开题PPT{泌尿外科研究生}

医院2011级泌尿外科研究生 开题报告2012 12 题目 导师 教授研究生 研究方向 泌尿外科学 目录 研究背景 一 概况1 膀胱癌是泌尿系最常见的恶性肿瘤 其中90 以上为移行细胞癌2 膀胱癌具有易复发和晚期恶性加重的特点 给患者及其家庭带来沉重的心理压力及经济负担 研究背景 二 发病率1 膀胱癌发病率在全球恶性肿瘤中位居第十一位 其中在男性恶性肿瘤中排名第七位2 虽然在我国膀胱癌发病率远低于西方发达国家水平 但是近年我国部分城市报告膀胱癌发病率有增高趋势3 城市居民膀胱癌死亡率明显较农村为高 研究背景 膀胱癌中非肌层浸润性膀胱癌予 经尿道膀胱肿瘤电切术后 膀胱内灌注化疗或免疫治疗 仍易复发 三 治疗 研究背景 四 治疗1 至今 术后膀胱内灌注化疗和全身化疗仍是最重要的辅助治疗手段2 但由于化疗药物本身的毒副作用以及肿瘤易产生抗药性 从而使其疗效显著降低3 近些年来 寻找安全 有效的防治膀胱癌复发的治疗方法一直众人关注的热点研究方向 研究背景 四 治疗1 至今 术后膀胱内灌注化疗和全身化疗仍是最重要的辅助治疗手段2 但由于化疗药物本身的毒副作用以及肿瘤易产生抗药性 从而使其疗效显著降低3 近些年来 寻找安全 有效的防治膀胱癌复发的治疗方法一直众人关注的热点研究方向 研究背景 曲古抑菌素A TSA 简介 1 源自链霉菌代谢产物 最先作为抗真菌药物使用2 一种氧肟酸类组蛋白去乙酰化酶抑制剂 近来研究表明其具有抑制组蛋白去乙酰化酶的活性 研究背景 曲古抑菌素A对肿瘤的作用 1 其被证明可在小剂量 低浓度情况下导致肿瘤分化 并选择性地抑制肿瘤生长而对正常细胞无毒副作用2 其日益受到临床医学界重视 而对TSA抑制膀胱癌生长的具体作用机制和途径尚未明确 研究背景 概念 PTEN phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen 为人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的抑癌基因 研究背景 作用 在体内 外均可使FAK脱磷酸 从而阻碍整合素介导的肿瘤细胞扩散 转移 侵袭和骨架蛋白组装 研究背景 pten 特异性使PIP3脱3C磷酸 PI3K AKt信号转导途径 细胞中Akt磷酸化水平显著 细胞生长周期关键激酶抑制因子P27kipl 干扰细胞生长信号 使细胞阻滞于G1期并增加细胞对凋亡的敏感性 研究背景 概念 RUNX3 humanrunt2relatedtranscriptionfac2tor3 人RUNT相关转录因子3 是属于RUNT家族成员的肿瘤抑制基因 研究背景 作用 在Runx蛋白作用下Smad复合物从细胞质内转入特定的靶位点 当Runx基因表达受抑制时 影响TGF2 信号通路的转导 从而诱导肿瘤的发生 研究背景 现状 已证实在胃癌等恶性肿瘤中都出现了Runx3基因转录和翻译水平的下调 但在泌尿系肿瘤尤其是膀胱癌中有关Runx3的研究报道相对较少 相关概念 半定量反转录 聚合酶链反应 SqRT PCR 是近年来常用的一种简捷 特异的定量RNA测定方法 相关概念 SqRT PCR基本原理 1 通过mRNA反转录成cDNA 再进行PCR扩增 并测定PCR产物的数量可以推测样品中特异mRNA的相对数量2 以半定量RT PCR为基础建立起来的mRNA含量测定技术 较含内标化的RT PCR定量测定的mRNA的方法更为简便可行 研究目的和意义 TSA 膀胱移行细胞癌BIU 87细胞株 PTEN表达情况 Runx3表达情况 作用于 探讨 TSA抗癌的可能的作用机制和途径 实验方案 RPMI 1640培养基 酶解并配成1x105 ml细胞悬液 可行性分析 1 本课题人员具备扎实的理论和实验技术基础 导师刘久华主任在膀胱癌研究领域具有较深造诣 其丰富的专业背景和知识将有助于指导本项目的顺利开展 保证该项目的顺利进行 2 科研中心实验室仪器配置保证了试验顺利进行及指标检测 3 大量阅读文献 加深对相关基因的作用机制的认识 跟随导师所习得的关于细胞培养和半定量RT PCR技术让试验的进行更加有保障 预期目标 1 SqRT PCR结果可能显示TSA处理能明显诱导PTEN和Runx3基因表达增加并呈现浓度与时间依赖性2 故而可以得出 TSA体外抗膀胱癌作用机制可能与其诱导PTEN Runx3mRNA的表达上调有关 经费预算 试验细胞及培养3500元购买试剂4500元仪器使用及台租2500元科室协调费1500元合计12000元 进度安排 第一阶段 2012 10 2013 3 查阅文献 选题开题 掌握实验基本步骤 按课题设计申购实验用的各种试剂 盒 及实验细胞株第二阶段 2013 3 2013 9 按照课题设计 完成全部实验 处理样本 检测指标第三阶段 2013 9 2013 11 整理资料 处理数据第四阶段 2013 11 2014 5 发表论文 论文答辩 谢谢 谢