肿瘤发生、浸润与转移有关的基因

与肿瘤发生有关的基因分子基础 引言肿瘤是常见病 多发病 我国常见的十个恶性肿瘤是 鼻咽癌 肺癌 食管癌 胃癌 大肠癌 肝癌 乳腺癌 子宫颈癌 白血病 淋巴瘤 肿瘤概念肿瘤是机体的细胞在各种致瘤因素的作用下 基因发生改变导致克隆性而形成的新生物 并常表现为肿块 致瘤因素正常细胞肿瘤细胞克隆性基因改变增生 一 肿瘤的发病学 肿瘤的发生和演进是在多种因素作用下 经过长期的 多步骤并有多种基因参与的一个过程 各种因素正常细胞肿瘤细胞一系列基因改变演进恶性肿瘤 目前认为是一系列复杂的 多步骤的 肿瘤细胞与宿主细胞相互作用的过程 肿瘤的形成过程 正常体细胞 基因改变多克隆性增生 基因改变单克隆性增生 相对无限性增生 形成肿瘤 附加基因突变各种亚克隆增生 肿瘤具有异质性 亚克隆扩增生长异质化 转移性亚克隆 粘附和侵出基底膜 通过细胞外间质 侵入血管 与宿主淋巴样细胞相互作用 瘤细胞栓子 与基底膜粘附 出血管 转移灶形成 目前认为是一系列复杂的 多步骤的 肿瘤细胞与宿主细胞相互作用的过程 结肠癌肿瘤发生是一个多步骤的过程正常上皮APC基因缺失 突变过度增生上皮DNA甲基化异常早期腺瘤ras基因突变中期腺瘤DCC基因缺失晚期腺瘤p53基因突变结肠癌其他突变转移癌 家族成员产物srcsrc abl fgr yes fms ros fps EGF受体 酪氨酸蛋白fes erb B mic raf mos等激酶 TPK sissisPDGFrasH ras K ras N rasP21 G蛋白 mycC myc N myc L myc核内DNA结合蛋白抑癌基因族P53 RB APC WT NF1 NF2 VHL P16 PTEN细胞凋亡Bax Bcl 2 Fas FasL SurvivinTelomerase GranzymeB P53 肿瘤转移抑制基因nm23等其他myt fas Blym Jwn ski等核内DNA结合蛋白 肿瘤性的发生是与各种癌基因的激活 各种抑癌基因失活和凋亡调控基因的异常而导致的 二 肿瘤发生的分子学基础 一 癌基因1癌基因 是具有潜在的转化细胞能力的基因 2病毒癌基因 某些逆转录病毒含有能够转化细胞的RNA片段 称为病毒癌基因 3 原癌基因 正常细胞中 细胞癌基因以非激活形式存在就叫原癌基因 4 细胞癌基因 正常细胞基因组中存在一大类基因 当它们被激活时 能够促进细胞进行转化 这些已激活的基因叫细胞癌基因 正常原癌基因编码的蛋白 大多都是对细胞生长十分重要的生长因子和生长因子的受体 重要的信号传导蛋白以及核调节蛋白 它们都是刺激细胞增生的因素 所以原癌基因激活后细胞过度增生肿瘤 二 肿瘤抑制基因1概念 正常细胞内有一类对细胞增殖起负调节的基因 当它失去抑制活性时 往往会使细胞呈恶性生长 种类基因叫肿瘤抑制基因 2常见基因见表 三 凋亡调节基因和DNA修复基因 四 端粒 端粒酶 家族成员产物srcsrc abl fgr yes fms ros fps EGF受体 酪氨酸蛋白fes erb B mic raf mos等激酶 TPK sissisPDGFrasH ras K ras N rasP21 G蛋白 mycC myc N myc L myc核内DNA结合蛋白抑癌基因族P53 RB APC WT NF1 NF2 VHL P16 PTEN细胞凋亡Bax Bcl 2 Fas FasL SurvivinTelomerase GranzymeB P53 肿瘤转移抑制基因nm23等其他myt fas Blym Jwn ski等核内DNA结合蛋白 三 基因变异的方式与癌基因的活化基因是在物理 化学 生物致癌因素的作用下点突变 基因扩增 染色体易位等引起 1 点突变是导致癌基因活化的主要方式 点突变包括碱基改变与结构的改变2 基因扩增是癌基因的活化的另一种主要方式 细胞内某些基因通过不明原因的复制或多拷贝 这些多拷贝的DNA以游离的形式存在称双微体或再次整合入染色体形成均染区 它一般表示高度的染色体破坏或不稳定性 3 染色体易位或重排 1 原癌基因被置于很强的启动子控制之下 转录增加 使得原癌基因过度表达 如 c myc在Burkitt淋巴瘤中是8号的c myc转位到14号编码免疫球蛋白重链的位点上 导致c myc过度表达 2 由于异位产生具有致癌能力的融合蛋白 导致细胞转化 如 慢性粒细胞性白血病的 费城染色体 是9号abl到22号的bcl位点 4 癌基因甲基化改变DNA甲基化状态的改变 可导致基因的功能和结构的异常 是细胞癌变过程的重要一步 研究发现它与肿瘤的生物学特性有关 DNA甲基化水平越低 其肿瘤浸润能力越强 临床分期越晚 5 基因过量表达是指基因的转录 翻译水平增高这些基因是有组织和细胞特异性 它们均参与细胞的增殖和分化过程 如 Ras CerbB 2 Met可出现基因过量表达 三 与人类肿瘤有关的癌基因 家族成员产物srcsrc abl fgr yes fms ros fps EGF受体 酪氨酸蛋白fes erb B mic raf mos等激酶 TPK sissisPDGFrasH ras K ras N rasP21 G蛋白 mycC myc N myc L myc核内DNA结合蛋白抑癌基因族P53 RB APC WT NF1 NF2 VHL P16 PTEN细胞凋亡Bax Bcl 2 Fas FasL SurvivinTelomerase GranzymeB P53 肿瘤转移抑制基因nm23等其他myt fas Blym Jwn ski等核内DNA结合蛋白 一 Ras基因H ras K ras N ras三种K ras是最易成为突变的靶基因 H ras N ras 突变率少 虽然H ras突变率少 但它是最先分离出来的Ras基因 三种ras都分别编码一种鸟苷酸结合蛋白 Ras蛋白在细胞增殖分化信号的传导过程中起重要作用 突变的Ras基因降低了自身内源性鸟苷酸三磷酸酶 GTPase 的活性 结果是导致Ras蛋白与GTP持续结合 并具有促进细胞生长的作用 二 mycC myc N myc L mycc myc在Burkitt淋巴瘤中是8号的c myc转位到14号编码免疫球蛋白重链的位点上 导致c myc过度表达 N myc在神经母细胞瘤和胶质瘤等转录增加 N myc L myc小细胞肺癌转录增加 使得原癌基因过度表达 三种基因调控的下游基因不同C myc基因的变化更明显 三 c erb B 2 Neu基因c erb B 2编码的蛋白质与上皮细胞生长因子的受体 EGFR 非常相似 因此又称为P185为一磷酸蛋白 Neu蛋白分三个区域 1 细胞外区2 跨膜区3 细胞内酪氨酸激酶区Neu基因是由点突变激活的癌基因 由基因扩增和蛋白过度表达与一些肿瘤的特性有关 四 c Met基因的变异c Met基因编码的是跨膜糖蛋白 链位于细胞外 链具有细胞外配体结合区 跨膜区 细胞内酪氨酸激酶区 c Met基因蛋白表达位于腺样结构细胞的边缘 间叶细胞 成纤维细胞和平滑肌细胞 产生的肝细胞因子 HGF 或离散因子 SF 作为c Met受体的配体 形成了HGF SF内分泌信号系统 五 Bcl 2基因Bcl 2基因是从B细胞淋巴瘤中鉴定出来的 是由染色体t 14 18 q32 q21 易位而激活 Bcl 2基因编码的蛋白位于核膜 内质网和线粒体膜上Bcl 2基因具有抑制细胞凋亡的能力 家族成员产物srcsrc abl fgr yes fms ros fps EGF受体 酪氨酸蛋白fes erb B mic raf mos等激酶 TPK sissisPDGFrasH ras K ras N rasP21 G蛋白 mycC myc N myc L myc核内DNA结合蛋白抑癌基因族P53 RB APC WT NF1 NF2 VHL P16 PTEN细胞凋亡Bax Bcl 2 Fas FasL SurvivinTelomerase GranzymeB P53 肿瘤转移抑制基因nm23等其他myt fas Blym Jwn ski等核内DNA结合蛋白 六 Mdm2基因Mdm2是一种进化保守基因 编码一个长度为491氨基酸的锌指蛋白 蛋白定位于细胞核 Mdm2基因高表达时呈现癌基因功能 Mdm2蛋白可与P53与RB蛋白结合而使其功能失活 这是Mdm2促进癌细胞生长的重要机制 野生型P53可以阻止细胞从G1期进入S期 Mdm2表达增高时 野生型P53的这种功能受到影响 RB aib都可作用于Mdm2 影响细胞的增殖分化 七 细胞周期蛋白Cyclin蛋白细胞周期的调控细胞周期的进行依靠周期素 cyclin 和周期素依赖性激酶 cyclin dependentkinase CDK 复合物的推动 周期素的量呈周期依赖性升降 在细胞周期的不同时期出现不同类型的周期素 cyclinD是最早出现的细胞周期中周期素 cyclinD可与Rb蛋白结合 CDK使一些蛋白磷酸化 Rb蛋白磷酸化 例如cyclinD CDK4复合物可使Rb蛋白从低磷酸化状态转变为高磷酸化状态 通常 Rb蛋白处于低磷酸化状态 并与转录因子E2F家族成员结合在一起 阻止其转录激活作用 当Rb由于cyclinD CDK4复合物的作用处于高磷酸化状态时 E2F与之解离并促进S期基因的转录 这对细胞从G1期进入S期很重要 图5 11 四 与人类肿瘤有关的抑癌基因 家族成员产物srcsrc abl fgr yes fms ros fps EGF受体 酪氨酸蛋白fes erb B mic raf mos等激酶 TPK sissisPDGFrasH ras K ras N rasP21 G蛋白 mycC myc N myc L myc核内DNA结合蛋白抑癌基因族P53 RB APC WT NF1 NF2 VHL P16 PTEN细胞凋亡Bax Bcl 2 Fas FasL SurvivinTelomerase GranzymeB P53 肿瘤转移抑制基因nm23等其他myt fas Blym Jwn ski等核内DNA结合蛋白 一 RB基因是第一个被克隆的抑癌基因 与视网膜母细胞瘤有关 它位于13q14RB基因的磷酸化状态为RB基因调节细胞生长分化的主要形式 在细胞周期的不同阶段 RB的状态不同 随着细胞周期以磷酸化和去磷酸化调节RB RB在去磷酸化时 可与E2F结合 并抑制其活化基因表达的功能 RB在磷酸化时 则不能与E2F结合 RB的去磷酸化从G1期开始 一直持续到G2期和M期 RB基因与P53 C myc c fos TGF存在着调节关系 二 P53基因是最为广泛和深入的肿瘤基因之一 是一个明星分子 它位于17q13 1先已经明确P53细胞生长周期中的负调控因子 与细胞周期的调控 DNA修复 细胞分化 细胞凋亡等重要的细胞功能有关 P53基因分为野生型和突变型两种 其蛋白产物也有两种 野生型P53蛋白极不稳定 半衰期仅数分钟 突变型半衰期为6 12小时 还可参与调节的细胞基因 其中关系最密切的是Mdm2 P21 Mdm2基因产物可与野生型P53基因和突变型P53基因结合 抑制基因介导的反式激活及阻止P53抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡 P53基因 P21上调 细胞周期素 细胞周期素依赖激酶的底物磷酸化作用 导致G1期阻止 是细胞修复DNA 修复失败则启动凋亡 三 P16基因它位于9P21 其编码的产物是细胞周期素依赖激酶 CDK4 的抑制蛋白 P16既是细胞有效的调控者 又是抑制肿瘤生长的关键因子 P16与细胞周期素D cyclinD 竞争与CDK4结合 当P16与CDK4结合后能特异地抑制CDK4的活性 而CDK4可使RB磷酸化 CDK4受到抑制 RB抑制转录因子 E2F 从而抑制细胞增殖 阻止细胞生长 当cyclinD与CDK4结合后能刺激细胞生长分裂 正常时二者处于平衡 当P16异常时 cyclinD与CDK4优势结合 使细胞生长失控 四 P15基因又称为MTS2基因定位于9P21主要功能可能是通过与CDK4和 CDK6结合 抑制CDK4 cyclinD与CDK6 cyclinD 从而抑制细胞的增殖 P15的功能可能被TGF 诱导 P15也使细胞停止在G1期 P15与RB基因无关 这一点与P16不同 有关P15与P16的关系 有人认为P15纯合子的缺失常出现在P16纯合子的缺失时 而P16基因的缺失时 不一定出现P15的缺失 二种基因同时缺失 提示在肿瘤发生中的作用 P16是主要缺失的靶基因位点 P15与P16的关系有待进一步探索 五 PTEN基因位于10q23 3PTEN蛋白通过拮抗酪氨酸激酶等磷酸化酶活性而抑制肿瘤的发生 PTEN蛋白还可通过特异地使IP3的第三位磷酸去磷酸化而间接抑制胰岛素诱导的磷酸肌醇 3激酶的活性 而IP3是胰岛素调节细胞生长信号传导通路中的重要的第二信使 认为PTEN蛋白在细胞信号传导通路中起重要的作用 六 FHIT定位于3P14 2FHIT蛋白是一典型AP3A水解酶 催化AP3A的水解反应 使AP3A水平下降 FHIT基因突变导致AP3A水解酶活性丧 从而导致AP3A或类似的复合物水平升高并促发肿瘤的发生 具体机制不清 EBV可能通过使FHIT基因失活而致癌 FHIT是新的侯选癌基因 七 BRCA基因定位于13q12BRCA1和BRCA2结构完全不同 但生物学功能 肿瘤发生机制有很多相似 都有与DNA结合的结构域 可作为转录因子对相应的基因转录起调控作用 还可与Rad51蛋白相互作用 在DNA损伤修复中起重要作用 五 其他的抑癌基因 一 DCC基因18q21 3编码的是跨膜磷酸化蛋白 它的配体不请与神经细胞黏附分子有同源性 它具有细胞 细胞外基质相互作用的功能 缺失DCC基因 通过影响细胞间的机制导致肿瘤的侵袭和转移 野生型的具有抑癌作用 二 APC和MCC基因5q21 22APC MCC功能不十分清楚 三 WT1基因11P13WT1蛋白与DNA的特定序列结合后抑制EGR1与DNA结合 抑制EGR1对转录的活性作用 通过EGR1发挥对细胞生长的抑制作用 此外还对其它生长因子的基因也有抑制其转录的作用 如 胰岛素样生长因子2 血小板衍生生长因子A链但在有些情况下起激活作用 也能与P53结合 P53缺失时起激活作用 四 NF1和NF2基因编码的产物与 酶活性蛋白同源 而 可修饰ras基因产物 的功能 可与ras基因产物 结合 激活 酶活性 下调 蛋白活性 以次参与和 有关的信号传导调节 所以认为 是一种抵抗细胞增殖的蛋白 五 HNPCC基因HNPCC基因异常 主要基因修复缺陷表现 五 其他的抑癌基因 一 DCC基因 二 APC和MCC基因 三 WT1基因 四 NF1和NF2基因 五 HNPCC基因 六 VHL基因 七 DPC4基因 八 nm23基因肿瘤转移抑制基因 第十一节环境致瘤因素 肿瘤的发生是内外环境各种因素共同作用的结果 一 化学物质 一 间接化学致癌物 1多环芳烃2芳香胺类3亚硝胺类物质4真菌毒素 二 直接化学致癌物 二 物理致癌因素 一 紫外线 二 离子辐射 x 中子 质子 等三 病毒因素 一 DNA致癌病毒1人类乳头状瘤病毒 HPV 2EB病毒 EBV 3乙肝病毒 HBV 二 RNA致癌病毒人T细胞白血病病毒 型 HTIV 1 第十二节遗传与肿瘤 一 常染色体显性遗传的肿瘤 疾病 遗传性癌综合征 1视网膜母细胞瘤2肾母细胞瘤3神经母细胞瘤4神经纤维瘤病5家族性腺瘤性息肉病 二 家族性癌机理不清某种肿瘤在家族多个成员中发生 三 常染色体隐性遗传综合征 第十二节遗传与肿瘤 一 常染色体显性遗传的肿瘤 疾病 遗传性癌综合征 1视网膜母细胞瘤2肾母细胞瘤3神经母细胞瘤4神经纤维瘤病5家族性腺瘤性息肉病 二 家族性癌机理不清某种肿瘤在家族多个成员中发生 三 常染色体隐性遗传综合征 第十三节肿瘤免疫机体的肿瘤免疫主要是细胞免疫 免疫机能低下者 恶性肿瘤发病率明显增加 目前认为是一系列复杂的 多步骤的 肿瘤细胞与宿主细胞相互作用的过程 一 与肿瘤浸润有关的因素 1 与肿瘤不断的增生能力有关正常细胞具有接处抑制作用 肿瘤性的增生是一种单克隆性的相对无止境的增生 它是各种癌基因的激活 各种抑癌基因失活和凋亡调控基因的异常而导致的 它失去了接处抑制作用 它的这种增生能力是肿瘤浸润与转移的前提 2 与瘤细胞之间的粘着力降低有关 1 与细胞膜的钙离子浓度下降有关1 正常细胞膜的钙离子可降低细胞之间的排斥反应2 正常细胞之间的黏附需要钙离子参与 2 与细胞之间的连接减少或消失有关1 桥粒芯蛋白2 桥粒胶原蛋白 3 目前认为是细胞黏附分子所介导的肿瘤细胞之间的黏附力下降 细胞的识别与黏附是由细胞黏附分子 CelladhesinmoleculeCAM 所介导的 它也是多步骤 多成分参与的复杂过程 并通过CAM而启动一定的信号传导途径 最终引起的生物学效应 细胞黏附分子根据特性分为两类 亲同性的 识别与结合同种分子 亲异性的 识别与结合异种分子细胞黏附分子根据分子结构主要分为五类 钙粘素族 钙连接素 约30余种 是跨膜蛋白 属亲同性的细胞黏附分子 它的作用依赖与钙离子有E N P三种 与肿瘤浸润转移最密切的主要是E钙粘素 参与上皮细胞间的粘合与连接 介导同种上皮细胞间的同种分子之间的识别与结合 肿瘤细胞间 整合素族是膜镶嵌糖蛋白 属亲异性的细胞黏附分子 它的作用也依赖与钙离子 介导细胞 细胞之间和细胞 细胞外基质之间的相互作用 整合素族细胞黏附分子均由 两种亚单位构成的异二聚体 由16种 亚单位 9种 亚单位组合成20余种整合素 为细胞膜的一种受体 通过与相应的配体结合 决定与周围连接强度 1亚单位组合成的整合素为细胞外基质蛋白的受体 2亚单位组合成的整合素为主要介导白细胞的黏合外基 3亚单位组合成的整合素为主要介导血小板的黏合 整合素的配体特性 有单特性的 只有一种配体如 5 1为FN受体有多特性的 只有多种配体如 6 1 7 1为LN受体TCR CD28 CD44 它们不是整合素 可以增强整合素与其配体的结合肿瘤细胞间 免疫球蛋白超家族类黏附分子为一大类含有免疫球蛋白结构域的分子 包括各种Ig有的属亲同性的细胞黏附分子 CAM 包括 N CAM 神经细胞黏附分子 CEA等有的属亲异性的细胞黏附分子 CAM 包括 I CAM 细胞间黏附分子 PE CAM 血小板内皮细胞黏附分子 V CAM 脉管细胞黏附分子 等 肿瘤细胞间 选择素族 选凝素族属亲异性的细胞黏附分子 它的作用依赖与钙离子 通过碳氢键连接分L E P三种L 存在于白细胞表面 参与白细胞和其他细胞的结合E 存在于内皮细胞表面 参与内皮细胞和其他细胞的结合以及肿瘤细胞和内皮细胞的结合P 存在于血小板与内皮细胞表面参与肿瘤细胞与血小板的结合 肿瘤细胞间 透明质酸粘素家族是一族与透明质酸糖链相结合的细胞黏附分子 为跨膜糖蛋白 介导细胞 细胞之间和细胞 细胞外基质之间的相互作用 CD44属于透明质酸粘素家族 广泛存在与多种细胞表面 内皮细胞 上皮细胞 软骨细胞 成纤维细胞 白细胞等 肿瘤细胞间 3 与肿瘤细胞和细胞外基质的连接增强有关 1 整合素是膜镶嵌糖蛋白 为细胞膜的一种受体 通过与相应的配体结合 决定与周围连接强度LN受体和FN受体TCR CD28 CD44可以增强整合素与其配体的结合 A 层粘连蛋白 laminin LN a 主要是由座落在基底膜上的上皮细胞和内皮细胞 以及被基膜包绕的肌上皮细胞产生 垂体细胞也可合成 基膜的构成主要是由LN 型胶原 硫酸软骨素构成 b 存在于早期的胚胎细胞及某些肿瘤细胞之间 在正常血液和组织液中浓度极低 c 它具有促进细胞增殖的作用 具有促进细胞粘着 迁移 生长的作用 还具有血管生成因子的作用 可使内皮细胞脱落母管 形成新的血管 d 具有与上皮细胞 内皮细胞 神经细胞 肌细胞及多种瘤细胞的结合作用 主要是因为这些细胞的细胞膜表面具有LN的受体 B 纤粘连蛋 fibconectin FN 广泛存在于动物中 有三种形式存在 a 血浆FN 可溶的二聚体 主要由肝细胞产生存在于血浆和体液中参与凝血 创伤愈合 增强吞噬细胞的功能 b 细胞表面的FN 不溶的寡聚体 主要由间质细胞产生的 纤维母细胞 软骨细胞 星形胶质细胞 神经鞘细胞 肝 肾 脑 乳腺 与细胞的分化有关 如纤维母细胞 平滑肌细胞 原始间叶细胞 它们分化成熟的细胞表面FN 消失 c 基质FN 高度难溶多聚体 主要存在于细胞外基质中细胞间质中及某些基膜中 它与各种细胞的迁移都有关系包括 正常细胞 肿瘤细胞它与肿瘤细胞趋化 侵袭 转移 转移时血管的定位相关 2 免疫球蛋白类黏附分子亲异性的细胞黏附分子 CAM 包括 I CAM 细胞间黏附分子 PE CAM 血小板内皮细胞黏附分子 V CAM 脉管细胞黏附分子 3 选择素通过碳氢键连接分L E P三种L 存在于白细胞表面 参与白细胞和其他细胞的结合E 参与内皮细胞和其他细胞的结合以及肿瘤细胞和内皮细胞的结合P 参与肿瘤细胞与血小板的结合 4 透明质酸粘素家族是一族与透明质酸糖链相结合的细胞黏附分子 为跨膜糖蛋白 介导细胞 细胞之间和细胞 细胞外基质之间的相互作用 CD44属于透明质酸粘素家族 广泛存在与多种细胞表面 内皮细胞 上皮细胞 软骨细胞 成纤维细胞 白细胞等 肿瘤细胞间 4 与细胞外的基质降解有关在肿瘤组织间有蛋白水解酶 它们可以来源于肿瘤细胞或宿主细胞 间质 目前研究较多的是 型胶原酶和组织蛋白酶D 1 型胶原酶 2 组织蛋白酶D 细胞外基质降解肿瘤细胞a 本身产生蛋白水解酶b 诱导宿主细胞合成蛋白水解酶 肿瘤边缘蛋白酶和抗蛋白酶之间平衡失调已经肯定与肿瘤侵袭有关的蛋白酶 a 丝氨酸酶b 半胱氨酸酸 c 金属蛋白酶 MMPs 20余种胶原酶类 MMP 1 MMP 8 MMP 13明胶原酶 如 型胶原酶属于金属蛋白 MMP 2 金属蛋白酶组织抑制因子 TIMP 金属蛋白酶组织抑制因子 TIMP 的基因转染动物 肿瘤的转移率 基质溶解素等 d 组织蛋白酶D 组织蛋白酶Be 耐酸酶降解LN FN Pr多糖f 纤维蛋酶原激酶g 尿激酶型胞浆素原活化物 1 型胶原酶它是一种金属蛋白酶 它能溶解基底膜中的 型胶原 当肿瘤细胞表面的LN的受体与基底膜中LN结合后 可诱发肿瘤细胞直接分泌 型胶原酶在内的各种蛋白水解酶 使基底膜中 型胶原 LN FN 蛋白多糖等溶解 基底膜缺损 降解产物对肿瘤细胞具有趋化性 有助于肿瘤细胞浸润与转移 在乳腺癌的研究中发现 正常乳腺组织和良性病变中 型胶原酶的表达水平低 且主要局限于肌上皮细胞的胞浆内 在乳腺癌组织中 型胶原酶表达水平高 且主要位于上皮细胞内 这种由肌上皮细胞到上皮细胞的转变 有助于鉴别良恶性 从原位癌 浸润癌的过程中伴随着 型胶原酶表达水平的明显提高 这种表达规律与LN受体的表达规律一致 同时也发现基底膜的完整性的破坏 也是原位癌与早期微小浸润癌的区别点 2 组织蛋白酶D cathepeimD 它是一种溶酶体的酶 正常它广泛存在于人体的各种组织和细胞中 具有直接消化细胞外间质或间接破坏基底膜的作用 目前关于它的免疫组织化学的研究主要应用在乳腺癌 前列腺癌 膀胱癌 涎腺肿瘤和黑色素瘤等研究中 它们的表达都比相应的良性病变明显增高 说明组织蛋白酶D在这些肿瘤的发展 浸润 转移的机理中起着重要的作用 Cath D的功能 作为蛋白水解酶溶解基底膜 细胞基质和结缔组织 降解细胞外基质的同时 也使得一些贮存在基质中的生长因子释放 纤维母细胞生长因子 FGF 转化生长因子 TGF 激活细胞蛋白酶B 从而触发链式反应 诱导产生活化的尿激酶型 血纤溶酶原激活剂 作为增生因子 通过胰岛素样生长因子 的受体起作用 关于它的分泌机制 有人认为与 型胶原酶的分泌类似 也有人认为是间质细胞或宿主细胞分泌的 有人在乳腺癌的研究中发现 肿瘤中 上皮成分表达Cath D与肿瘤的大小 复发 淋巴结的状况及预后无关间质成分表达则与肿瘤的分化程度 复发 转移 无瘤生存期 生存率有关 主要与巨噬细胞的表达有关 这两种酶 目前关于它的研究也有相互矛盾的结果 主要与检测的方法 抗体的种类及判定标准不同有关 关于能否作为预后的判定指标有待于进一步研究 5 与肿瘤的血管形成有关如果没有新生的血管提供营养 肿瘤在大到1 2mm的直径 107细胞 或厚度时就不再继续增大 因此肿瘤细胞和肿瘤内及周围的巨噬细胞能产生血管生成因子 诱导血管生成 这也是肿瘤生长 浸润 转移的前提 肿瘤血管生成与抑制 1 肿瘤血管的生成 包括三个过程 a 肿瘤细胞产生一些可溶性血管生成因子b 血管生成因子刺激内皮细胞增生 迁移c 金属蛋白酶激活成熟的血管内皮细胞降解细胞外基质和血管生成移动与血管生成有关的因子 这些因子属于细胞因子 可由免疫细胞产生 单 巨 T B NK 也可由非免疫细胞产生 BV内皮细胞 表皮细胞 纤维细胞等 与肿瘤的血管生成有关的因子 a 血管内皮生长因子 VEGF 是碱性 可分泌的肝素结合蛋白 有许多亚型b 酸性或碱性成纤维细胞生长因子 aFGF bFGF c 血管生长素d 胎盘生长因子 PGF e 表皮生长因子 EGF f 血小板源性生长因子 PDGF g 血细胞介素 8 IL 8 h 肿瘤坏死因子 2 TNF 2 2 肿瘤血管的抑制抑制的环节 a 阻断内皮细胞降解周围基质的能力b 直接抑制内皮细胞的功能c 阻断血管生成因子的合成和释放d 阻断内皮细胞表面整合素的作用 血管生成的抑制因子a 血管抑制素 血管稳定素 作用最强 血管静止素b 血小板反应素 1c 内皮抑制素 内皮静止素d 血小板因子 4e 干扰素诱导蛋白 10 IP 10 f 脉管静止素可以由肿瘤细胞产生 也可诱导产生 6 与瘤细胞的运动有关肿瘤细胞具有阿米巴样运动 与细胞的骨架结构有关 微丝 微管 中等纤维 促进它运动的因素有 1 自分泌移动因子 肿瘤细胞产生 2 肝细胞生长因子 3 胸腺素 15 4 表皮生长因子 5 类胰岛素生长因子 6 IL 1 IL 3 IL 6 7 干扰素等 二 与肿瘤转移有关的因素 1 与肿瘤浸润有关的因素均与肿瘤的转移有关 2 与肿瘤细胞进入血循环的状态及有无黏附条件有关 黏附 1 通过血小板黏附 2 栓塞 3 血管内皮细胞表面选择性的黏附因子有关3 与组织器官的微环境有关软骨 心脏 肌肉和脾脏不宜形成转移瘤4 与肿瘤对器官的选择性有关5 与肿瘤的休眠有关6 与机体的免疫状态有关7 与肿瘤的转移抑制基因有关nm23