T淋巴细胞结果的解读.ppt

T细胞亚群结果的解读 淋巴细胞分化图 按T细胞所处的活化阶段初始T细胞 naiveTcell 效应T细胞 effectorTcell 记忆性T细胞 memoryTcell 按T细胞表面受体 TCR 分类 T细胞 T细胞 按T细胞CD4和CD8分子表型CD4 T细胞CD8 T细胞按T细胞的功能分类Th 辅助T细胞 TS 抑制T细胞 Tr 调节T细胞 T淋巴细胞的分类方法 外周血中各亚群占淋巴细胞总数的比例 60 80 27 51 15 44 T淋巴细胞 CD4T淋巴细胞 CD8T淋巴细胞 淋巴细胞监测注重数量 比例 功能相结合 血液分析常规检测 依据白细胞 淋巴细胞比例及计数绑定机体免疫状况 无法精确判断 T淋巴细胞亚群比例检测 临床常用 但较片面 T淋巴细胞亚群数量 观察免疫细胞数值变化 评估免疫状况 通常采用流式细胞仪法 特别针对CD4的检测 已成为 金标准 功能 数量 比例结合 更精确评估机体免疫状态 1 2 3 4 目前临床主要可以做以下项目的检测 淋巴细胞亚群 T B NK 的比例和计数T细胞亚群 CD4 细胞 CD8 细胞 CD4 CD8 比值 MHLA DR 单核细胞HLA DR CD4CD25Treg 调节细胞 及Th17细胞 我们工作 目前国内绝大多数医院没有开展淋巴细胞计数项目 BD 健康中国人参考范围 CD4 CD8 T淋巴细胞的计数方法一 FCM 取100 l全血 加三种不同荧光素标记的鼠抗人CD3 CD4 CD8McAb 阴性对照 加红细胞裂解液 溶血 离心 弃上清 用PBS洗1次 PBS重悬细胞 上机检测 FCM分析电子计算机自动计算出阳性细胞百分率及总细胞计数 简单 快速 相对精确 CD3 T细胞正常范围为 50 84 CD4 T细胞正常范围为 27 51 CD8 T细胞正常范围为 15 44 CD19 B细胞正常范围为 5 18 与血细胞计数仪联用 得出各淋巴细胞百分比后乘以淋巴细胞数量 得出各淋巴细胞的绝对浓度 CD4T淋巴细胞的计数方法二 推算 不精确 繁琐 省钱 举例如下 患者血常规中淋巴细胞计数为0 63 109 L 淋巴细胞比例测定结果CD3为64 9 CD4为32 5 CD8为31 1 CD3细胞计数为0 63 109 L 64 9 0 41 109 LCD4细胞计数为0 63 109 L 32 5 0 20 109 LCD8细胞计数为0 63 109 L 31 1 0 19 109 L 推 算 单核细胞人类白细胞抗原DR CD14 HLA DR CD14为LPS复合物受体 主要分布在单核细胞 HLA DR为活化标志 CD14 HLA DR可反映人体细胞免疫功能 30 提示免疫麻痹 也有人认为HLA DR浓度如果连续两天低于8000AB C可认为存在免疫麻痹 广泛应用于临床 T淋巴细胞亚群研究 研究逐年增多 淋巴细胞亚群变化的常见临床意义 CD4淋巴细胞减少 见于恶性肿瘤 遗传性免疫缺陷病 艾滋病 应用免疫抑制剂的患者CD8淋巴细胞增多 见于自身免疫性疾病 如系统性红斑狼疮 SLE 艾滋病初期 慢性活动性肝炎 肿瘤及病毒感染等CD4 CD8比值异常 比值降低 一般被称为 免疫抑制 状态 常见于免疫缺陷病 恶性肿瘤 再生障碍性贫血 白血病 某些病毒感染等比值增高 表明细胞免疫功能处于 过度活跃 状态 容易出现自体免疫反应 此外还可用于监测器官移植的排斥反应 若移植后CD4 CD8较移植前明显增加 则可能发生排异反应 15 Theshiftfromapro in flammatorytoananti inflammatoryimmuneresponsepredominantatthesystemiclevellikelyoccursbefore24hafterdiagnosisofshock 脓毒症休克期存在免疫麻痹 存在免疫麻痹的Septic患者死亡率大大增加 100名septic患者 28天死亡 无免疫麻痹 免疫麻痹 脓毒症休克患者T淋巴细胞凋亡 存在免疫紊乱 存活与死亡Septic中T淋巴细胞亚群的变化 一项对院内感染的老年脓毒症患者的前瞻性对照研究 Injury Int J CareInjured 2007 38 1346 1357 严重多发伤患者免疫细胞的变化特点 CD4 CD8降低 MHLA DR降低 T细胞及单核细胞凋亡增加 烧伤患者早期外周血淋巴细胞亚群的变化特点 烧伤患者白细胞低于正常组早期CD3 CD4 CD8细胞计数均明显下降 HLA DR表达降低 CD4 CD8比值下降 CD4T细胞亚群新分类 Th1 Th2 Treg Th17 我们的研究 抗炎细胞Treg及其分泌的抗炎介质IL 10 促炎细胞Th17及分泌的促炎介质IL 17 IL 6在人体的炎性免疫稳态中发挥重要作用 23 中国呼吸与危重监护杂志 2010 09 04 416 418 结论一 脓毒症患者中Treg明显升高 表明抗炎反应的增强 24 结论二 在脓毒症患者中Th17表达明显升高 吴铁军 亢翠翠 中华急诊医学杂志 2012 21 04 378 380 脓毒症组 对照组 脓毒症患者中Th17表达明显升高 提示促炎反应的增强 25 重症脓毒症患者淋巴细胞增殖能力低下 凋亡 淋巴细胞Ag NoR在健康组中的表达 淋巴细胞Ag NoR在Sepsis组中的表达 吴铁军 张丽娜中国呼吸与危重监护杂志 2010 09 04 416 418 脓毒症组 对照组 重症脓毒症患者存在免疫麻痹 中国急救医学杂志 2011 31 9 836 838 CD14 单核细胞人类白细胞抗原 DR HLA DR 表达情况 对照组 脓毒症组 27 T淋巴细胞亚群的研究越来越多某种T细胞亚群过高或过低 都提示存在免疫功能紊乱 主要用于了解恶性肿瘤 免疫缺陷 重症病毒感染 自身免疫病等患者机体的免疫功能是处于什么状态 T细胞亚群的表达受多种因素影响常 变幻莫测 因此T细胞亚群的解读应细胞比例结合计数和功能状态 连续动态监测更有意义 严重脓毒症存在免疫紊乱 T淋巴细胞的凋亡 与预后有一定关系 创伤等应激状态同样导致免疫紊乱 总结 谢谢