【病毒外文文献】2004 DIAGNOSTICA DIFFERENZIALE PRECOCE DEL SARS CORONAVIRUS CON METODICA MICRO-ARRAYS NELLE SINDROMI ACUTE RESPIRATORIE

volume 19 numero 2 2004 Microbiologia Medica 155 PEL e Multicentric Castleman Disease MCD e di recente con linfomi solidi associati a MCD o AIDS KS LS Controverso il ruolo di HHV8 nel Mieloma Multiplo MM Scopo dello studio stato quello di valutare e confrontare la viremia HHV8 nei pazienti con diversa patologia HHV8 relata e di correlarla con altri parametri virologici viremia EBV HIV sierolo gici reattivit anticorpale HHV8 e immunologici conta CD4 Materiali e Metodi Campioni di plasma siero e PBMCs sono stati raccol ti durante il follow up clinico in 40 pazienti KS AIDS 4 KS classici 5 PEL 8 MCD 4 LS 3 HIV 1 HIV Uno studio prospettico per l insorgenza di MM 1961 soggetti con 250 casi anche stato valutato La vire mia HHV8 ed EBV stata valutata con metodica real time PCR Tedeschi et al J Clin Microbiol 2001 la viremia HIV mediante metodica b DNA Bayer e la conta dei CD4 in citofluorimetria la sierologia HHV8 in IFA Risultati Alta viremia plasmatica HHV8 era presente nei KS sia prima che durante HAART mediana 8998 e 12270cp ml i livelli di HHV8 DNA correlavano con livelli di HIV RNA OR 5 40 95 CI 1 54 18 98 e con la conta CD4 OR 7 24 CI95 1 30 40 35 Nei PEL era presente viremia HHV8 elevata allo sviluppo della malattia in 5 5 pz mediana 10284cp ml e durante il follow up clinico mediana 2078cp ml osservando una correlazione con un progressivo calo dei CD4 p 0 01 EBV DNA era presente in 3 5 pz mediana 3196 cp ml e in 4 5 pz durante il follow up mediana 598 cp ml Negli 8 MCD erano presenti livelli HHV8 DNA pi elevati rispetto EBV DNA mediana 4350cp ml e 40cp ml rispettivamente Le caratteristiche istologiche virologiche e cliniche dei LS sono in corso di studio Reattivit HHV8 era pre sente in 7 1961 pz dello studio MM senza HHV8 vire mia rilevabile Considerazioni Conclusive La determinazione molecolare di HHV8 permette di associare nuove entit patologiche a questo virus rap presenta uno strumento utile nel follow up clinico dei pazienti con tumori HHV8 associati e consente di stu diare le interazioni patogenetiche con altri virus tumo re associati CO9 3 DIAGNOSTICA DIFFERENZIALE PRECOCE DEL SARS CORONAVIRUS CON METODICA MICRO ARRAYS NELLE SINDROMI ACUTE RESPIRATORIE Giannattasio A Marzo C Guarino C Falco E De Montis A Lauterio C Alterio A Scarpati S Bellitti F Smeraglia R Virologia P O C Ascalesi Direttore Prof Riccardo Smeraglia A S L Napoli 1 I Clinica Pneumologica II Universit di Napoli P O Monaldi BCS Biotech SpA Laboratori di Ricerca e Sviluppo Cagliari Ospedale S Maria delle Grazie Pozzuoli NA A S L Napoli 2 Lo scopo della nostra ricerca quello di poter effettua re una tempestiva diagnosi differenziale per il SARS Coronavirus nei confronti degli altri virus Influenza A Influenza B Parainfluenza 1 2 3 RSV Adenovirus responsabili di sindromi respiratorie acute Lo studio in esame stato condotto su 12 pazienti affetti da varie patologie respiratorie utilizzando il metodo con Micro Arrays Nei primi 5 pazienti la ricerca dei virus respiratori compreso il Coronavirus SARS stata eseguita su liquido di lavaggio bron coalveolare BAL su broncoaspirato e su siero nei restanti 7 pazienti l esame stato effettuato solo su campioni di siero Il metodo con Micro Arrays o DNA RNA chips un sistema diagnostico innovativo che consente di identi ficare simultaneamente il genoma o una sequenza nota degli 8 virus potenzialmente responsabili della sindrome respiratoria acuta La caratteristica peculiare del metodo l ibridizzazione del genoma virale o parte di esso all interno di pozzetti di circa 2x2 cm Tale metodica permette l identificazione dei virus in questione dopo 1 2 giorni dall infezione Dei primi 5 pazienti esaminati 2 sono risultati positi vi per RSV nel BAL e nel broncoaspirato uno positi vo per RSV nei tre liquidi biologici presi in esame uno positivo per Influenza A nel BAL e nel broncoaspirato e uno risultato completamente negativo Per quanto concerne gli altri 7 sieri 2 sono risultati positivi all Adenovirus uno positivo a Parainfluenza 1 e Adenovirus uno positivo a RSV e Influenza B uno debolmente positivo all RSV e 2 positivi all RSV I dati da noi ottenuti dimostrano che il metodo con Micro Arrays permette di porre una rapida diagnosi differenziale per il SARS Coronavirus nei confronti degli altri virus respiratori Ci piace sottolineare per COMUNICAZIONI ORALI volume 19 numero 2 2004 Microbiologia Medica 156 che tale metodo consente al clinico di avere una dia gnosi certa di patologia respiratoria infettiva all insor gere dei primi sintomi da affiancare alla ricerca anti corpale IgG IgM IgA su siero CO9 4 CONFUTAZIONE DI RECENTI IPOTESI ETIOLOGICHE PER LA PITIRIASI ROSEA DI GIBERT Urbano F 1 Azzi A 2 Zakzewska K 2 De Santis R 2 Zuccati G 3 Urbano P 2 1 Ispettorato R F C dell Esercito Sezione Logistica Servizio Sanitario 2 Dipartimento di Sanit Pubblica e 3 Dipartimento di Scienze Dermatologiche Universit di Firenze La pitiriasi rosea di Gibert una dermatosi infiamma toria acuta con caratteristiche epidemiologiche clini che e istopatologiche tipiche Il dato epidemiologico classico depone per la sua contagiosit L origine infet tiva ammessa quasi unanimemente ma l agente etio logico non ancora stato identificato Nel 1997 stato ipotizzato un ruolo etiopatogenetico per il parvovirus umano B19 che non ha trovato con ferme da indagini sierologiche Sempre nel 1997 sono stati considerati i virus erpetici umani 6 e 7 e sono stati ottenuti risultati suggestivi per l implicazione di HHV7 con tecniche di biologia molecolare Scopo del lavoro Verificare alcune delle ipotesi etiologiche su questa patologia relative ad agenti di recente identificazione e suscettibili di studio solo con tecniche biomolecolari avanzate Parvovirus B19 HHV 7 e HHV 8 Materali e metodi Sono stati arruolati nello studio venti militari maschi fra 18 e 33 anni che hanno dato il consenso informa to di 22 presentatisi consecutivamente con forme cli nicamente classiche in fase di eruzione secondaria al Reparto di Dermatologia e Venereologia del Policlinico Militare di Roma fra il Giugno del 1997 ed il Gennaio del 1998 Sono stati raccolti campioni di siero in fase acuta 9 sieri di follow up e dieci sieri di controlli sani Nested PCR per Human Herpes Virus 7 e per Human Herpes Virus 8 seguita da analisi elettroforetica dei prodotti della PCR NAT e sierologia per Parvovirus Umano B19 Risultati Tutti i sieri sono risultati negativi alla sensibilissima nested PCR per HHV 7 per HHV 8 e per Parvovirus Umano B19 Tutti i sieri sono risultati negativi alla ricerca di anti corpi anti Parvovirus umano B19 della classe IgM Per gli anticorpi di classe IgG sono risultati positivi 15 20 casi acuti 6 9 casi al follow up e 6 10 sieri dei controlli sani Conclusioni Aggiungiamo HHV 8 alla lista degli agenti per i quali i dati sperimentali non appoggiano l ipotesi di un coin volgimento patogenetico nella dermatosi oggetto di indagine confermiamo che il parvovirus umano B19 non implicato nella patogenesi della pitiriasi rosea neghiamo la presenza di HHV 7 nel siero dei soggetti affetti da pitiriasi rosea di Gibert mettendo in discus sione la tesi che vedeva tale virus in rapporto causale con questa patologia Col contributo di ricerca ex60 del MIUR COMUNICAZIONI ORALI