UV-Solution中文说明书.doc

5. 数据处理5.1. 数据打开被保存的数据可以通过以下方式打开。用鼠标点击File菜单下的Open选项，或者按钮。出现如下文件打开对话框。见图Fig 5-1。Fig 5-1选择文件类型下拉菜单，选择需要打开的文件类型。l 波长扫描数据文件（*.uds）l 时间扫描数据文件（*.udt）l 定波长测量数据文件（*.udq）l 测量方法文件（*.uvm）l 样品表数据文件（*.uvs）l 报告文件（*.udr）l 数据处理文件（*.udp）l U-4001/3501 型仪器的波长扫描文件（*.uvl）l U-4001/3501 型仪器的时间扫描文件（*.uv2）l U-4001/3501 型仪器的定波长测量文件（*.uv3）l 所有文件（*.*）5.2. 图谱光标数据检索这个功能可以使用户通过光标在图谱中寻找指定波长的读数值。首先在图谱窗口中点击鼠标右键。出现如下图Fig 5-2。Fig 5-2在菜单中选择Trace选项，并点击鼠标左键。出现光标线。如下图Fig 5-3。Fig 5-3在图谱窗口的左上角显示光标所处于的波长值及该波长下的读数值。光标可以通过两种方式移动。1. 左右移动鼠标。2. 使用键盘上的左右键。注意：如果图谱放得太大，移动鼠标可能并不能显示检索数据。此时请使用键盘上的左右键。5.3. 图谱坐标范围更改图谱界面的横坐标和纵坐标的坐标范围都可以更改。点击按钮或者在图谱窗口点击鼠标右键，并选择Scale选项。见下图Fig 5-4。Fig 5-4分别在纵坐标（Y Axis）、横坐标（X Axis）输入最大最小值。l Default Range缺省坐标范围值按Default Range按钮，是坐标范围恢复初始值。在显示的图谱上可以用鼠标选取某一区域进行图谱放大（拉线放大法），如果需要恢复原来的坐标范围，也可以使用按钮。5.4. 改变图谱坐标属性图谱界面的横坐标和纵坐标的坐标属性也可以更改。点击按钮或者在图谱窗口点击鼠标右键，并选择Scale选项。见下图Fig 5-5。Fig 5-5l X Axis横坐标- Wavelength波长值- Wave number波数值（Kcm-1；K=1000）x10000（x：K cm-1；：nm）- Energy能量（eV值）y=1239.8（y：eV；：nm）- Frequency频率值（THz）z=299792（z：THz；：nm）l Y Axis横坐标- Transmittance透过率（T）- Absorbance吸光度（Abs）- Sample Energy样品通道能量（eV值）- Reference Energy参比通道能量（eV值）- %R Transmittance透过率（R）- Molar absorbance摩尔吸光度显示摩尔吸光系数Abs/cLc：浓度（mol/L）L：光程（cm）Abs：吸光度浓度和光程需要在输入- Log molar absorbance 对数摩尔吸光度注意：只有吸光度读数才可以转换成摩尔吸光度和对数摩尔吸光度。- F (R)漫反射漫反射测量使用Kubelka-Munk方法R()：是样品的反射系数0 R %R- LogF (R)对数漫反射注意：只有%R的读数才可以转换成F(R)和LogF(R)。5.5. 改变图谱曲线的属性软件提供图谱曲线的颜色，线型等属性的更改。点击按钮，并选择Lines/Points页面。见下图Fig 5-6。Fig 5-6l Graph选择所需更改的曲线l Display曲线显示方式- Lines只显示曲线- points只显示数据点- Lines& points显示曲线和数据点l Line选择曲线的式样。如实线，虚线等l Point style选择数据点的式样。l Line color选择曲线的颜色单击Select Color按钮。在颜色更改对话框中，含有48种基本颜色，16种自定义颜色。并且可以根据调节红，绿兰的配比以及色调等参数，定制自定义颜色。见下图Fig 5-7。Fig 5-75.6. 图谱曲线峰值判定可以通过点击按钮，实现峰值判定。峰值判定的参数设置见图Fig 5-8。Fig 5-8l Integration积分方法设置积分方法有三个选项：Rectangular（矩形方式），Trapezoid（梯形方式），Romberg（Romberg方式）各种方式的含义请参见附页。l Threshold峰高限值超过峰高限值的峰才会被判定。图Fig 5-9Fig 5-9l Sensitivity敏感度使用不同的敏感度，是指在判峰中使用不同密度的搜索点判峰。比较尖锐的峰使用敏感度1，比较平坦的峰使用敏感度8。注意：峰值是对于吸光度值来说的，对于其他的测量模式时，峰值列表区显示谷值。5.7. 图谱曲线上标注峰值点击按钮，并选择Display页面。见下图Fig 5-10。Fig 5-10在Annotation下拉选择框中进行选择。- None只显示图谱曲线- Peak Number标注峰值的编号- Peak Apex标注峰值定点- Valley No. 标注谷值的编号- Valley wavelength标注谷值的波长- Peak and valley Number标注峰值和谷值的编号- Peak and valley wavelength标注峰值和谷值的波长Fig 5-115.8. 图谱曲线平滑滤波点击按钮，出现如下对话框。见图Fig 5-12。Fig 5-12l Function type选择平滑滤波的类型- Savistsky-GolaySavistsky-Golay方法- Mean平均法- Median中值法l Smoothing order滤波的阶次数l Number of points滤波的点数l Number of times滤波的次数5.9. 图谱曲线求导点击按钮，出现如下对话框。见图Fig 5-13。Fig 5-13l Derivative order求导的阶次数l Smoothing order滤波的阶次数l Number of points滤波的点数l Overlay derivative使用图谱组合显示求导前后的图谱5.10. 图谱曲线组合显示此项功能用于比较多个图谱曲线。有三种方式。1. 选择Data菜单中的Overlay选项。Fig 5-14点击From the files按钮，在文件打开对话框中选择一个需要组合显示的文件。Fig 5-15点击Close按钮即可。2. 打开两个需要组合的图谱。见下图Fig 5-16。Fig 5-16用鼠标点击图谱窗口蓝色的部分，并移至另一数据窗口。鼠标会变成如下形状。3. 用鼠标点击一个图谱窗口部分，按键盘上的Ctrl+C按键。用鼠标点击另一个图谱窗口部分，按键盘上的Ctrl+V按键。完成图谱组合显示功能。组合图谱删除功能。选择Data菜单中的Overlay选项。见图Fig 5-17。Fig 5-17用鼠标点击需要删除的图谱名称，按Delete按钮。按Close按钮，完成。5.11. 图谱的运算单个图谱运算界面见图Fig 5-18Fig 5-181. 样品名称参加运算的图谱曲线的名称2. 图谱曲线参加运算的图谱曲线3. 系数输入输入图谱运算时所需乘以的倍数4. 运算方法选择所要使用的运算方法图谱之间的运算界面见图Fig 5-19Fig 5-195. 样品名1使用的运算中第一个样品的样品名。6. 样品名2使用的运算中第二个样品的样品名。7. 图谱曲线1使用的运算中第一个样品的图谱曲线。8. 图谱曲线2使用的运算中第二个样品的图谱曲线。9. 系数输入输入图谱运算时所需乘以的倍数。10. 运算方法选择所要使用的运算方法。根据上述的方法设置完毕后，按下Calculate按钮，显示图谱运算结果。见图Fig 5-20Fig 5-20按Save As按钮。将运算后的数据保存为一个新的文件。5.12. 峰面积计算在数据窗口下点击按钮开始使用峰面积计算功能。见图Fig 5-21Fig 5-21在StartEnd输入需要计算峰面积的波长起始和结束值。然后点击Calculate按钮，分别在S1、S2、S3显示峰面积结果。点击Print按钮，打印计算结果。按OK关闭峰面积计算对话框。在数据窗口点击按钮可还原图谱。图谱扩展方法。可以使用鼠标拉线方法。即点住鼠标左键不放，拉取所要放大的区域，然后放开鼠标左键。见图Fig 5-22。Fig 5-22放大后的图谱见图Fig 5-23。Fig 5-23如果需要还原放大后的图谱，只需双击鼠标左键。峰面积的计算原理如下：图Fig 5-24Fig 5-24面积计算D1至Dn。公式如下S3=D2+D3+Dn-2+Dn-1+D1+Dn/2*S2=(D1+Dn)*(n-1) =(D1+Dn)*计算起始波长WL1-计算结束波长WL2S1=S3-S2D1：计算起始波长处的读数值D2：计算结束波长处的读数值：采样间隔对于时间扫描中的运算只是将波长改成时间。计算起始波长WL1-计算结束时间（T2）计算起始波长WL2-计算起始时间（T1）5.13. 将数据转换成Microsoft(R) Excel格式的文件注意：使用此项功能时，必须首先安装微软的Excel软件。转换方法如下：1. 按按钮进入方法设置页面。并选择Report页面。在Output选项中选择Use Microsoft(R) Excel选项。然后点击OK按钮。见下图Fig 5-25。Fig 5-252. 然后按按钮软件开始自动转换，并打开Microsoft(R) Excel软件。见图Fig 5-26Fig 5-263. 在Excel软件中选择文件(F)菜单中的副本另存为选项，保存文件。见图Fig 5-27。Fig 5-275.14. 将图谱复制到Microsoft(R) Word文件注意：使用此项功能时，必须首先安装微软的Word软件。转换方法如下：先激活图谱区域（用鼠标右键点击图谱区域），然后选择Edit菜单下的Copy选项。打开Microsoft(R) Word软件，使用编辑菜单下的粘贴选项。将图谱粘贴到Word文件中。见图Fig 5-28。Fig 5-28在Word文件中用鼠标图片，并按鼠标右键，可以提供更改图谱的坐标范围，是否显示坐标网格等功能。在Word文件中再次复制图片，然后打开Excel软件，可以将图片粘贴到Excel文件中。注意：无法直接将图谱粘贴到Excel文件中。5.15. 将数据转换成文本文件将数据转换成文本文件。方法如下：1. 打开数据处理窗口。2. 选择File菜单下的Save As选项。3. 在对话框的保存类型选项中选择ASCII Text Files (*.txt)选项。Fig 5-294. 输入文件名后按保存按钮。5.16. 更改样品名1. 打开需要更改样品名的数据文件。2. 选择Edit菜单下的Properties选项或点击按钮。并选择Info页面。见图Fig 5-30Fig 5-303. 在Name中输入新的样品名，然后点击确定按钮。注意：此项功能只能用于波长扫描和时间扫描。5.17. 打印当前波长和测量数据软件可以打印当前或光标检索中显示的波长值及读数。在Tools菜单中选择Read Data选项。显示读数对话框。（图Fig 5-31）Fig 5-31用鼠标激活（点击）需要读数的窗口（数据处理或测量窗口），点击鼠标右键，选择Read Current Data选项。在读数对话框中显示读数。见图Fig 5-32。Fig 5-32采用上述方法将所有需要读取的数据全部读取完毕后，选择File菜单下的Print选项，或按钮打印数据。如需删除某一个数值可以按Delete按钮。5.18. 在定波长测量界面装载图谱数据当在定波长界面中使用计算峰面积或峰高方式计算时使用。首先需要准备好，使用相应方法测量（制作）完成的标准回归曲线。用鼠标选择标准样品或样品编号，并点击鼠标右键，在菜单中选择Load Spectrum from Quant Data选项。见图Fig 5-33。Fig 5-33即可显示该标准样品或样品的扫描图谱。见图Fig 5-34。Fig 5-34选择File菜单下的Print选项，或按钮打印数据。6. 高级应用方法6.1. 使用固定的测量界面UV Solution软件可以使用一个固定的测量界面（测量方法）。在Tools菜单下选择Option选项。见图Fig 6-1。Fig 6-1在弹出的对话框中选择Startup页面。并选中Use fixed method选项。Fig 6-2根据主机型号点击相应的按钮。出现如下对话框。见图Fig 6-3。Fig 6-3输入文件名，并按保存按钮，将当前的设置界面及参数保存。可以将UV Solution软件的执行文件uvman.exe加入操作系统的“启动组”中。这样可以启动计算机后直接进入测试界面。6.2. 设置主机连接状态在Tools菜单中选择Instrument选项，或按按钮。出现下列窗口。见图Fig 6-4。Fig 6-4点击Close Monitor关闭测量窗口，仪器处于不联机状态。点击Open Monitor打开测量窗口，仪器处于联机状态。6.3. 核查测量数据文件的信息在打开一个数据文件前，可以检测这个文件的信息，如：样品名称、测试方法及测试参数等。1. 按按钮打开数据文件对话框。见图Fig 6-5。Fig 6-52. 用鼠标选中所要查看的数据文件，并按鼠标右键。选择属性选项。见图Fig 6-6Fig 6-6选择Info或Scan页面查看信息。对于已经打开的数据文件，只要点击按钮，选择其中的Info或Scan页面就可以查看信息了。见图Fig 6-7。 Fig 6-76.4. 测量方法保存UV Solution软件可以对测量方法进行保存。选择Edit菜单中Method选项。出现如图对话框。图Fig 6-8。Fig 6-8各种参数设置完毕后，返回General页面。单击该页面上的Save As按钮。输入文件名保存后，即可。在上述页面中按Load按钮可以装入以前保存的方法文件。6.5. 软件事件记录用于记录软件的故障信息。点击Tools菜单下Event Log选项。Fig 6-9出现如图Fig 6-10对话框。Fig 6-10点击User Notes页面可以增加用户的提示内容。在Description输入内容，按Add Note按钮添加用户提示内容。见图Fig 6-11。Fig 6-116.6. 查看软件的版本点击Help菜单中的About UV Solutions选项。Fig 6-12软件将出现关于软件版本信息的对话框。图Fig 6-13。Fig 6-136.7. 样品表保存在样品表输入对话框（图Fig 6-14）中点击Save As按钮。在文件保存对话框（图Fig 6-15）中输入文件名，在保存类型中选择UV Sample Table Files (*.uvs)，并按保存按钮保存。Fig 6-14Fig 6-156.8. 窗口显示风格点击View菜单。见图Fig 6-16。 Fig 6-16Scale Y Axis Up：将Y轴坐标标尺放大一倍。（图谱缩小一倍）Scale Y Axis Down：将Y轴坐标标尺缩小一倍。（图谱放大一倍）Reset Y Axes/Reset Axes：恢复到原来的坐标标尺。Autoscale Y Axis/Autoscale：使用自动坐标标尺。Overlay图谱组合显示Fig 6-17Stack叠层排列Fig 6-18Tile平铺排列Fig 6-19注意：当显示的组合图谱数量超过7个以上时，图谱会变得很小，有些坐标值可能无法显示。可以删除某些不必要的图谱曲线，改善这一状况。6.9. 使用GOTO 功能在测量时，可以使仪器到某一指定的波长读取一个测量值。在测量窗口中选择Spectrophotometer菜单中Wavelength Drive选项。或按按钮。见图Fig 6-20。Fig 6-20在对话框中输入波长值后按OK按钮。仪器将波长移动到设定波长，并显示读数。6.10. 图谱连续打印功能波长扫描和时间扫描的图谱可以使用图谱连续打印功能。即同时打印多个数据文件。（可以连续打印多达1000个数据文件）选择File菜单中Plot Spectra选项。见图Fig 6-21。Fig 6-21点击Select File按钮。见图Fig 6-22。Fig 6-22选择需要共同打印的图谱。在列表中显示需要共同打印的图谱文件名。见Fig 6-23。Fig 6-23按Print按钮，开始打印。附录A. 标准样品回归A.1. 概要UV Solutions软件提供四种标准样品回归方法。l 一阶线性回归方法l 二阶回归方法l 三阶回归方法l 连线回归方法A.2. 一阶线性回归方法采用最小两乘法回归，最多可以输入20个标准样品点。回归的公式如下：x：标准样品的浓度值y：标准样品测量的吸光度值n：标准样品的个数A.3. 二阶线归方法采用最小两乘法回归，最多可以输入20个标准样品点。回归的公式如下：x：标准样品的浓度值y：标准样品测量的吸光度值n：标准样品的个数A.4. 三阶线归方法采用最小两乘法回归，最多可以输入20个标准样品点。回归的公式如下：x：标准样品的浓度值y：标准样品测量的吸光度值n：标准样品的个数A.5. 连线回归方法当对混合样品进行回归时，可能出现回归曲线的非线性状况此时可以使用连线方式进行回归。最多可以输入20个标准样品点。图Fig A-1是采用连线方式回归的非线性曲线。对于超出标样的部分，使用连线延长的方式。Fig A-1注意：通常标准样品的回归曲线因该近视于直线。1. 正确的标准样品回归时，标准样品的浓度和吸光度Abs的对应关系因该是递增或递减的。当出现标准样品的浓度和吸光度Abs的对应关系是递减的关系，请确保空白样品是所有标准样品中吸光度最高的。如果标准样品的浓度和吸光度Abs的对应关系不是递增关系会出现图Fig A-2的现象。如果在递减关系中空白样品的吸光度值小于其他标准样品会出现图Fig A-3的现象。Fig A-2Fig A-32. 标准样品重新测量。当完成标准样品测量建立标准样品回归曲线以后，根据需要还可以进行某一个或多个标准样品重新测量。见图Fig A-4。Fig A-4B. 比率计算功能B.1. 概要比率计算主要用于酶动力学分析。这种测量方法广泛地应用于医院临床和生化技术。这是一种以测量单位时间的吸光度的变化来计算浓度的方法。B.2. 计算方法图Fig B-1是酶动力学测试的计算原理。在按下Measurement测量按钮后，经过初期延时，开始进行读数采样。通过对采样值进行最小两乘法回归，可以得到斜率和活性值。Fig B-1使用最小两乘法处理测量数据。方法如下：xi：采样数据的间隔时间yi：采样数据的吸光度值n：采样的个数相关系数CD值l 斜率为：（每分钟） （/min） Tk：1minl 活性值 k：系数l R相关系数l R2相关系数注意：如果计算的时间范围设置不对（超出测量时间），那么软件将自动按照测量时间进行运算。C. 回归曲线的相关系数C.1. 计算方法根据下列公式进行计算。差值：DIFF：相对偏差：RD：t：相关系数：相关系数R2：C.2. 相关系数使用方法相关系数是用以表示所制作的标准样品回归曲线的好坏。相关系数越是接近于1，就表示所制作的标准样品回归曲线线性越好。反之，相关系数越是偏离1，表示所制作的标准样品回归曲线线性越差，可以重新测量标准样品来改善。下面将举例说明。当采用一阶线性回归时，相关系数与1相差较大。当采用二阶回归时，相关系数接近于1。上述例子说明，根据相关系数的判定，可以看出上述标准样品采用二阶回归方法要比使用一阶回归方法好。D. 面积积分D.1. 概要UV Solution软件提供三种面积积分的方法。l Rectangular矩形积分法l Trapezoid梯形积分法l Romberg积分法D.2. Rectangular矩形积分法矩形积分法是三种积分方法中最简单的。每个样品的采样间隔等于每个计算的最小面积。一个峰的面积等于这些面积的总和。下图Fig D-1显示的是采用矩形积分法。当采用这种方法处理比较小的峰值时，会有较大的误差。Fig D-1D.3. Trapezoid梯形积分法梯形积分法是矩形积分方法的改进。每个样品的采样间隔等于每个计算的最小面积。每个积分面积等于一个矩形面积加一个三角形面积。下图Fig D-2显示的是采用梯形积分法。Fig D-2对于每一个积分面积的方式如下图Fig D-3。Fig D-3每个积分面积由一个矩形加上一个三角形的面积组成。IT为每个积分面积，It为三角形的面积。公式如下：整个峰面积积分公式为D.4. Romberg积分法Romberg积分法是积分精度最高的积分方法。是采用多种不同步长的梯形积分。从而使得峰面积积分更为准确。当然积分的步长值无法任意缩小，因为积分步长值是以采样数据点所决定的。所以Romberg积分法是采用步长增大的方法，根据具体需要可以使用2倍或4倍的步长值。方法如下：1. 每一个测量点采用梯形积分方法。2. 每两个测量点再采用一次梯形积分方法。3. 将上述的到的两次积分面积进行如下运算。IR：是Romberg积分法计算得到的面积。In：是每一个测量点采用梯形积分法得到的面积。I2n：是每两个测量点采用梯形积分法得到的面积。E. 平滑滤波E.1. 概要UV Solution软件提供三种平滑滤波的方法。l Savitsky-Golay滤波法l Mean移动平均滤波法l Median中值滤波法E.2. Savitsky-Golay滤波法这种滤波方法请参考文献。Gorry, P.A.: General Least-Squares Smoothing andDifferentiation by the Convolution (Savitsky-Golay) Method; Anal. Chem. 1990, 62, 570-573.E.3. Mean移动平均滤波法移动平均滤波法是指通过逐点地对一组的数据，进行平均滤波处理。以下的例子是对数据采用7点移动平均滤波法进行处理：nmAbsAbs600.00.6763-599.50.6855-599.00.7082-598.50.73850.7538598.00.78360.7901597.50.82420.8367597.00.86040.8904596.50.93030.9513596.01.01141.0176595.51.08461.0901595.01.1649594.51.2472594.01.3316进行移动平均滤波时，滤波点的个数是奇数，如果输入了一个偶数，那么软件将会自动多加一点。例如，输入滤波点个数为8，那么软件实际的滤波点数是9。即输入滤波点个数8和9的结果是完全一样的。E.4. Median中值滤波法移动平均滤波法是指通过逐点地对一组的数据，进行取中值的滤波处理方法。以下的例子是对数据采用7点中值平均滤波法进行处理：nmAbsAbs600.00.6763-599.50.6855-599.00.7082-598.50.73850.7385598.00.78360.7836597.50.82420.8242597.00.86040.8604596.50.93030.9303596.01.01141.0114595.51.08461.0846595.01.1649594.51.2472594.01.3316进行中值滤波时，滤波点的个数是奇数，如果输入了一个偶数，那么软件将会自动多加一点。例如，输入滤波点个数为8，那么软件实际的滤波点数是9。即输入滤波点个数8和9的结果是完全一样的。