蛙坐骨神经干动作电位实验报告.doc

一、实验目的：1. 学习蛙坐骨神经干标本的制备2. 观察坐骨神经干的双相动作电位波形，并测定最大刺激强度3. 测定坐骨神经干双相动作电位的传导速度4. 学习绝对不应期和相对不应期的测定方法5. 观察机械损伤或局麻药对神经兴奋和传导的影响二、实验材料1. 实验对象：牛蛙2. 实验药品和器材：任氏液，2%普鲁卡因，各种带USB接口或插头的连接导线，神经屏蔽盒，蛙板，玻璃分针，粗剪刀，眼科剪，眼科镊，培养皿，烧杯，滴管，蛙毁髓探针，BL-420N系统三、主要方法和步骤：1. 捣毁脑脊髓2. 分离坐骨神经3. 安放引导电极4. 安放刺激电极5. 启动试验系统6. 观察记录7. 保存8. 编辑输出四、实验结果和讨论1. 观察神经干双相动作电位引导（单通道，单刺激）如图，观察到一个双相动作电位波形。2. 神经干双相动作电位传导速度测定（双通道，单刺激）（1） 选择“神经骨骼肌实验”“传导速度测定”（2） 改变单刺激强度（3） 传导速度 = 传导距离(R1-R2-)/传导时间(t2-t1)如图所示，两个波峰之间的传导时间 t = (t2-t1) = 0.66ms实验中，我们设定在引导电极1和3之间的距离 R = (R1-R2-) = 1cm故传导速度v = R/t = 1cm / 0.66ms = 15.2 m/s3. 神经干双相动作电位不应期观察由上图可知，当刺激间隔时间为4.61ms时，两双相动作电位开始融合，此时为总不应期；当刺激间隔时间为1.05ms时，双相动作电位完全融合，此时为绝对不应期。故相对不应期 = 总不应期 绝对不应期 = 4.61ms 1.05ms = 3.56ms4. 普鲁卡因对神经冲动传导的阻滞作用如图所示，在两通道之间滴加普鲁卡因后，两双相电位间的波峰间隔时间为1.03ms，由引导电极之间的间隔距离1cm，得此时传导速度：V1 = 1cm/1.03ms = 9.71 m/s5. 机械损伤对坐骨神经干双向动作电位的影响由图可知，当剪断两引导电极之间的神经干时，第二通道的双相动作电位消失。故机械损伤对神经动作电位传导的阻滞作用比局麻药强。6. 实验注意事项a) 牛蛙腓肠肌后的神经干分支较难找，可以适当剪开周围软组织辅助找到。b) 每隔一段时间，记得给神经干（及未分离时的周围软组织）滴加任氏液以尽量保持组织的活性。c) 分离出的神经要尽量长，以保证实验数据的完整性。d) 滴加普鲁卡因时，液滴可能会垂在神经干上的两个引导电极之间，此时可以用滴管将其引流到神经干末端无引导电极的地方，滴到神经屏蔽盒底部。e) 实验前先熟悉即将使用的机能学实验系统。