物体表面微生物监测标准操作规程.doc

物体表面微生物监测标准操作规程1.目的规范物体表面采样及监测标准操作规程。2.适用范围2.1医院感染高风险部门，每季度进行检测。2.2 发生有暴发流行。3.采样时间潜在污染区、污染区消毒后采样，清洁区根据现场情况确定。4.职责医院感染管理专职人员或兼职人员应遵守本程序。5.采样面积被采表面100cm2，取全部表面；被采表面100cm2，取100cm2。6.采样方法用5 cm5 cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌0.03 mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）或生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样14个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10 ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体采样。若采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。见表（5.5）。表5.5化学消毒剂的常用中和剂消毒剂相应中和剂浓度（%）含氯消毒剂硫代硫酸钠0.21.0复合含氯消毒剂硫代硫酸钠+吐温80+卵磷脂0.21.0+2.0+0.3过氧乙酸硫代硫酸钠0.10.5过氧化氢硫代硫酸钠+吐温80+卵磷脂0.51.0+2.0+0.3碘酊碘伏硫代硫酸钠+吐温800.5+2.0甲醛双甲酮+马林1.0+0.6戊二醛甘氨酸+吐温802.0+2.0乙醇吐温80+卵磷脂3.0+0.3氯已定吐温80+卵磷脂苯扎溴铵吐温80+卵磷脂注：配制各种中和剂均使用磷酸盐缓冲液（PBS）为基础溶剂。7. 检测方法将采样管充分振荡后，取不同稀释倍数的洗脱液1.0ml接种平皿，将冷至4045的熔化营养琼脂每皿倾注15ml20ml；361恒温箱培养48h，计数菌落数，必要时分离致病性微生物。8.结果计算：8.1规则物体表面物体表面菌落总数计算方法见式（A.2）：物体表面菌落总数(CFU/cm2)=平均每皿菌落数洗脱液稀释倍数.（A.2）采样面积(cm2)8.2小型物体表面的结果计算，用cfu/件表示。9.结果判定9.1 I、II类环境：物体表面细菌菌落总数5 cfu/cm2。9.2 III、IV类环境：物体表面细菌菌落总数10 cfu/cm2。参考文献GB15982-2012 医院消毒卫生标准