2019年高考生物一轮复习 第十单元 现代生物科技专题单元A卷.doc

第十单元 现代生物科技专题注意事项：1答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在试题卷和答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在答题卡上的指定位置。2选择题的作答：每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。3非选择题的作答：用签字笔直接答在答题卡上对应的答题区域内。写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。4考试结束后，请将本试题卷和答题卡一并上交。一、选择题（本题包括25小题，每小题2分，共50分，每小题只有一个选项最符合题意）1下列关于DNA连接酶作用的叙述，正确的是（ ）A将单个脱氧核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键B将限制酶切开的两个DNA片段连接起来，重新形成磷酸二酯键C连接两条DNA链上碱基之间的氢键D只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，而不能将双链DNA片段平末端之间进行连接2用Xho和Sal两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是（ ）A图1中两种酶识别的核苷酸序列不同B图2中酶切产物可用于构建重组DNAC泳道中是用Sal处理得到的酶切产物D图中被酶切的DNA片段是单链DNA3一环状DNA分子，设其长度为1。限制性核酸内切酶A在其上的切点位于0.0处；限制性核酸内切酶B在其上的切点位于0.3处；限制性核酸内切酶C的切点未知。但C单独切或与A或B同时切的结果如下表，请确定C在该环状DNA分子的切点应位于图中的哪处（ ）A0.2和0.4处 B0.4和0.6处C0.5和0.7处 D0.6和0.9处4下列关于质粒的叙述，正确的是（ ）A质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B质粒是细菌细胞质中能够自主复制的小型环状DNA分子C质粒只有在导入宿主细胞后才能复制D质粒存在于细菌等微生物中，天然质粒往往能直接用于基因工程操作5下列关于cDNA文库及其建立过程的叙述中，哪一项是不正确的（ ）AcDNA文库包含了某种生物的部分基因B需从特定组织或细胞中提取DNA或RNAC利用mRNA的反转录合成互补DNA片段D合成的互补DNA片段需要连接在载体上6有关PCR技术的说法，不正确的是（ ）APCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术BPCR技术的原理是DNA双链转录C利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列DPCR扩增中不需要解旋酶解开双链DNA7如图为表达载体的模式图，若结构X是表达载体所必需的，则X最可能是（ ）A氨苄青霉素抗性基因B启动子C限制酶DDNA连接酶8下列技术依据DNA分子杂交原理的是（ ）用DNA分子探针诊断疾病重组DNA导入受体细胞亲子鉴定目的基因与运载体结合形成重组DNA分子A B C D9下列关于蛋白质工程的说法正确的是（ ）A蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作B蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子C对蛋白质工程的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的D蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的10下列关于植物组织培养的叙述中，正确的是（ ）A同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同B一般来说，容易进行无性繁殖的植物，不容易进行组织培养C离体器官或组织都需在光下才能形成愈伤组织D培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压11植物细胞融合完成的标志的是（ ）A产生新的细胞壁 B细胞膜发生融合C细胞质发生融合 D细胞核发生融合12与植物体细胞杂交密切相关的下列叙述中，不正确的是（ ）A利用离心、振动、电激等诱导B利用聚乙二醇（PEG）等试剂诱导C克服远缘杂交不亲和的障碍D快速繁殖、培育无病毒植物13下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（ ）A需用胰蛋白酶处理组织，但要控制加入的酶量和处理的时间，防止损伤细胞B动物细胞培养是动物细胞工程的基础技术C悬液中分散的单个细胞很快就会贴附在瓶壁上D“细胞在传至1050代左右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止”的主要原因是接触抑制14单克隆抗体与血清抗体相比，优越之处在于（ ）A单克隆抗体可制成生物导弹B单克隆抗体的特异性强、灵敏度高，产量也大大高于血清抗体C单克隆抗体可以在体外制备D单克隆抗体制备过程简单15将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于某种癌症的治疗。其过程如下图所示。下列有关叙述错误的是（ ）A经形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并产生特定抗体B过程得到的不都是杂交瘤细胞C过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞D抗体的靶向作用使过程具有高度特异性16以下说法不正确的是（ ）A雄性动物从初情期开始产生精子B1个精原细胞可形成四个精子C精子在睾丸内形成时间为两个月左右D动物体型大的产生的精子多且大17当卵母细胞达到（ ）时期时，才具备与精子受精的能力A减数第二次分裂后期 B减数第一次分裂末期C减数第二次分裂中期 D减数第二次分裂结束成熟18下列能正确表示高等动物胚胎发育顺序的是（ ）A受精卵卵裂囊胚原肠胚组织器官的分化B卵卵裂原肠胚组织器官的分化C受精卵囊胚原肠胚幼体D受精卵卵裂桑椹胚囊胚原肠胚组织器官的分化19采集卵母细胞时，不宜采用的方法是（ ）A用特定激素处理，然后从输卵管中冲取卵子B从屠宰场已屠宰母畜的卵巢中采集C借助超声波探测仪、内窥镜等工具，直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞D将动物麻醉后，用特制的电极直接刺激排卵中枢神经，引起排卵20下列关于胚胎干细胞特点的叙述，不正确的是（ ）A胚胎干细胞可由原始性腺分离出来B囊胚所有的细胞都是胚胎干细胞C体积小、细胞核大、核仁明显D体外培养条件下，ES细胞可以增殖而不分化21下列有关胚胎移植的叙述中错误的是（ ）A对供体、受体要进行选择 B必须用激素对供体进行超数排卵处理C必须对供体和受体动物进行同期发情处理D对供体和受体要进行体内受精，防止发生生理变化不同步22胚胎分割对内细胞团不均等分割会导致（ ）A分割后胚胎的遗传物质产生差异B分割后胚胎的恢复受到影响C分割后的胚胎难以进行移植D分割后的胚胎难以进行性别鉴定23下列关于生物技术的安全性和伦理问题的分析，不合理的观点是（ ）A转基因生物进入自然界后不会与野生物种杂交而威胁其他生物的生存B运用重组DNA技术可以将致病菌或病毒改造成威力巨大的生物武器C我国的政策是禁止进行生殖性克隆人D转基因生物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏原或者引起中毒24我国在西部多省区实行退耕还林还草工程，这一工程属于（ ）A农村综合发展型生态工程 B大区域生态系统恢复工程C小流域综合治理生态工程 D湿地生态恢复工程25下列关于生态工程的叙述，正确的是（ ）A窦店村综合发展型生态工程建立了良好的物质多级循环利用程序B在城市环境治理中，实现垃圾分类处理体现了协调与平衡原理C对湿地的恢复，只要注意退耕还湿地或建立自然保护区就可以了D我国的生态工程应该以经济和社会效益为主要目标二、非选择题（本题包括5小题，除特别说明外，每空1分，共50分）26（10分）甲型流感病毒为RNA病毒，易引起流感大规模流行。我国科学家在2017年发明了一种制备该病毒活疫苗的新方法，主要环节如下。请回答下列问题：（1）改造病毒的部分基因，使其失去在正常宿主细胞内的增殖能力。以病毒RNA为模板，逆转录成对应DNA后，利用 技术扩增，并将其中某些基因（不包括表面抗原基因）内个别编码氨基酸的序列替换成编码终止密码子的序列。与改造前的基因相比，改造后的基因表达时不能合成完整长度的 ，因此不能产生子代病毒。将该改造基因、表面抗原等其他基因分别构建重组质粒，并保存。（2）构建适合改造病毒增殖的转基因宿主细胞。设计合成一种特殊tRNA的基因，其产物的反密码子能与（1）中的终止密码子配对结合，并可携带一个非天然氨基酸（Uaa）。将该基因与_连接后导入宿主细胞。提取宿主细胞的 进行分子杂交鉴定，筛选获得成功表达上述tRNA的转基因宿主细胞。（3）利用转基因宿主细胞制备疫苗。将（1）中的重组质粒导入（2）中的转基因宿主细胞，并在补加 的培养基中进行培养，则该宿主细胞能利用上述特殊tRNA，翻译出改造病毒基因的完整蛋白，产生大量子代病毒，用于制备疫苗。特殊tRNA基因转录时，识别其启动子的酶是_（单选）。A病毒的DNA聚合酶B宿主的DNA聚合酶C病毒的RNA聚合酶D宿主的RNA聚合酶（4）上述子代病毒不能在正常宿主细胞中增殖，没有致病性，因此不经灭活或减毒即可制成疫苗。与不具侵染性的流感病毒灭活疫苗相比，该病毒活疫苗的优势之一是可引起 免疫，增强免疫保护效果。27（12分）某种荧光蛋白（GFP）在紫外线或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5末端，获得了L1-GFP融合基因（简称甲），并将其插入质粒PO，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切点的示意图如下，图中E1E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。回答下列问题：（1）据图推断，该团队在将甲插入质粒PO时，使用了两种限制酶，这两种酶是_。使用这两种酶进行酶切既保证_，又保证_。（2）将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色的荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了_和_过程。（3）为了获得含有甲的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的_移入牛的_中，体外培养，胚胎移植等。（4）为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的_（填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”）作为PCR模板。28（8分）2018年细胞期刊报道，中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆猴“中中”和“华华”。回答下列问题：（1）“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程，核移植是指_。通过核移植方法获得的克隆猴，与核供体相比，克隆猴体细胞的染色体数目_（填“减半”“加倍”或“不变”）（2）哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度_（填“大于”或“大于”）体细胞核移植，其原因是_。（3）在哺乳动物核移植的过程中，若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，通常，所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目_（填“相同”或“不相同”），性染色体组合_（填“相同”或“不相同”）。29（10分）生物技术就像一把双刃剑，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来灾难。例如用克隆技术制造出克隆人，用转基因技术制造生物武器等。面对生物技术可能产生的负面影响，公众不可避免地产生了疑虑。近年来，生物技术引发的社会争论越来越广。回答下列问题：（1）目前我国是种植转基因作物较多的国家之一，关于转基因生物的安全性的争论越来越多，转基因生物的安全性主要涉及_、_、_等方面。（2）试管婴儿技术诞生后，继而出现了设计试管婴儿技术，二者在对人类作用上的区别是_。在技术手段上的区别是_。（3）克隆羊的过程中需要用到下列哪些技术？_（填序号）。体外早期胚胎培养 体外受精 胚胎移植 细胞核移植30（10分）柴静的纪录片穹顶之下引发了全国人民对雾霾的关注和讨论，而天津港火灾爆炸事故遗址将在彻底清理后建设海港生态公园，这再次将生态环境与生态经济推上舆论的焦点。生态工程的建设已经成为社会关注的热点。请回答下列问题：（1）山西省为产煤大省，生态环境破坏严重，矿区废弃地的生态恢复工程的关键在于_，具体实施的措施有_（答两点）。（2）某生态工程以沼气工程为中心，各类植物的秸杆、枝叶用来生产饲料喂养畜、禽、鱼，人、畜、禽粪便作为原料生产沼气，沼渣水返还农田、菜园、果园、苗圃、渔塘，主要体现了生态工程的_原理。该生态工程建设中，鱼塘中每一种鱼苗的投放量都不宜超过其_。该生态系统把鱼塘、农田、果园等有机地组合在一起，优化了系统结构，遵循_原理。（3）在上述的生态工程中，种植不同的农作物、果树，饲养多种畜禽，这体现了生态工程的_原理。（4）一般来说，生态工程的主要任务是对_进行修复，对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力。（5）在应用植物修复技术治理重金属污染的土壤时，需选择符合要求的植物，这遵循了生态工程的_原理。教育单元训练金卷高三生物卷（A）第十单元 现代生物科技专题答 案一、选择题（本题包括25小题，每小题2分，共50分，每小题只有一个选项最符合题意）1【答案】B【解析】将单个脱氧核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键，是DNA聚合酶的功能，A错误；将限制酶切开的两个DNA片段连接起来，重新形成磷酸二酯键，是DNA连接酶的作用，B正确；两条DNA链上碱基之间的氢键的形成不需要酶的催化，C错误；有的DNA连接酶（如T4DNA连接酶）既可以将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，又可以将双链DNA片段平末端之间进行连接，D错误。2【答案】D【解析】限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列，不同的限制酶能识别不同的核苷酸序列，由电泳图可知Xho和Sal两种酶分别切割同一DNA片段后的酶切产物不同，故识别的序列不同，A正确；同种限制酶切割出的DNA片段，具有相同的黏性末端，再用DNA连接酶进行连接，可以构成重组DNA，B正确；Sal将DNA片段切成4段，Xho将DNA片段切成3段，根据电泳结果可知泳道为Sal，泳道为Xho，C正确；限制酶切割双链DNA，酶切后的DNA片段仍然是双链DNA，D错误。3【答案】A【解析】C单独切，得到长度为0.8和0.2的两个片段，C与A同时切，得到长度为2个0.2和1个0.6的片段，说明C的切点位于0.2和0.4处或0.2和0.8处；C与B同时切，得到长度为2个0.1和1个0.8的片段，说明C的切点位于0.2和0.4处或0.4和0.5处。综上分析，C在该环状DNA分子的切点位于0.2和0.4处，A正确。4【答案】B【解析】质粒是存在于细菌中的一种环状DNA分子，不是细胞器，A错误；质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子，B正确；在体外，若给予适宜的条件，质粒也可能进行复制，C错误；天然质粒往往要改造后才能用于基因工程操作，D错误。5【答案】B【解析】建立cDNA文库需从特定组织或细胞中提取RNA，利用mRNA的反转录合成互补DNA片段，合成的互补DNA片段需要连接在载体上，导入受体菌群中保存。由于特定组织或细胞中只有部分基因转录生成mRNA，所以cDNA文库只包含了某种生物的部分基因。综上分析，B错误。6【答案】B【解析】PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，其原理是DNA双链复制，A正确，B错误；利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物，C正确；PCR扩增中首先要使目的基因DNA受热变性后解链为单链，不需要解旋酶解开双链DNA，D正确。7【答案】B【解析】基因表达载体的组成包括启动子、目的基因、终止子以及标记基因等，B正确。8【答案】B【解析】DNA分子探针诊断疾病利用了DNA分子杂交检测是否具有致病基因，正确；重组DNA导入受体细胞，利用了运载体的特点，错误；亲子鉴定利用了DNA分子杂交原理，正确；目的基因与运载体结合形成重组DNA分子依据目的基因与运载体具有相同的结构，错误。综上分析，B正确。9【答案】B【解析】蛋白质工程是在分子水平上对现有蛋白质的基因分子进行操作，改造基因即改造蛋白质，而且可以遗传，A错误；由概念可知，蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子，B正确；对蛋白质的改造是通过直接改造现有蛋白质的基因来实现的，C错误；蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是不完全相同的，D错误。10【答案】D【解析】同一株绿色开花植物体细胞和花粉细胞经培养获得的愈伤组织基因不同，A错误；一般来说，容易进行无性繁殖的植物，容易进行组织培养，B错误；离体器官或组织需要避光培养形成愈伤组织，C错误；蔗糖可以被植物细胞缓慢吸收，培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压，D正确。11【答案】A【解析】植物体细胞融合完成的标志是再生出细胞壁，A正确。12【答案】D【解析】快速繁殖、培育无病毒植物是植物组织培养的应用实例，D错误。13【答案】D【解析】动物细胞培养需用胰蛋白酶处理组织，将细胞分散开来，但要控制加入的酶量和处理的时间，防止损伤细胞，A正确；动物细胞培养是动物细胞工程的基础技术，B正确；悬液中分散的单个细胞随着分裂次数的增加很快就会贴附在瓶壁上，C正确；细胞一般只能分裂1050代，再分裂细胞将癌变，D错误。14【答案】B【解析】单克隆抗体与血清抗体相比，具有特异性强、灵敏度高、可大量制备的优点，B正确。15【答案】A【解析】经形成的杂交瘤细胞不一定都能产生特定抗体，需要经过抗体阳性检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，A错误；过程得到的不都是杂交瘤细胞，还有骨髓瘤细胞相互融合的细胞和B淋巴细胞相互融合的细胞，B正确；过程需要采用抗体阳性检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，然后进行克隆化培养（包括体内培养和体外培养），C正确；抗体的靶向作用使过程具有高度特异性，D正确。16【答案】D 【解析】雄性动物从初情期开始产生精子，1个精原细胞经过两次连续的分裂，能得到4个精子细胞。精子在睾丸内形成的时间为两个月左右，不同动物精子的形态相似，大小略有不同，与动物的体型大小无关。综上分析，D错误。17【答案】C【解析】卵母细胞达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力，C正确。18【答案】D【解析】高等动物胚胎发育为：受精卵首先通过卵裂形成32个细胞的桑椹胚，桑椹胚细胞再增殖分化形成具有囊胚腔的囊胚，囊胚继续分化形成具有三个胚层分化的原肠胚，然后出现组织器官的分化，最后形成幼体。综上分析，D正确。19【答案】D【解析】对于实验动物如小鼠、兔以及家畜采用冲卵的方法。对于大型家畜如牛采用的方法是：从屠宰场已经屠宰母畜的卵巢内采集卵母细胞，或者借助超声波探测仪、内窥镜等工具，直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。综上分析，D错误。20【答案】B【解析】胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺，A正确；囊胚期的内细胞团是胚胎干细胞，滋养层细胞不是，B错误；胚胎干细胞的特点是体积较小、细胞核大、核仁明显，C正确；ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态，D正确。21【答案】D【解析】胚胎移植获得的子畜由供体公畜和供体母畜决定，与受体母畜无关，所以供体需要遗传性状优良的品种，受体母畜可用遗传性状一般的品种，A正确；在发情期，给良种母牛注射激素，促进母牛多排卵，B正确；只有受体与供体的生理状态相同，被移植的胚胎才能继续正常发育，所以需要对供、受体母牛进行同期发情处理，C正确，D错误。22【答案】B【解析】胚胎分割后胚胎的遗传物质相同，可以进行性别鉴定和移植，但对内细胞团不均等分割会导致分割后胚胎的恢复受到影响，B正确。23【答案】A【解析】转基因生物有可能会在近缘物种之间通过花粉杂交，造成基因库的污染，A错误；转基因技术如果被用于军事，制造出生物武器，那将是对人类社会极大的毁灭，B正确；克隆技术还不成熟，且克隆人会带来社会伦理等问题，所以我国反对生殖性克隆，但不反对治疗性克隆，C正确；某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏原或者引起中毒，D正确。24【答案】B【解析】大区域生态系统恢复工程解决的问题是过度樵采、过度放牧、盲目开垦、不合理利用水资源等原因导致的荒漠化，B正确。25【答案】A【解析】北京郊区窦店村的以沼气工程为中心的物质多级循环利用工程，符合物质循环再生原理，A正确；在城市环境治理中，实现垃圾分类处理，充分利用废弃物中的物质和能量，体现物质循环再生原理，B错误；对湿地的恢复，要注意退耕还湿地或建立自然保护区，还要依靠自然演替机制恢复其功能，C错误；生态工程应该以自然、经济和社会效益为主要目标，保障生态系统的平衡和稳定，D错误。二、非选择题（本题包括5小题，除特别说明外，每空1分，共50分）26（10分）【答案】（1）PCR 多肽（或蛋白质）（2）载体 总RNA（2分）（3）非天然氨基酸（Uaa）（2分） D（2分）（4）细胞【解析】（1）PCR技术是体外复制特定DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火（复性）及适温延伸等反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。因此以病毒RNA为模板，逆转录成对应DNA后，利用PCR技术扩增，由于将其中某些基因（不包括表面抗原基因）内个别编码氨基酸的序列替换成编码终止密码子的序列，因此肽链合成提前终止，这样与改造前的基因相比，改造后的基因表达时不能合成完整长度的多肽（或蛋白质），因此不能产生子代病毒。（2）基因工程的核心步骤为基因表达载体的构建，将该基因与载体连接后才能导入宿主细胞，检测目的基因是否成功表达上述tRNA时，利用核酸分子杂交技术，即用相应的DNA探针与宿主细胞的总RNA分子进行杂交鉴定，进而筛选获得成功表达上述tRNA的转基因宿主细胞。（3）因为设计的宿主细胞具有能合成一种特殊tRNA的基因，其产物的反密码子能与（1）中的终止密码子配对结合，并可携带一个非天然氨基酸（Uaa），因此可在补加非天然氨基酸（Uaa）的培养基中进行培养，筛选出宿主细胞。进而利用该宿主细胞，翻译出改造病毒基因的完整蛋白，产生大量子代病毒，用于制备疫苗。因为转录在宿主细胞内进行，且启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，因此需要使用宿主细胞的RNA聚合酶。（4）不具侵染性的流感病毒灭活疫苗，不能侵入细胞内部，只能引起体液免疫，产生相应的抗体与记忆细胞，而该疫苗能够侵入细胞，引起的免疫属于细胞免疫。 27（12分）【答案】（1）E1和E4（2分） 甲的完整（2分） 甲与载体正确连接（2分）（2）转录 翻译（3）细胞核 去核卵母细胞（4）核DNA（2分）【解析】（1）要保证目的基因在受体细胞中能够正确表达，目的基因的首端应有启动子，尾端应有终止子。甲是将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5末端而获得的L1-GFP融合基因，据此结合题意并分析图示可知：该团队在将甲插入质粒PO时，如果用E2或E3，则目的基因不完整，而使用E1和E4这两种限制酶进行酶切既保证了甲的完整，又保证了甲与载体正确连接，因此，使用的两种限制酶是E1和E4。（2）构建的真核表达载体P1中含有GFP基因，而GFP基因的表达产物“某种荧光蛋白（GFP）”在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光。若在导入P1的牛皮肤细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了表达。基因的表达过程包括转录和翻译。（3）若要获得含有甲的牛，可采用核移植技术，即将能够产生绿色荧光细胞的细胞核移入牛的去核卵母细胞中获得重组细胞，并将该重组细胞在体外培养成重组胚胎，再经过胚胎移植等获得含有甲的牛。（4）PCR是多聚酶链式反应的缩写，是一种在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。若利用PCR方法检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，则应分别以该牛不同组织细胞中的核DNA作为PCR模板。28（8分）【答案】（1）将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最后发育成为动物个体（2分） 不变（2）小于 胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易（2分）（3）相同 不相同【解析】（1）核移植是指将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最后发育成为动物个体。通过核移植方法获得的克隆猴的细胞核来自供体，因此克隆猴体细胞的染色体数目和供体一致。（2）胚胎细胞核移植的难度小于体细胞核移植，其原因是动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易。（3）哺乳动物雌性个体和雄性个体的体细胞染色体常染色体相同，前者的性染色体是XX，后者是XY，因此分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，通常所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目相同，性染色体组合不同。29（10分）【答案】（1）食物安全 生物安全 环境安全（2）前者主要用于治疗不孕夫妇的不孕症，后者可以用于治疗需要骨髓移植或造血干细胞移植等的疾病（2分） 后者胚胎在移植前需进行遗传学诊断（2分）（3）（3分）【解析】试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植产生后代的技术；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎，然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植产生后代的技术。（1）转基因生物的安全性主要涉及食物安全、生物安全、环境安全等方面。（2）试管婴儿和设计试管婴儿技术在对人类作用上的区别是前者主要用于治疗不孕夫妇的不孕症，后者可以用于治疗需要骨髓移植或造血干细胞移植等的疾病。在技术手段上，后者胚胎在移植前需进行遗传学诊断。（3）克隆羊的产生步骤简单来说就是取A羊的卵细胞的细胞核置入去了核的B羊卵细胞中，在体外培养成胚胎之后再置入C羊子宫内，所以用到的技术有：细胞核移植体外早期胚胎培养胚胎移植。30（10分）【答案】（1）植被恢复与土壤微生物群落的重建（2分） 人工制造表土、土壤侵蚀控制、植被恢复工程（2分）（2）物质循环再生 环境容纳量 系统的结构决定功能（3）物种多样性（4）已破坏的生态系统（5）协调与平衡【解析】（1）矿区废弃地的生态恢复工程的关键在于植被恢复与土壤微生物群落的重建，具体实施的措施有人工制造表土、土壤侵蚀控制、植被恢复工程等。（2）该生态工程以沼气工程为中心，各类植物的秸秆、枝叶用来生产饲料喂养畜、禽、鱼，人、畜、禽粪便作为原料生产沼气，沼渣水返还农田、菜田、果园、苗圃、鱼塘，体现了生态工程的物质循环再生原理。该生态工程建设中，鱼塘中每一种鱼苗的投放量都不宜超过其环境容纳量。该生态系统把鱼塘、农田、果园等有机地组合在一起，优化了系统结构，遵循系统的结构决定功能原理。（3）该生态工程种植不同的农作物、果树、苗木，饲养牛、猪、鸡等多种畜禽，这体现了生态工程的物种多样性原理。（4）生态工程的主要任务是对已破坏的生态系统进行修复，对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力。（5）在应用植物修复技术治理重金属污染的土壤时，需选择符合要求的植物，这遵循了生态工程的协调与平衡原理。