《NPN的鉴别方法》PPT课件.ppt

饲料原料中非蛋白氮 NPN 的鉴别 山东六和集团技术部郭吉原 一 目前NPN的种类 A铵盐 NH4HCO3 NH4 2SO4 NH4Cl 尿素B尿素的衍生物 缩二脲 磷酸脲 淀粉糊化尿素 脲醛聚合物 蛋白精 糠醛尿素 糖基化尿素C叠氮化钙CaN6D三聚氰胺C3N6H6 脲醛聚合物和三聚氰胺是目前最常用的NPN脲醛聚合物 蛋白精 CP 10元 三聚氰胺 CP 20元 二 NPN的鉴别 1 尿素 试剂 1 生黄豆粉 将大豆磨成粉末 注意 切勿加热升温 2 酚红 g L 称取酚红 苯酚红 0 1g溶于100ml乙醇中 步骤 取约0 5 2g样品 于50ml比色管内 再加约0 1 0 2g生黄豆粉 3 5滴酚红 40ml水 塞好塞子 摇动30秒 静止 如溶液变成红色 则样品中掺入尿素 二 NPN的鉴别 1 尿素 定量分析 称样1 3g于碘量瓶内 加生豆粉约1克 准确加入100ml水 在30 C摇动1h 过滤 取滤液50ml于蛋白仪内 加NaOH 30 10ml 用硼酸吸收 再用盐酸滴定 同时做样品和生豆粉空白 CP V V0 V01 xCx0 014x6 25 mx50 100 x100 二 NPN的鉴别 2 铵盐 试剂氢氧化钠溶液 g氢氧化钠加 ml水 PH试纸 步骤 取样品3 5g于100ml烧杯内 表皿内侧沾一条湿的PH试纸 向烧杯内加约5 10ml氢氧化钠 将表皿迅速盖上 如试纸迅速变蓝 打开表皿有很浓的氨味则含铵盐 二 NPN的鉴别 3 脲醛聚合物 蛋白精 试剂 变色酸2g L硫酸溶液称取0 2g变色酸于干燥的烧杯内 加入100ml浓硫酸 电炉上加热到约70 80 待溶解后 降温 移入120ml棕色的滴瓶内 步骤 将可疑物从显微镜下夹出数粒于干燥的小烧杯内 滴加约1ml变色酸 电炉上加热到刚刚产生微烟 取下 加入约30ml水 若溶液变成稳定的紫色 则样品中有蛋白精 二 NPN的鉴别 3 脲醛聚合物 蛋白精 1 鱼粉肉骨粉除去伪装方法 任何掺假的鱼粉均要做一番伪装 如直接将经伪装过鱼粉放在显微镜下看很难发现真实情况 因此镜检前应首先要除去伪装 最有效的方法就是脱脂 具体做法如下 鱼粉肉骨粉除去伪装方法 1 1 将少许鱼粉 3 5g 用定性滤纸包好 放入索氏脂肪抽提器内 以石油醚作提取剂 脱脂约30分钟 至石油醚中看不到黄色为止 将纸包取出 水浴上烘干 70 80 2 将少许鱼粉 3 5g 放入烧杯内 加入50ml石油醚 搅拌2分钟 过滤 将滤渣放回烧杯 加50ml石油醚 搅拌2分钟 过滤 将滤渣烘干 70 80 鱼粉肉骨粉除去伪装方法 2 3 将少许鱼粉 3 5g 放入烧杯内 加丙酮50ml搅拌2分钟 静止5分钟 将上清液弃去 再加50ml石油醚搅拌2分钟 静止5分钟 弃去上清液 将下部分的鱼粉烘干 70 80 4 将少许鱼粉 约3g 放入烧杯内 加3gKOH NaOH 再150ml水搅拌后在放电炉煮沸2分钟 静止5分钟 倒掉上清液 用水洗残渣3 4次 再用丙酮50ml洗残渣2 3次 残渣用于蛋白精和含大量粗纤维类物质 如锯末 稻草 麦芽根 的检测 鱼粉肉骨粉除去伪装方法 3 5 将少许鱼粉 约3 5g 放入分液漏斗中 加四氯化碳50 80ml 轻轻摇动后静止5分钟 把分液漏斗活拴打开将沉淀物放到一小烧杯内 之后将小烧杯内沉淀物过滤出来 此残渣用于蛋白精的检测 请注意 乙醚 丙酮 石油醚均为易燃品 请在通风的条件下操作 严禁烟火 三 其它定性检查的方法 A 掺入植物类物质 如小麦麸 稻谷壳 粉丝蛋白粉 试剂 碘 碘化钾溶液称1g的碘及5g碘化钾于烧杯内 加100ml水搅拌2分钟 待溶解后将其移入120ml棕色的滴瓶内 步骤 取约5g样品放在烧杯内 加约70ml水 在电炉上煮沸 取下静止2分钟 滴加碘 碘化钾试剂 2ml 如溶液变成蓝色则掺入植物性的物质 三 其它定性检查的方法 B 掺入植物性物质 含大量粗纤维类物质 如锯末 稻草 麦芽根 试剂 1 间苯三酚20g L称间苯三酚2g加100ml95 乙醇 溶解后放入棕色滴瓶2 浓盐酸36 分析纯步骤 称1 2g鱼粉于培养皿内 滴加间苯三酚使样品湿润 放置5 10分钟后 滴加浓盐酸约0 5ml 放置2 3分钟 如样品显现深红色 则样品中含木质素 在显微镜下进一步确认为何物 三 其它定性检查的方法 C 掺入皮革粉试剂 1 稀硫酸2mol L将取10ml浓硫酸慢慢加入到90ml水中 2 二苯基卡巴腙2g L称0 2g二苯基卡巴腙 加入100ml95 乙醇 溶解后 移入棕色滴瓶内 步骤 取1 3g鱼粉于坩埚内 在电炉上炭化 再放在马弗炉内于550 600 下灰化2小时 取出 降温后 加入稀硫酸10ml搅拌 加二苯基卡巴腙5 10滴 如溶液显紫红色则样品中含皮革粉 四 目前真蛋白测定中的问题 1 真蛋白的测定方法 水洗法 三氯乙酸法 碱性硫酸铜法 重金属盐沉淀法 四 目前真蛋白测定中的问题 2 这类方法的特点 能查出水溶性的NPN如 铵盐 尿素 磷酸脲 对水不溶性的NPN查不出 如 脲醛聚合物 蛋白精 糠醛尿素 淀粉糊化尿素 缩二脲 糖基尿素 三聚氰胺 花生粕等本身就有3 7个CP是水溶的 检测数据汇总 花生粕水溶性蛋白试验 xls 四 目前真蛋白测定中的问题 不论掺什么NPN都盲目的测真蛋白将会错检 误检 漏检 四 目前真蛋白测定中的问题 3 赖氨酸复合饲料的真蛋白 玉米用亚硫酸浸12 48h 粗粉碎胚芽玉米皮分离 离心分离膜过滤 淀粉 玉米胚芽玉米皮 玉米蛋白粉 葡萄糖 淀粉酶 赖氨酸 Lys渣Lys高蛋白 Lys98 65 Lys复合饲料Lys蛋白 玉米皮稻谷壳 含NH3废水 Lys菌种及杂菌 赖氨酸菌种 NH3 赖氨酸复合饲料的质量情况汇总 赖氨酸复合饲料的质量特点 游离氨NH3高 3 CPNH3 15 17 AA 14 16 CP 36 39 CPNH3CP 组成 玉米皮 赖氨酸生产过程的含氨废水 霉菌毒素的残留高F 2 1500 5000ppbDON 1 3ppmAFB1 15 50ppb 40 四 目前真蛋白测定中的问题 赖氨酸蛋白 外观 褐色或黑色小球 2种赖氨酸菌体蛋白的对比 3 如何测真蛋白 判断是否掺假 NPN 镜检 定性分析 根据NPN的种类决定采用什么方法AA总和 最有效的方法三氯乙酸法 碱性硫酸铜法 重金属盐沉淀法 水洗法 四 目前真蛋白测定中的问题 3 如何测真蛋白 掺微量的NPN 调蛋白1 5个百分点 氨基酸分析也难查出 只有用其它方法检测如 镜检 过筛测定CP 定性分析测真蛋白要根据具体情况定方法 决不能教条主义 四 目前真蛋白测定中的问题 3 如何测真蛋白AA法 最有效 四 目前真蛋白的测定中的问题 五 鱼粉 1 鱼粉和鱼排粉有下面2个问题 真假的问题 好坏的问题 2 解决问题的方法 真假镜检 AA NIR 定性和常规检测分析上述这些方法已能解决真假的问题 五 鱼粉 好坏 是现在碰到最多的问题 鱼粉的好坏与鱼粉的种类有关白鱼粉 蒸汽鱼粉 直火鱼粉 蒸干鱼粉 下杂鱼粉 鱼干粉 直火鱼粉常含少部分 10 20 过热成分 质量差的直火鱼粉有时含40 50 的烧焦鱼粉 也可能是掺入的自燃鱼粉 直火干燥鱼粉 样品经脱脂处理 可见很多颗粒被火燎焦糊了 直火干燥鱼粉 样品经脱脂处理 可见被火燎焦糊的颗粒 五 鱼粉 鱼粉的好坏与鱼粉的新鲜度有关新鲜度指标 感观 气味 VBN 组胺 酸价 过氧化值 TBA 蒸干鱼粉 下杂鱼粉 鱼干粉的新鲜度最差含鱼溶浆多的鱼粉新鲜度也差一些感观难看和气味难闻的鱼粉新鲜度很差 五 鱼粉 1 乳猪料用蒸汽鱼粉 禁用蒸干鱼粉 下杂鱼粉 鱼干粉 最好不用直火鱼粉 2 6 9月减少国产鱼粉用量 多用进口鱼粉 其它时间增大国产鱼粉用量 3 进口鱼粉也逐渐象国产鱼粉一样掺假的手段及方法 谢谢大家