广西地方标准《烟叶表面高级脂肪烃的测定 气相色谱质谱法》征求意见稿

ICS67.060X 28DB45广西壮族自治区地方标准DB 45/T XXXXXXXXX烟叶表面高级脂肪烃的测定气相色谱质谱法Determination of long chain aliphatic hydrocarbon in Tobacco leaf surface by GC/MSXXXX - XX - XX发布XXXX - XX - XX实施广西壮族自治区市场监督管理局发布DB45/T XXXXXXXXX前言本标准按照GB/T 1.12009标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写给出的规则起草。本标准由广西烟叶标准化技术委员会提出。本标准起草单位：广西中烟工业有限责任公司。本标准主要起草人：。7烟叶表面高级脂肪烃的测定 气相色谱质谱法1 范围本标准规定了烟叶表面高级脂肪烃的气相色谱质谱测定方法。本标准适用于烟叶表面中高级脂肪烃的测定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。YC/T 31 烟草及烟草制品 试样的制备和水分测定 烘箱法3 原理试样干燥粉碎过筛后，经二氯甲烷超声提取，用硅胶固相萃取柱净化，气相色谱-质谱联用法进行测定，内标法定量。4 试剂与材料以下所用的试剂，除特别注明外均为分析纯试剂，水为符合GB/T 6682规定的一级水。4.1 正己烷：色谱纯。4.2 二氯甲烷：色谱纯。4.3 高级脂肪烃，纯度98 %，参见附录A。4.4 n-C30D62（内标）:100 g/mL。准确称量C30D62 0.1 g，用正己烷溶解定容至1000 mL。4.5 标准溶液4.5.1 标准储备液分别准确称取各种高级脂肪烃标准样品（精确至0.0001 g）（4.3），用正己烷（4.1）配制标准储备液。标准储备液各物质浓度均为1000 g/mL，于0 4 条件下避光保存，有效期6个月。4.5.2 标准工作溶液分别移取一定体积的标准储备液（4.5.1），准确加入内标溶液（4.4）后，使用正己烷（4.1）稀释定容，配制浓度为5.0、10.0、20.0、50.0、100.0、500.0 g/mL的各高级脂肪烃系列标准溶液，内标浓度为50 g/mL，于0 4 条件下避光保存，有效期3个月。5 仪器与设备5.1 气相色谱-质谱联用仪：具有选择离子监测功能。5.2 分析天平：感量0.01 mg。5.3 超声波清洗器：超声功率不低于420W。5.4 Si固相萃取小柱，500 mg。5.5 有机相滤膜，0.45 m。5.6 氮吹仪。5.7 烘箱，鼓风式，控温精度1 ，温度均匀度1 。5.8 粉碎机5.9 筛网孔径0.45 mm（40目）5.10 硅胶干燥器6 试样制备与保存烟叶样品用软毛刷刷去烟叶上的细土和沙粒，去梗，将烟叶剪成片或切成丝，在烘箱（5.7）中于40 下干燥4 h，用粉碎机（5.8）将其粉碎，过40 目筛（5.9），取有代表性样品，装入洁净干燥容器中，密封保存。水分的测定参见YC/T 31。7 测定步骤7.1 试样处理准确称取试样1 g（精确至0.1mg），加入内标溶液（4.4）500 L，加入40 mL二氯甲烷（4.2），超声（5.3）提取40 min，合并二氯甲烷提取液，氮吹（5.6）至0.5 mL，过固相萃取小柱（5.5），用正己烷（4.1）洗脱，共分2 次，每次用量1.5 mL，洗脱液经氮吹（5.6）至 1 mL左右，过滤膜（5.5），进GC/MS分析。7.2 测定7.2.1 色谱条件7.2.1.1 色谱柱：非极性弹性毛细管柱或等效柱，30 m0.25 mm0.25 m，固定相（推荐）：（5 %苯基）-甲基聚硅氧烷。7.2.1.2 进样口温度：280 。7.2.1.3 载气：氦气（纯度99.999 %），恒流流速：1.0 mL/min。7.2.1.4 进样量：1 L，分流进样（分流比为10:1）。7.2.1.5 升温程序：初始温度35 ，保持2 min，以5 /min的速率升至200 ；再以2 /min的速率升至250 ；然后以5 /min的速率升至320 保持10 min。7.2.2 质谱条件7.2.2.1 传输线温度：320 。7.2.2.2 电离方式：电子轰击源（EI）。7.2.2.3 电源能量：70 eV。7.2.2.4 电离源温度：300 ，四级杆温度：150 。7.2.2.5 质谱扫描方式：选择离子监测（SIM），各化合物定量及定性离子参见附录A。7.2.2.6 溶剂延迟：4 min。7.3 标准工作曲线的制作按照GC/MS测试条件分别分析标准工作溶液（4.5.2），横坐标为各高级脂肪烃峰面积与内标物峰面积比值，纵坐标为各高级脂肪烃的浓度和内标物浓度的比值，建立标准工作曲线，工作曲线线性相关系数R20.99。标准工作溶液色谱图示例参见附录B中图B.1。7.4 样品测定按照GC/MS测试条件测定试样（7.1），每个试样平行测定两次。同时每批样品做一组空白。典型样品色谱图示例可参见附录B中图B.2。8 定性确证在7.2仪器条件下，试样待测液和标准品的选择离子色谱峰在相同保留时间处（0.05min）出现，并且对应质谱碎片离子的质荷比与标准品一致。各高级脂肪烃的保留时间、定性离子和定量离子参见附录A。9 结果计算和表达每个高级脂肪烃对内标物的相对响应因子按式（1）计算： （1）式中：f 每个高级脂肪烃对内标物的相对响应因子；AIS 标准工作溶液中内标物的峰面积或峰高；ci 标准工作溶液中高级脂肪烃i的浓度，单位为微克每毫升（mg/mL）；Ai 标准工作溶液中高级脂肪烃i的峰面积或峰高；cIS 标准工作溶液中内标物的浓度，单位为微克每毫升（mg/mL）；以干基计高级脂肪烃的含量，以毫克每千克（mg/kg）表示，按式（2）计算： （2）式中： 试样中高级脂肪烃的含量，单位为毫克每千克，mg/kg；A 试样洗脱液中高级脂肪烃i的峰面积或峰高；mIS 试样中内标物的质量，单位为微克（mg）；f 高级脂肪烃对内标物的相对响应因子；AS 试样中内标物的峰面积或峰高；m 试样的质量，单位为克（g）。 试样的水分含量，%（质量分数）。以两次平行测定结果的算术平均值为最终测定结果，精确至0.1 mg/kg。10 方法的检出限、定量限本方法的检出限和定量限结果如表1所示。表1 英文名称、CAS号、检出限和定量限序号中文名称英文名称CAS号检出限(mg/kg)定量限(mg/kg)1正二十七烷n-heptacosane593-49-70.019 0.064 2正二十八烷n-octacosane630-02-40.015 0.049 3正二十九烷n-nonacosane630-03-50.015 0.056 4正三十烷n-triacontane638-68-60.015 0.056 5正三十一烷n-hentriacontane 630-04-60.015 0.056 6正三十二烷n-dotriacontane544-85-40.019 0.056 7正三十三烷n-tritriacontane630-05-70.015 0.049 8内标（C30D62）Triacontane-d6293952-07-9/11 试验报告试验报告应说明：样品编号和样品信息；参照本标准所使用的试验方法；测定结果，包括各单次测定结果及其平均值；在本标准规定的分析步骤的差异；在试验中观察到的异常现象；试验日期；测定人员。AAB附录A （规范性附录）高级脂肪烃及内标物信息高级脂肪烃及内标物信息见表B.1。表B.1 高级脂肪烃及内标物的保留时间及定量定性离子序号化合物名称保留时间（min）定量离子（m/z）定性离子（m/z）1正二十七烷56.98197239、225、2672正二十八烷60.18197225、239、2673正二十九烷62.94197225、239、2674正三十烷65.21197225、239、2675正三十一烷67.00197225、239、2676正三十二烷68.66197253、239、2677正三十三烷70.15197253、127、2818氘代三十烷64.05242258、46、281BC附录B （资料性附录）色谱图示例B.1 标准工作溶液选择离子色谱示例图标准工作溶液选择离子色谱图如图B.1所示。图B.1 标准工作溶液选择离子色谱图B.2 典型样品选择离子色谱图示例图典型样品选择离子色谱图如图B.2所示。图B.2 典型样品选择离子色谱图_