高考生物 第十单元 专题二十二 微生物的利用课件.ppt

专题二十二微生物的利用 微生物的实验室培养 1 微生物的培养 称量 灭菌 倒平板 平板划线 稀释涂布平板法 1 无菌技术 主要包括 消毒方法 常用法 法 常用灭菌方法 灭菌 接种环 接种针等金属器具 灭菌 主要针对玻璃器皿等 灭菌 主要针对等 消毒和灭菌 煮沸消毒 巴氏消毒 灼烧 干热 高压蒸汽 培养基 2 如图为倒平板操作过程 操作时要待培养基时 在附近进行 制备固体培养基最后要将平板倒置 其主要目的是 冷却到50 左右 酒精灯火焰 防止培养皿盖上的水珠滴入培养 基造成污染 3 平板划线操作 接种环 琼脂固体 4 稀释涂布平板法 先将菌液进行后涂布平板 在稀释度足够高的菌液里 聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞 从而在培养基表面形成 一系列梯度稀释 单个菌落 2 菌种保藏的两种方法 4 冰箱 甘油保藏法保存 微生物的分离与计数 1 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1 微生物的筛选原理 人为提供的条件 包括营养 温度 pH等 同时其他微生物生长 可以通过配制培养基 控制等选择目的微生物 2 活菌数目的计数 法和 有利于目的菌株生长 抑制或阻止 选择 培养条件 稀释涂布平板 显微镜直接计数法 3 实验流程 土壤溶液 系列稀释 4 尿素分解菌的鉴定 在以为唯一氮源的培养基中加入 培养某种细菌后 如果pH升高 指示剂将 说明该细菌能够 尿素 酚红指示剂 变红 分解尿素 2 分解纤维素的细菌的分离 1 鉴定纤维素分解菌的方法 利用染色法 如果含有的培养基中出现 则说明很可能含有纤维素分解菌 2 纤维素分解菌的筛选原理 刚果红可以与形成红色复合物 但并不和水解后的发生这种反应 刚果红 纤维素 透明圈 纤维素 纤维二糖和葡萄糖 3 分离土壤中纤维素分解菌的实验方案 富含纤维素 增加纤维素分解菌的浓度 鉴别纤维素分解菌 产生透明圈的菌落 1 比较选择培养基与鉴别培养基 微生物的实验室培养 2 消毒与灭菌的比较 典例1 2014 山东四市联考 从土壤中分离分解尿素的细菌的一般过程为 采集土样 稀释 纯化分离 性能测定 下表为分离分解尿素的细菌所用的培养基配方 据图表信息 回答有关问题 1 该培养基含有培养微生物所需要的各种基本成分 其中最主要的碳源是 氮源是 2 获得纯净培养物的关键是 其中培养基常用 法灭菌 3 微生物分离纯化的方法通常有 法和 法 如果计数 只能用 法 在下面所示的四种菌落分布图中 不可能是用该方法得到的是 填字母 4 鉴定某种细菌是否能够分解尿素 应该在培养基中加入 指示剂 若该细菌能够分解尿素 则指示剂变为 色 原理是 5 如图是微生物平板划线示意图 划线的顺序为1 2 3 4 5 下列操作方法正确的是 A 操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B 划线操作必须在火焰上进行C 在5区域中才可以得到所需菌落D 在1 2 3 4 5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌 解析 1 微生物培养的培养基的基本成分是碳源 氮源 水 无机盐 题中表格内显示的主要碳源是葡萄糖 氮源是尿素 2 培养基的灭菌常用高压蒸汽灭菌法 3 分离纯化微生物常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法 计数时只能用稀释涂布平板法 4 在细菌分解尿素的过程中 细菌合成的脲酶将尿素分解成氨 氨会使培养基的pH升高 5 在每次划线前后都要对接种环进行灭菌 接种环的灭菌方法是在酒精灯上灼烧 接种时划线操作是在酒精灯火焰附近进行的 在5个区域中 只要有单个活的所需细菌 通过培养即可获得所需菌落 答案 1 葡萄糖尿素 2 防止外来杂菌的入侵高压蒸汽灭菌 3 平板划线稀释涂布平板稀释涂布平板D 4 酚红红在细菌分解尿素的过程中 细菌合成的脲酶将尿素分解成氨 氨会使培养基的pH升高 5 D 1 分离微生物的两种常用方法 微生物的分离与计数 2 尿素细菌与纤维素分解菌筛选原理的比较 3 微生物的数量测定方法 典例2 2015 河南郑州模拟 35 40 的甲醛水溶液 福尔马林 可作为防腐剂 其防腐的原理是使蛋白质变性 自然界中存在能分解甲醛的细菌和真菌 如图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程 请分析回答有关问题 1 过程的目的是 过程培养出的是 2 上述实验中 不需要进行灭菌处理的是 培养基灭菌的常用方法为 3 由 的接种可选用 法 通过培养能获得 经过 过程后 取样测定甲醛浓度 选出 再分离 培养菌株 此菌种异化作用的类型是 4 为研究甲醛初始浓度对菌株降解甲醛能力的影响 进行了相应实验并得到如图结果 由图可知 当甲醛的初始浓度小于1200mg L时 菌株 当甲醛的初始浓度增高至1600mg L时 48h后菌株对甲醛的降解能力很弱 甚至失去降解能力 其原因可能是 5 欲检测上述活性污泥中细菌总数 下列操作的叙述 其中错误的是 A 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基 经高温 高压灭菌后倒平板B 取104 105 106倍的土壤稀释液和无菌水各0 1mL 分别涂布于各组平板上C 将实验组和对照组平板倒置 37 恒温培养24 48小时D 确定对照组无菌后 选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 解析 过程是扩大培养 其目的是增加目的菌的数量 浓度 过程培养基中甲醛为唯一碳源 用以筛选出分解甲醛的细菌 活性污泥含菌种 不需灭菌 其余培养基及装置都要经过灭菌 常用的在固体培养基上接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法 通过 过程的选择培养 可得到单个菌落 经过 过程培养 根据培养液中甲醛的浓度可判断该菌种分解甲醛的能力 甲醛浓度越低 该菌种分解甲醛的能力越强 图中甲醛初始浓度为400 1200mg L的3条曲线最终都可降到0 说明该初始浓度的甲醛可被完全降解 采用稀释涂布平板法统计菌落数目时 一般选择菌落数在30 300的平板进行计数 答案 1 增加目的菌的菌群数量 提高目的菌的种群密度 以甲醛为唯一碳源的细菌 2 活性污泥高压蒸汽灭菌法 3 平板划线 稀释涂布平板 单个菌落甲醛浓度最低的培养瓶需氧型 4 可以完全降解甲醛甲醛浓度过高会使菌体蛋白质变性 从而降低了细菌降解甲醛的能力 甲醛浓度过高会产生毒害作用 降低了细菌降解甲醛的能力 5 D 以题说法 关注微生物分离与计数中的 两个对照组 一个重复组 1 两个对照组 2 一个重复组为了排除偶然因素的影响 确保计数准确 在同一稀释度下 至少对3个平板进行重复计数 然后求出平均值 并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目 如果某个平板的菌落数与其他差别甚远 说明该平板操作过程中出现失误 应舍弃