《生物化学重点》word版.doc

肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆虿蚅芆芈蒂羄芅莀蚈羀芄薃蒁袆芃节螆螂节莅蕿肁芁蒇螄羇芀蕿薇袃莀艿螃蝿羆莁薅蚅羅蒄螁肃羄芃蚄罿羄莆衿袅羃蒈蚂螁羂薀蒅肀羁芀蚀羆肀莂蒃袂聿蒅虿螈肈膄蒁螄肈莆螇肂肇葿薀羈肆薁螅袄肅芁薈螀肄莃螃蚆膃蒅薆羅膂膅螂袁膂芇薅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节蒆羈膈莄蚁袃膇蒆蒄蝿芆膆腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂虿羁肂薁蚈螁袅蒇蚇袃膀莃蚇羅羃艿蚆蚅腿膅蚅螇羁蒃螄袀膇荿螃羂羀芅螂蚂膅膁螁袄羈薀螁羆芄蒆螀聿肆莂蝿螈节芈莅袁肅膄莄羃芀蒂蒄蚃肃莈蒃螅芈芄蒂羇肁芀蒁聿羄蕿蒀蝿腿蒅葿袁羂莁蒈羄膈芇薈蚃羁膃薇螆膆蒂薆袈罿蒈薅肀膄莄薄螀肇芀薃袂芃膆薂羅肅蒄薂蚄芁莀蚁螇肄芆蚀衿艿膂 生物化学重点 第一章绪论一、生物化学的的概念：生物化学（biochemistry)是利用化学的原理与方法去探讨生命的一门科学，它是介于化学、生物学及物理学之间的一门边缘学科。 二、生物化学的发展：1叙述生物化学阶段：是生物化学发展的萌芽阶段，其主要的工作是分析和研究生物体的组成成分以及生物体的分泌物和排泄物。2动态生物化学阶段：是生物化学蓬勃发展的时期。就在这一时期，人们基本上弄清了生物体12二级结构：指多肽链主链骨架盘绕折叠而形成的构象，借氢键维系。主要有以下几种类型：-螺旋：其结构特征为：主链骨架围绕中心轴盘绕形成右手螺旋；螺旋每上升一圈是3.6个氨基酸残基，螺距为0.54nm；相邻螺旋圈之间形成许多氢键；侧链基团位于螺旋的外侧。影响-螺旋形成的因素主要是：存在侧链基团较大的氨基酸残基；连续存在带相同电荷的氨基酸残基；存在脯氨酸残基。-折叠：其结构特征为：若干条肽链或肽段平行或反平行排列成片；所有肽键的C=O和NH形成链间氢键；侧链基团分别交替位于片层的上、下方。-转角：多肽链180回折部分，通常由四个氨基酸残基构成，借1、4残基之间形成氢键维系。无规卷曲：主链骨架无规律盘绕的部分。3三级结构：指多肽链所有原子的空间排布。其维系键主要是非共价键（次级键）：氢键、疏水键、范德华力、离子键等，也可涉及二硫键。4四级结构：指亚基之间的立体排布、接触部位的布局等，其维系键为非共价键。亚基是指参与构成蛋白质四级结构的而又具有独立三级结构的多肽链。 五、蛋白质的理化性质：1两性解离与等电点：蛋白质分子中仍然存在游离的氨基和游离的羧基，因此蛋白质与氨基酸一样具有两性解离的性质。蛋白质分子所带正、负电荷相等时溶液的pH值称为蛋白质的等电点。2蛋白质的胶体性质：蛋白质具有亲水溶胶的性质。蛋白质分子表面的水化膜和表面电荷是稳定蛋白质亲水溶胶的两个重要因素。3蛋白质的紫外吸收：蛋白质分子中的色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸残基对紫外光有吸收，以色氨酸吸收最强，最大吸收峰为280nm。4蛋白质的变性：蛋白质在某些理化因素的作用下，其特定的空间结构被破坏而导致其理化性质改变及生物活性丧失，这种现象称为蛋白质的变性。引起蛋白质变性的因素有：高温、高压、电离辐射、超声波、紫外线及有机溶剂、重金属盐、强酸强碱等。绝大多数蛋白质分子的变性是不可逆的。 六、蛋白质的分离与纯化：1盐析与有机溶剂沉淀：在蛋白质溶液中加入大量中性盐，以破坏蛋白质的胶体性质，使蛋白质从溶液中沉淀析出，称为盐析。常用的中性盐有：硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等。盐析时，溶液的pH在蛋白质的等电点处效果最好。凡能与水以任意比例混合的有机溶剂，如乙醇、甲醇、丙酮等，均可引起蛋白质沉淀。2电泳：蛋白质分子在高于或低于其pI的溶液中带净的负或正电荷，因此在电场中可以移动。电泳迁移率的大小主要取决于蛋白质分子所带电荷量以及分子大小。3透析：利用透析袋膜的超滤性质，可将大分子物质与小分子物质分离开。4层析：利用混合物中各组分理化性质的差异，在相互接触的两相（固定相与流动相）之间的分布不同而进行分离。主要有离子交换层析，凝胶层析，吸附层析及亲和层析等，其中凝胶层析可用于测定蛋白质的分子量。5超速离心：利用物质密度的不同，经超速离心后，分布于不同的液层而分离。超速离心也可用来测定蛋白质的分子量，蛋白质的分子量与其沉降系数S成正比。 七、氨基酸顺序分析：蛋白质多肽链的氨基酸顺序分析，即蛋白质一级结构的测定，主要有以下几个步骤：1. 分离纯化蛋白质，得到一定量的蛋白质纯品；2. 取一定量的样品进行完全水解，再测定蛋白质的氨基酸组成；3. 分析蛋白质的N-端和C-端氨基酸；4. 采用特异性的酶（如胰凝乳蛋白酶）或化学试剂（如溴化氰）将蛋白质处理为若干条肽段；5. 分离纯化单一肽段；26. 测定各条肽段的氨基酸顺序。一般采用Edman降解法，用异硫氰酸苯酯进行反应，将氨基酸降解后，逐一进行测定；7. 至少用两种不同的方法处理蛋白质，分别得到其肽段的氨基酸顺序；8. 将两套不同肽段的氨基酸顺序进行比较，以获得完整的蛋白质分子的氨基酸顺序。 第三章核酸的结构与功能一、核酸的化学组成：1含氮碱：参与核酸和核苷酸构成的含氮碱主要分为嘌呤碱和嘧啶碱两大类。组成核苷酸的嘧啶碱主要有三种尿嘧啶（U）、胞嘧啶（C）和胸腺嘧啶（T），它们都是嘧啶的衍生物。组成核苷酸的嘌呤碱主要有两种腺嘌呤（A）和鸟嘌呤（G），它们都是嘌呤的衍生物。2戊糖：核苷酸中的戊糖主要有两种，即-D-核糖与-D-2-脱氧核糖，由此构成的核苷酸也分为核糖核苷酸与脱氧核糖核酸两大类。3核苷：核苷是由戊糖与含氮碱基经脱水缩合而生成的化合物。通常是由核糖或脱氧核糖的C1 -羟基与嘧啶碱N1或嘌呤碱N9进行缩合，故生成的化学键称为，N糖苷键。其中由D-核糖生成者称为核糖核苷，而由脱氧核糖生成者则称为脱氧核糖核苷。由“稀有碱基”所生成的核苷称为“稀有核苷”。假尿苷（）就是由D-核糖的C1与尿嘧啶的C5相连而生成的核苷。 二、核苷酸的结构与命名：核苷酸是由核苷与磷酸经脱水缩合后生成的磷酸酯类化合物，包括核糖核苷酸和脱氧核糖核酸两大类。最常见的核苷酸为5-核苷酸（5常被省略）。5-核苷酸又可按其在5位缩合的磷酸基的多少，分为一磷酸核苷（核苷酸）、二磷酸核苷和三磷酸核苷。此外，生物体内还存在一些特殊的环核苷酸，常见的为环一磷酸腺苷（cAMP）和环一磷酸鸟苷（cGMP），它们通常是作为激素作用的第二信使。核苷酸通常使用缩写符号进行命名。第一位符号用小写字母d代表脱氧，第二位用大写字母代表碱基，第三位用大写字母代表磷酸基的数目，第四位用大写字母P代表磷酸。 三、核酸的一级结构：核苷酸通过3,5-磷酸二酯键连接起来形成的不含侧链的多核苷酸长链化合物就称为核酸。核酸具有方向性，5-位上具有自由磷酸基的末端称为5-端，3-位上具有自由羟基的末端称为3-端。DNA由dAMP、dGMP、dCMP和dTMP四种脱氧核糖核苷酸所组成。DNA的一级结构就是指DNA分子中脱氧核糖核苷酸的种类、数目、排列顺序及连接方式。RNA由AMP，GMP，CMP，UMP四种核糖核苷酸组成。RNA的一级结构就是指RNA分子中核糖核苷酸的种类、数目、排列顺序及连接方式。 四、DNA的二级结构：DNA双螺旋结构是DNA二级结构的一种重要形式，它是Watson和Crick两位科学家于1953年提出来的一种结构模型，其主要实验依据是Chargaff研究小组对DNA的化学组成进行的分析研究，即DNA分子中四种碱基的摩尔百分比为A=T、G=C、A+G=T+C（Chargaff原则），以及由Wilkins研究小组完成的DNA晶体X线衍射图谱分析。天然DNA的二级结构以B型为主，其结构特征为：为右手双螺旋，两条链以反平行方式排列；主链位于螺旋外侧，碱基位于内侧；两条链间存在碱基互补，通过氢键连系，且A-T、G-C（碱基互补原则）；螺旋的稳定因素为氢键和碱基堆砌力；螺旋的螺距为3.4nm，直径为2nm。 五、DNA的超螺旋结构：双螺旋的DNA分子进一步盘旋形成的超螺旋结构称为DNA的三级结构。3绝大多数原核生物的DNA都是共价封闭的环状双螺旋，其三级结构呈麻花状。在真核生物中，双螺旋的DNA分子围绕一蛋白质八聚体进行盘绕，从而形成特殊的串珠状结构，称为核小体。核小体结构属于DNA的三级结构。 六、DNA的功能：DNA的基本功能是作为遗传信息的载体，为生物遗传信息复制以及基因信息的转录提供模板。DNA分子中具有特定生物学功能的片段称为基因（gene）。一个生物体的全部DNA序列称为基因组（genome）。基因组的大小与生物的复杂性有关。 七、RNA的空间结构与功能：RNA分子的种类较多，分子大小变化较大，功能多样化。RNA通常以单链存在，但也可形成局部的双螺旋结构。1mRNA的结构与功能：mRNA是单链核酸，其在真核生物中的初级产物称为HnRNA。大多数真核成熟的mRNA分子具有典型的5-端的7-甲基鸟苷三磷酸（m7GTP）帽子结构和3-端的多聚腺苷酸(polyA)尾巴结构。mRNA的功能是为蛋白质的合成提供模板，分子中带有遗传密码。mRNA分子中每三个相邻的核苷酸组成一组，在蛋白质翻译合成时代表一个特定的氨基酸，这种核苷酸三联体称为遗传密码（coden）。2tRNA的结构与功能：tRNA是分子最小，但含有稀有碱基最多的RNA。tRNA的二级结构由于局部双螺旋的形成而表现为“三叶草”形，故称为“三叶草”结构，可分为五个部分：氨基酸臂：由tRNA的5-端和3-端构成的局部双螺旋，3-端都带有-CCA-OH顺序，可与氨基酸结合而携带氨基酸。DHU臂：含有二氢尿嘧啶核苷，与氨基酰tRNA合成酶的结合有关。反密码臂：其反密码环中部的三个核苷酸组成三联体，在蛋白质生物合成中，可以用来识别mRNA上相应的密码，故称为反密码（anticoden）。 TC臂：含保守的TC顺序，可以识别核蛋白体上的rRNA，促使tRNA与核蛋白体结合。可变臂：位于TC臂和反密码臂之间，功能不详。3rRNA的结构与功能：rRNA是细胞中含量最多的RNA，可与蛋白质一起构成核蛋白体，作为蛋白质生物合成的场所。原核生物中的rRNA有三种：5S，16S，23S。真核生物中的rRNA有四种：5S，5.8S，18S，28S。八、核酶：具有自身催化作用的RNA称为核酶（ribozyme），核酶通常具有特殊的分子结构，如锤头结构。 九、核酸的一般理化性质：核酸具有酸性；粘度大；能吸收紫外光，最大吸收峰为260nm。 十、DNA的变性：在理化因素作用下，DNA双螺旋的两条互补链松散而分开成为单链，从而导致DNA的理化性质及生物学性质发生改变，这种现象称为DNA的变性。引起DNA变性的因素主要有：高温，强酸强碱，有机溶剂等。DNA变性后的性质改变：增色效应：指DNA变性后对260nm紫外光的光吸收度增加的现象；旋光性下降；粘度降低；生物功能丧失或改变。 加热DNA溶液，使其对260nm紫外光的吸收度突然增加，达到其最大值一半时的温度，就是DNA的变性温度（融解温度，Tm）。Tm的高低与DNA分子中G+C的含量有关，G+C的含量越高，则Tm越高。十一、DNA的复性与分子杂交：将变性DNA经退火处理，使其重新形成双螺旋结构的过程，称为DNA的复性。两条来源不同的单链核酸（DNA或RNA），只要它们有大致相同的互补碱基顺序，以退火处理即可复性，形成新的杂种双螺旋，这一现象称为核酸的分子杂交。核酸杂交可以是DNA-DNA，也可以是DNA-RNA杂交。不同来源的，具有大致相同互补碱基顺序的核酸片段称为同源顺序。4常用的核酸分子杂交技术有：原位杂交、斑点杂交、Southern杂交及Northern杂交等。在核酸杂交分析过程中，常将已知顺序的核酸片段用放射性同位素或生物素进行标记，这种带有一定标记的已知顺序的核酸片段称为探针。 十二、核酸酶：凡是能水解核酸的酶都称为核酸酶。凡能从多核苷酸链的末端开始水解核酸的酶称为核酸外切酶，凡能从多核苷酸链中间开始水解核酸的酶称为核酸内切酶。能识别特定的核苷酸顺序，并从特定位点水解核酸的内切酶称为限制性核酸内切酶（限制酶） 第四章酶一、酶的概念：酶（enzyme）是由活细胞产生的生物催化剂，这种催化剂具有极高的催化效率和高度的底物特异性，其化学本质是蛋白质。酶按照其分子结构可分为单体酶、寡聚酶和多酶体系（多酶复合体和多功能酶）三大类。二、酶的分子组成：酶分子可根据其化学组成的不同，可分为单纯酶和结合酶（全酶）两类。结合酶则是由酶蛋白和辅助因子两部分构成，酶蛋白部分主要与酶的底物特异性有关，辅助因子则与酶的催化活性有关。与酶蛋白疏松结合并与酶的催化活性有关的耐热低分子有机化合物称为辅酶。与酶蛋白牢固结合并与酶的催化活性有关的耐热低分子有机化合物称为辅基。 三、辅酶与辅基的来源及其生理功用：辅酶与辅基的生理功用主要是：运载氢原子或电子，参与氧化还原反应。运载反应基团，如酰基、氨基、烷基、羧基及一碳单位等，参与基团转移。大部分的辅酶与辅基衍生于维生素。维生素（vitamin)是指一类维持细胞正常功能所必需的，但在许多生物体内不能自身合成而必须由食物供给的小分子有机化合物。维生素可按其溶解性的不同分为脂溶性维生素和水溶性维生素两大类。脂溶性维生素有VitA、VitD、VitE和VitK四种；水溶性维生素有VitB1，VitB2，VitPP，VitB6，VitB12，VitC，泛酸，生物素，叶酸等。1.TPP：即焦磷酸硫胺素，由硫胺素（Vit B1）焦磷酸化而生成，是脱羧酶的辅酶，在体内参与糖代谢过程中-酮酸的氧化脱羧反应。2.FMN和FAD：即黄素单核苷酸（FMN）和黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD），是核黄素（VitB2）的衍生物。FMN或FAD通常作为脱氢酶的辅基，在酶促反应中作为递氢体（双递氢体）。3.NAD+和NADP+：即尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+，辅酶）和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+，辅酶），是Vit PP的衍生物。NAD+和NADP+主要作为脱氢酶的辅酶，在酶促反应中起递氢体的作用，为单递氢体。4.磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺：是Vit B6的衍生物。磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺可作为氨基转移酶，氨基酸脱羧酶，半胱氨酸脱硫酶等的辅酶。5.CoA：泛酸（遍多酸）在体内参与构成辅酶A（CoA）。CoA中的巯基可与羧基以高能硫酯键结合，在糖、脂、蛋白质代谢中起传递酰基的作用，是酰化酶的辅酶。6.生物素：是羧化酶的辅基，在体内参与CO2的固定和羧化反应。7. FH4：由叶酸衍生而来。四氢叶酸是体内一碳单位基团转移酶系统中的辅酶。8. Vit B12衍生物：Vit B12分子中含金属元素钴，故又称为钴胺素。Vit B12在体内有多种活性形式，如5-脱氧腺苷钴胺素、甲基钴胺素等。其中，5-脱氧腺苷钴胺素参与构成变位酶的辅酶，甲基钴胺素则是甲基转移酶的辅酶。 5四、金属离子的作用：1. 稳定构象：稳定酶蛋白催化活性所必需的分子构象；2. 构成酶的活性中心：作为酶的活性中心的组成成分，参与构成酶的活性中心；3. 连接作用：作为桥梁，将底物分子与酶蛋白螯合起来。 五、酶的活性中心：酶分子上具有一定空间构象的部位，该部位化学基团集中，直接参与将底物转变为产物的反应过程，这一部位就称为酶的活性中心。参与构成酶的活性中心的化学基团，有些是与底物相结合的，称为结合基团，有些是催化底物反应转变成产物的，称为催化基团，这两类基团统称为活性中心内必需基团。在酶的活性中心以外，也存在一些化学基团，主要与维系酶的空间构象有关，称为酶活性中心外必需基团。 六、酶促反应的特点：1具有极高的催化效率：酶的催化效率可比一般催化剂高1061020倍。酶能与底物形成ES中间复合物，从而改变化学反应的进程，使反应所需活化能阈大大降低，活化分子的数目大大增加，从而加速反应进行。2具有高度的底物特异性：一种酶只作用于一种或一类化合物，以促进一定的化学变化，生成一定的产物，这种现象称为酶作用的特异性。绝对特异性：一种酶只能作用于一种化合物，以催化一种化学反应，称为绝对特异性，如琥珀酸脱氢酶。 相对特异性：一种酶只能作用于一类化合物或一种化学键，催化一类化学反应，称为相对特异性，如脂肪酶。 立体异构特异性：一种酶只能作用于一种立体异构体，或只能生成一种立体异构体，称为立体异构特异性，如L-精氨酸酶。3酶的催化活性是可以调节的：如代谢物可调节酶的催化活性，对酶分子的共价修饰可改变酶的催化活性，也可通过改变酶蛋白的合成来改变其催化活性。 七、酶促反应的机制：1中间复合物学说与诱导契合学说：酶催化时，酶活性中心首先与底物结合生成一种酶-底物复合物（ES），此复合物再分解释放出酶，并生成产物，即为中间复合物学说。当底物与酶接近时，底物分子可以诱导酶活性中心的构象以生改变，使之成为能与底物分子密切结合的构象，这就是诱导契合学说。2与酶的高效率催化有关的因素：趋近效应与定向作用；张力作用；酸碱催化作用；共价催化作用；酶活性中心的低介电区（表面效应）。 八、酶促反应动力学：酶反应动力学主要研究酶催化的反应速度以及影响反应速度的各种因素。在探讨各种因素对酶促反应速度的影响时，通常测定其初始速度来代表酶促反应速度，即底物转化量<5%时的反应速度。1底物浓度对反应速度的影响：底物对酶促反应的饱和现象：由实验观察到，在酶浓度不变时，不同的底物浓度与反应速度的关系为一矩形双曲线，即当底物浓度较低时，反应速度的增加与底物浓度的增加成正比（一级反应）；此后，随底物浓度的增加，反应速度的增加量逐渐减少（混合级反应）；最后，当底物浓度增加到一定量时，反应速度达到一最大值，不再随底物浓度的增加而增加（零级反应）。米氏方程及米氏常数：根据上述实验结果，Michaelis & Menten 于1913年推导出了上述矩形双曲线的数学表达式，即米氏方程： = VmaxS/(Km+S)。其中，Vmax为最大反应速度，Km为米氏常数。 Km和Vmax的意义：当=Vmax/2时，Km=S。因此，Km等于酶促反应速度达最大值一半时的底物浓度。当k-1>>k+2时，Km=k-1/k+1=Ks。因此，Km可以反映酶与底物亲和力的大小，即Km值越小，则酶 6与底物的亲和力越大；反之，则越小。Km可用于判断反应级数：当S<0.01Km时，=（Vmax/Km）S，反应为一级反应，即反应速度与底物浓度成正比；当S>100Km时，=Vmax，反应为零级反应，即反应速度与底物浓度无关；当0.01Km<S<100Km时，反应处于零级反应和一级反应之间，为混合级反应。Km是酶的特征性常数：在一定条件下，某种酶的Km值是恒定的，因而可以通过测定不同酶（特别是一组同工酶）的Km值，来判断是否为不同的酶。Km可用来判断酶的最适底物：当酶有几种不同的底物存在时，Km值最小者，为该酶的最适底物。Km可用来确定酶活性测定时所需的底物浓度：当S=10Km时，=91%Vmax，为最合适的测定酶活性所需的底物浓度。Vmax可用于酶的转换数的计算：当酶的总浓度和最大速度已知时，可计算出酶的转换数，即单位时间内每个酶分子催化底物转变为产物的分子数。Km和Vmax的测定：主要采用Lineweaver-Burk双倒数作图法和Hanes作图法。2酶浓度对反应速度的影响：当反应系统中底物的浓度足够大时，酶促反应速度与酶浓度成正比，即=kE。3温度对反应速度的影响：一般来说，酶促反应速度随温度的增高而加快，但当温度增加达到某一点后，由于酶蛋白的热变性作用，反应速度迅速下降。酶促反应速度随温度升高而达到一最大值时的温度就称为酶的最适温度。酶的最适温度与实验条件有关，因而它不是酶的特征性常数。低温时由于活化分子数目减少，反应速度降低，但温度升高后，酶活性又可恢复。4pH对反应速度的影响：观察pH对酶促反应速度的影响，通常为一钟形曲线，即pH过高或过低均可导致酶催化活性的下降。酶催化活性最高时溶液的pH值就称为酶的最适pH。人体内大多数酶的最适pH在6.58.0之间。酶的最适pH不是酶的特征性常数。5抑制剂对反应速度的影响：凡是能降低酶促反应速度，但不引起酶分子变性失活的物质统称为酶的抑制剂。按照抑制剂的抑制作用，可将其分为不可逆抑制作用和可逆抑制作用两大类。不可逆抑制作用：抑制剂与酶分子的必需基团共价结合引起酶活性的抑制，且不能采用透析等简单方法使酶活性恢复的抑制作用就是不可逆抑制作用。如果以E作图，就可得到一组斜率相同的平行线，随抑制剂浓度的增加而平行向右移动。酶的不可逆抑制作用包括专一性抑制（如有机磷农药对胆碱酯酶的抑制）和非专一性抑制（如路易斯气对巯基酶的抑制）两种。可逆抑制作用：抑制剂以非共价键与酶分子可逆性结合造成酶活性的抑制，且可采用透析等简单方法去除抑制剂而使酶活性完全恢复的抑制作用就是可逆抑制作用。如果以E作图，可得到一组随抑制剂浓度增加而斜率降低的直线。可逆抑制作用包括竞争性、反竞争性和非竞争性抑制几种类型。竞争性抑制：抑制剂与底物竞争与酶的同一活性中心结合，从而干扰了酶与底物的结合，使酶的催化活性降低，这种作用就称为竞争性抑制作用。其特点为：a.竞争性抑制剂往往是酶的底物类似物或反应产物；b.抑制剂与酶的结合部位与底物与酶的结合部位相同；c.抑制剂浓度越大，则抑制作用越大；但增加底物浓度可使抑制程度减小；d.动力学参数：Km值增大，Vm值不变。典型的例子是丙二酸对琥珀酸脱氢酶（底物为琥珀酸）的竞争性抑制和磺胺类药物（对氨基苯磺酰胺）对二氢叶酸合成酶（底物为对氨基苯甲酸）的竞争性抑制。反竞争性抑制：抑制剂不能与游离酶结合，但可与ES复合物结合并阻止产物生成，使酶的催化活性降低，称酶的反竞争性抑制。其特点为：a.抑制剂与底物可同时与酶的不同部位结合；b.必须有底物存在，抑制剂才能对酶产生抑制作用；c.动力学参数：Km减小，Vm降低。非竞争性抑制：抑制剂既可以与游离酶结合，也可以与ES复合物结合，使酶的催化活性降低，称为非竞争性抑制。其特点为：a.底物和抑制剂分别独立地与酶的不同部位相结合；b.抑制剂对酶与底物的结合无影响，故底物浓度的改变对抑制程度无影响；c.动力学参数：Km值不变，Vm值降低。6激活剂对反应速度的影响：能够促使酶促反应速度加快的物质称为酶的激活剂。酶的激活剂大多数是金属离 7子，如K+、Mg2+、Mn2+等，唾液淀粉酶的激活剂为Cl-。 九、酶的调节：可以通过改变其催化活性而使整个代谢反应的速度或方向发生改变的酶就称为限速酶或关键酶。酶活性的调节可以通过改变其结构而使其催化活性以生改变，也可以通过改变其含量来改变其催化活性，还可以通过以不同形式的酶在不同组织中的分布差异来调节代谢活动。1酶结构的调节：通过对现有酶分子结构的影响来改变酶的催化活性。这是一种快速调节方式。变构调节