斑马鱼的产卵准备.ppt

前言 斑馬魚為研究脊椎動物胚胎發育的理想模式生物 補充 斑馬魚胚胎發育影片觀賞 1 2 3 優點 子代數多可以光週期誘發產卵體外受精 胚體透明 胚胎發育快可以誘發產生突變種可以分子生物技術控制特定基因表現或產生基因轉殖魚在胚胎發育時期的訊號傳遞路徑和哺乳動物有很高的同源性 一顆細胞至受精後四小時時期 四小時至十五小時時期 十五小時至三十小時時期 活動目的 為順利獲得斑馬魚受精卵 需調控其光週期並布置產卵環境 本活動目的主要為產卵準備 以獲得實驗所需之魚卵 分辨斑馬魚雌雄 公魚 與性成熟前體態相似 保持原本的流線型 臀鰭較母魚長 在身上各個魚鰭末端 時常可看到有明顯的黃色出現 分辨斑馬魚雌雄 母魚 性成熟後肚子開始膨大 裡面卵囊形成卵 臀鰭較公魚來得小 短且較圓 魚鰭末端有時也有黃色出現 但相對於公魚出現的時間比較少 步驟一 布置環境 光週期調控 斑馬魚需要在約14 10光照週期下 才會產生交配產卵的行為 水溫 需在24 28 5 在適當的水溫下 將公魚和母魚分缸進行飼養約5 7天後 即可在光週期天亮後1小時內 看到斑馬魚進行交配行為 步驟二 交配前準備 產卵前一天的準備 挑選出適當的公魚跟母魚 體長要盡量一樣 母魚可以略大一些 將公魚與母魚分別放置產卵缸的兩側 中間設置隔板將其隔開 產卵房的準備 放入隔板及斑馬魚 上盒與普通下盒組裝 上盒底以網狀材料代替 產卵房的準備 避免剛產出的魚卵被成魚吃掉 而有的特殊設計 1 2 3 4 完成 公魚會試圖往母魚處過去 母魚則是不會特別想往公魚的方向靠近 公魚看到母魚後 會釋放一種費洛蒙 使得母魚會先做好了隔天清晨要產卵的準備 步驟三 交配當天 光週期控制的隔天清晨 當天亮後約十分鐘 公魚和母魚會恢復清醒 當母魚發現公魚時 由於前一天的費洛蒙影響 母魚在天亮後也釋放另一種費洛蒙 使公魚往母魚方向前去的行為更加明顯及強烈 此時就可以準備打開隔板 讓公魚跟母魚進行交配 交配中 公魚在交配的過程中 採絕對主動方式 會先以眼睛觀察並決定要向哪一隻母魚進行攻勢 其次會進行求偶舞蹈 在想要交配的母魚周圍繞圈圈或是 字型 游向母魚後 利用腹部側面摩擦母魚 刺激母魚排卵 公魚便會同時射精 產卵 母魚會一次把全部腹中的卵包括卵囊全部排出 一胎約會生出200 500顆卵 排出後母魚會重新產生新的卵 約3 5天就可以再生下一次卵 伴隨著卵的釋放 會有其他激素一起排出 這種激素可以讓母魚順利把卵排放出來 另外一個功能則是讓其他還產生卵的母魚 停止排卵的行為 這在演化上算是一種競爭的結果 魚卵會落於下盒的水中 注意事項 1 母魚體內的卵 如果太長時間沒有交配 或是沒有完全排完 卵會留在體內 並不會重新被吸收回去 如果超過太久沒有排卵 母魚腹部中的卵會死亡 並且造成母魚腹部類似囊腫的殘留物 這種囊腫會讓母魚下次排卵不順 甚至無法排卵而被公魚激烈的追求之後而難產死亡 目前也沒有較好的方式改善這種情況 一般認為 固定一段時間就讓公魚跟母魚進行交配 讓母魚把卵排出 是較好的方式 注意事項 2 斑馬魚的卵在受精後 約72小時即可孵化 在這段期間內 不需要給予打氣 只要放在乾淨的水中即可孵化 放在解剖顯微鏡下 即可清楚的看到斑馬魚胚胎發育的整個經過