 4、实验步骤（简单） 5、数据处理（详细，表格，图） 6、结果讨论（重点） 、回答思考题的问题 、讨论引入误差的原因 、实验操作中的注意事项及减小误差的方法,1,荧光法测定维生素B2药物中核黄素含量,实验二,2,维生素B2,维生素B2易溶于水而不溶于乙醚等有机溶剂，在中性或酸性溶液中稳定，光照易分解，对热稳定。稀释后有强烈荧光，维生素B2溶液在430440 nm蓝光的照射下，发出绿色荧光，其峰值波长为525 nm。,3,一、实验原理,（1）定量依据：维生素B2在水中是强的荧光物质，并且在低浓度时，荧光强度与维生素B2浓度呈正比： If = kc,（2）定量方法（标准曲线法）： 测定一系列已如浓度的维生素B2的荧光强度，然后以荧光强度对维生素B2浓度作标准曲线，再测定未知浓度维生素B2的荧光强度，把它代入标准曲线方程求出其浓度。,4,If = kc,荧光强度 vs.浓度标准曲线,荧光强度,核黄素浓度,样本,5,二、实验仪器,测量荧光的仪器主要由四个部分组成：激发光源、样品池、双单色器系统、检测器。 特殊点：有两个单色器，光源与检测器通常成直角。,6,三、实验步骤及注意事项,7,移液管的使用,常见移液管：标有温度和容量(注意是否标有吹) 用途：准确移取一定体积的液体 操作：洗涤(蒸馏水)、润洗(3次)、移液、洗涤干净,注意事项：1、整个操作过程中，保持移液管的垂直；2、读数时视线与凹液面平齐,溶液下端1-2cm,8,1. 打开氙灯，再打开主机，然后打开计算机启动工作站并初始化仪器。 2. 仪器初始化完毕后，在工作界面上选择测量项目，设置适当的仪器参数：确定激发波长和发射波长。 3. 样品测定。 4. 退出主程序，关闭计算机，先关主机，最后关氙灯。,基本操作,9,四、数据处理,1.原始数据,2.标准曲线的绘制和未知样品的浓度计算,10,五、实验注意事项,1.实验过程中，注意使用石英比色池时必须保持四面干净，拿稳棱角注意不要摔落; 2.实验完毕，注意检查仪器是否运行正常，关闭程序是否正确。 3.试剂取后，得放回原处，保持试验台整洁。,11,1.为什么荧光光度法较吸收光度法灵敏度高？ 2.维生素B2在pH = 67时荧光最强，本实验为何在酸性溶液中测定？ 3.如何绘制激发光谱和荧光发射光谱？ 4.哪些因素可能影响维生素B2的荧光强度？,六、实验思考题,12,
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