药物的杂质检查ppt课件

第二章生物药物的杂质检查 1 药物的纯度要求 指药物纯净程度 反映了药物质量的优劣 含有杂质是影响药物纯度的主要因素 2 杂质是指 1 有毒副作用的物质2 本身无毒副作用 但影响药物的稳定性和疗效的物质3 本身无毒副作用 也不影响药物的稳定性和疗效 但影响药物的科学管理的物质 3 一 杂质的来源与种类 一 杂质的来源 1 生产过程中引入 1 原料 反应中间体及副产物 2 试剂 溶剂 催化剂类 3 生产中所用金属器皿 装置以及其他不耐酸 碱的金属工具所带来的杂质 4 例 阿斯匹林由水杨酸乙酰化制得 5 制剂过程中可能产生新物质 6 1 在药物生产过程中引入杂质的途径为A 原料不纯或部分未反应完全的原料造成B 合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成C 需加入的各种试剂产生吸附 共沉淀生成混晶等造成D 所用金属器皿及装置等引入杂质E 由于操作不妥 日光曝晒而使产品发生分解引入的杂质 7 2 贮藏过程中产生 水解 氧化 分解 异构化 晶形转变 聚合 潮解和发霉等 8 易发生水解反应的结构 酯 内酯 酰胺 卤代烃 苷类等 易发生氧化反应的结构 醚 醛 酚羟基 巯基 亚硝基 双键等 9 二 杂质的种类 药物中的杂质按来源分为 1 一般杂质 如氯化物 硫酸盐 铁盐 重金属 砷盐 酸 碱 水分 易炭化物 炽灼残渣等 一般杂质其检查方法收载在中国药典的附录中 10 2 特殊杂质 指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质 如阿司匹林中的游离水杨酸 异烟肼中的游离肼 甾体激素中的其他甾体 特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中 11 三 药物的纯度与化学试剂的纯度 药物的纯度考虑杂质的生理作用 药品只有两个等级 合格或不合格 化学试剂有很多等级 如基准试剂 优级纯 GR 分析纯 AR 化学纯 CP 色谱纯 光谱纯 12 例 临床所用药物的纯度与化学品及试剂纯度的主要区别是A 所含杂质的生理效应不同B 所含有效成分的量不同C 所含杂质的绝对量不同D 化学性质及化学反应速度不同E 所含有效成分的生理效应不同 13 二 杂质的限量检查 指药物中允许杂质存在的最大量 通常用百分之几或百万分之几来表示 砷 10ppm重金属 50ppm 14 杂质量 杂质限量 杂质量 药品合格 药品不合格 15 一 药物的杂质检查法 1 对照法限量检查法 LimitTest 特点 不需知道杂质的准确含量 灵敏度法 对照法 比较法 16 操作 平行试验 比较两比色管的颜色或浊度 判断杂质限量是否符合规定 管2 对照管 管1 样品管 取限度量的待检杂质对照品配成的对照溶液 与一定量供试品配成的供试品溶液在相同条件下处理 比较反应结果 判断供试液中所含杂质限度是否符合规定 标准对照法 17 2 灵敏度法 系指在供试品溶液中加入试剂 在一定反应条件下 不得有正反应出现 特点 不需对照品 18 3 比较法 与空白比较 含量测定法 测定杂质的绝对含量 如测定吸收度 pH值等 特点 不需对照品 19 20 二 杂质限量的计算 21 22 1 检查某药物中的砷盐 取标准砷溶液2ml 每1ml相当于1 g的As 制备标准砷斑 砷盐限量为0 0001 应取供试品的量为A 0 20gB 2 0gC 0 020gD 1 0gE 0 10g 23 已知 c 1 g ml 1 10 6g mlV 2mlL 0 0001 24 2 检查维生素C中的重金属时 若取样量为1 0g 要求含重金属不得过百万分之十 问应吸取标准铅溶液 每1ml 0 01mg的Pb 多少ml A 0 2mlB 0 4mlC 2mlD 1mlE 20ml 25 26 27 28 29 30 第三节杂质检查的原理 31 检查方法 一 利用药物和杂质在物理性质上的差异二 利用药物和杂质在化学性质上的差异 32 一 利用药物和杂质在物理性质上的差异 一 臭味及挥发性的差异 二 颜色的差异 三 溶解行为的差异 四 旋光性质的差异 五 对光吸收性质的差异 六 吸附或分配性质的差异 33 一 臭味及挥发性的差异 药物 特别是挥发性药物 中如存在具有特殊气味的杂质 可以由气味判断该杂质的存在 乙醇 冰醋酸 苯酚 氟烷 浓过氧化氢如麻醉乙醚异臭检查 控制原料乙醇中引入的杂醇油以及乙醛和过氧化物等杂质 方法为 取供试品10ml 置于瓷蒸发皿中 使自然挥发 挥散完毕后 不得有异臭 34 二 颜色的差异 某些药物自身无色 但从生产中引入了有色的有关物质 或其分解产物有颜色 维生素C 三 溶解行为的差异 有的药物可溶于水 有机溶剂或酸 碱中 而其杂质不溶 反之 杂质可溶而药物不溶 葡萄糖 中间产物 糊精 溶于热乙醇 糊精不溶 35 四 旋光性质的差异 测定旋光度可以用来区别不同的药物 检查杂质的含量 利用的是供试品与其特殊杂质在比旋度上的差异 举例 维生素C溶液 0 10g ml 20 5 21 5 本身没有旋光性的药物 杂质有 则可以通过限定药物溶液的旋光度值来控制相应杂质的量 36 旋光度 光学活性物质的液体或溶液使平面偏振光的振动面旋转的角度 以 表示右旋 以 表示左旋 比旋度 t 偏振光透过长1dm且1ml中含有1g旋光物质的溶液 在一定波长与温度下测得的旋光度 t cl 100 中国药典规定使用钠光谱的D线 589 3nm 测定药物在特定溶液中的旋光度 37 五 对光吸收性质的差异 药物和杂质的结构不同 因而对光吸收的性质往往有差异 分光光度法的优点 灵敏度高 简便 仪器已较普及 因此在药物的杂质检查中应用日益广泛 1 紫外分光光度法2 原子吸收分光光度法3 红外分光光度法4 荧光分析法 38 1 紫外分光光度法 当杂质在某一波长处有最大吸收 而药物在此无吸收时 可以通过控制供试品溶液在此波长处的吸收度来控制杂质的量 举例 规定葡萄糖注射液在284nm波长处的吸收度不得过0 32 即可控制其杂质5 羟甲基糠醛的量 头孢噻吩在237nm处规定吸收度范围0 65 0 72 测定值偏大则说明未有效除去噻吩乙酸 测定值偏小则说明产品降解 39 例 肾上腺素中肾上腺酮的检查 40 若药物在紫外区有明显吸收 而杂质吸收很弱或没有吸收 可以根据吸收度大小限制杂质的量 规定供试品吸收度的上下限幅度 可在一定程度上控制产品的纯度 头孢噻吩在237nm处规定吸收范围0 65 0 72 237nm的吸收特征是噻吩乙酰基产生的 测定值偏大则说明未有效除去噻吩乙酸 测定值偏小则说明产品降解 41 3 红外分光光度法 在杂质检查中主要用于药物中无效或低效晶型的检查 甲硝咪唑C晶型在662cm 1处有较强吸收 其无效A晶型在640cm 1处有较强吸收 当供试品中含有A晶型时 在上述二波数处的吸收度比值将发生改变 42 R D1 D2 R D1 D2 43 六 吸附或分配性质的差异 1 薄层色谱法2 纸色谱法3 高效液相色谱法4 气相色谱法简便 快速 灵敏度高 44 1 薄层相色谱法 TLC 设备简单 操作简便 分离速度快 灵敏度和分辩率较高 杂质对照品法 自身对照法 杂质对照品法与自身对照法联用 对照药物法5 灵敏度法 不允许有杂质斑点 45 1 杂质对照品法 适用于已知杂质并能制备杂质对照品的情况 要求供试品与所检杂质对显色剂所显的颜色应相同 显色灵敏度也应相同或相近 方法 根据限量 取供试品溶液和限度量的杂质对照品溶液 分别点样于同一硅胶薄层板上 展开 定位 检查 供试品中所含杂质的斑点 不得超过相应杂质的对照斑点 46 47 2 供试品自身对照法 适用于杂质的结构不能确定 或无杂质对照品的情况 方法 将供试品溶液按限量要求稀释至一定浓度作为对照溶液 与供试品溶液分别点加于同一薄层板上 展开 定位 检查 供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液所显示斑点颜色 48 49 50 4 对照药物法 当无适合的杂质对照品 尤其是供试品显示的杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异 难以判断限量时 可用与供试品相同的药物作为对照品 此对照物中所含待检杂质需符合限量要求 且稳定性好 51 52 此外 少数药物还利用试验条件下显色剂对杂质的检测限来控制其限量 盐酸阿米替林 一定浓度点样于硅胶G薄层板上 以氯仿 甲苯展开 喷甲醛 硫酸显色 紫外灯下检视 除主斑点外 不得显其他斑点 53 54 2 纸色谱法 用于极性较大物质的分离 分析 有时也用于检查放射性药物注射液中的放射化学杂质 方法 类似于薄层色谱法中的供试品自身对照法 55 3 高效液相色谱法分离效能高 专属性强和检测灵敏度高 可准确测量各组分的峰面积 内标法 外标法 不加校正因子的主成分自身对照法 加校正因子的主成分自身对照法 峰面积归一化法 56 1 内标法 内标法测定供试品中某个杂质或主成分含量 先以杂质对照品测定其校正因子 然后测定供试品中杂质的含量 57 58 59 2 外标法 测定供试品中某个杂质或主成分的含量 用于有杂质对照品或杂质对照品易制备的情况 60 61 3 不加校正因子的主成分自身对照法将供试溶液稀释成一定浓度 作为对照液 分别取供试品溶液和对照品溶液进样 将供试品溶液中各杂质峰面积及其总和 与对照液主成分峰面积比较 以控制供试品中杂质的量 特点 1 简单方便 无须对照品 2 适用于杂质与主成分峰面积相差悬殊时的杂质检查3 忽略了各杂质与主成分的响应值可能不同 62 63 4 加校正因子的主成分自身对照法 精密称取杂质对照品和待测成分对照品各适量 配制测定杂质校正因子的溶液 进样 记录色谱图 计算杂质的校正因子 此校正因子可直接载入各品种正文 用于校正杂质的实测峰面积 准确计算杂质含量 64 65 66 67 5 峰面积归一化法 测量各杂质峰的面积和色谱图上除溶剂峰以外的各色谱峰面积 计算各峰面积占总峰面积的百分率 粗略测量供试品中杂质的含量 特点 1 不需对照品 简便易行 2 记录图谱的时间应为主峰保留时间的整数倍 3 通常只能粗略考察供试品的杂质含量 68 69 70 4 气相色谱法 峰面积归一化法 内标法3 外标法 71 二 化学法利用药物和杂质在化学性质上的差异 一 酸碱性的差异 二 氧化还原性的差异 三 杂质与一定试剂反应产生沉淀 四 杂质与一定试剂反应产生颜色 五 杂质与一定试剂反应产生气体 六 药物经有机破坏后检查杂质 72 二 利用药物和杂质在化学性质上的差异 一 酸碱性的差异利用杂质的酸 碱性 规定消耗滴定液的体积 规定PH值范围 指示剂法 二 氧化还原性的差异利用药物与杂质之间的氧化还原电位的差异进行检查 三 杂质与一定试剂反应产生沉淀 73 四 杂质与一定试剂反应产生颜色根据限量要求 规定 一定反应条件下不得产生某种颜色 供试品在相同条件下呈现的颜色不得超过杂质对照品相应颜色 供试品在一定的条件下的吸收度不得过一定值 五 杂质与一定试剂反应产生气体砷 硫 碳酸盐 氨或胺盐 氰化物 74 六 药物经有机破坏后检查杂质含环状结构的有机药物中磷 硫 卤素及硒等杂质 不溶药物等 75 氧瓶燃烧法 Oxygenflaskcombustionmethod 将药物放入充满氧气的密闭的燃烧瓶中燃烧 使待测元素从有机结合状态转变成无机离子 被事先装在瓶内的吸收液吸收 成为稳定的溶液状态 然后采用适当方法进行测定用于含卤素 硫 氮 硒等元素的有机药物的鉴别 检查和含量测定 76 仪器装置 77 操作方法 称样 将样品直接置无灰滤纸上称量 吸收液水 NaOH 含碘 氯药物 例盐酸胺碘酮 甲状腺粉 甲状腺片水 NaOH H2O2 含溴 含硫药物 水 含氟药物 硝酸溶液 含硒药物 燃烧分解操作 通O21 2min 燃烧 78 注意 防爆 燃烧瓶应洗涤干净氧气要充足 燃烧应完全测定含氟药物应用石英燃烧瓶 79 80 81 82 一般杂质的检查 83 第四节 一般杂质的检查方法 一 一般杂质检查规则 药品检验操作标准 规定 1 遵循平行操作原则 84 1 仪器的配对性如纳氏比色管应配对 刻度线高低相差不超过2mm 砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致 2 对照品与供试品的同步操作 85 2 正确的取样及供试品的称量范围 1g不超过 2 1g不超过 1 3 正确的比色 比浊方法 4 检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份 86 1 原理 中国药典对氯化物的检查是利用氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用 生成氯化银白色浑浊液 与一定标准氯化钠溶液在相同的条件下生成的氯化银浑浊液比较 浊度不得更大 Cl AgCl 微量时浑浊 稀HNO3 AgNO3 二 氯化物检查法 87 对照法 88 A 取一定量供试品产生AgCl 浑浊 依法处理 稀HNO3AgNO3 同上处理 B 取一定量标准NaCI液同上 标准NaCI浓度C 0 01mgCI ml 如A浊度比B小则本项合格 89 供试品 稀HNO310ml H2O AgNO31ml 标准溶液 稀HNO310ml H2O AgNO31ml 暗处放置5min 避免AgCl分解 90 二 检查方法药典附录除另有规定外 取各药品项下规定量的供试品 加水溶解使成25ml 溶液如显碱性 可滴加硝酸使成中性 再加稀硝酸10m1 溶液如不澄清 应滤过 置50ml 91 纳氏比色管中 加水使成约40m1 摇匀 即得供试溶液 另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液 置50ml纳氏比色管中 加稀硝酸10m1 加水使成40m1 摇匀 即得对照溶液 92 于供试溶液与对照溶液中 分别加入硝酸银试液1 0m1 用水稀释使成50m1 摇匀 在暗处放置5分钟 同置黑色背景上 从比色管上方向下观察 比较 即得 93 结果观察方法暗处放置5min 避免AgCl分解 94 三 测定条件 1 标准NaCl溶液10 gCl ml 50ml溶液中含50 80 g的Cl 所显浑浊梯度明显 相当于标准NaCl溶液5 8ml 2 反应需在硝酸酸性条件下进行 且以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜 95 A AgCI不溶于HNO3可在HNO3中产生最好的乳化浑浊 B 加速AgCI 的产生 C 防止产生Ag20 Ag3PO4 Ag2CO3 因为这些 溶于HNO3这样就可以防止CO32 OH PO43 干扰 96 3 试剂 硝酸银 5 避光 暗处放置5分钟后比浊 因氯化银见光易分解 4 供试液和对照液稀释后 再加硝酸银溶液 使生成白色浑浊而不是白色沉淀 97 6 比浊方法 同置于黑色背景上 自上向下观察 7 平行操作原则 98 四 干扰及排除 1 若供试品有色 需经处理后方可检查 1 内消色法 倍量法 即先去除被测物 再加入标准溶液 使成对照 这样对照液与供试液颜色相同 2 外消色法 如高锰酸钾中氯化物的检查 可先加乙醇适量 使其还原褪色后再依法检查 99 A 如 有色 取两分等量供试品 a 一份做供试液 A管 依法检查b 另一份AgCI 滤液 B管加入规定量的标准NaCI溶液作为对照管 加稀HNO3 过滤 B 用滤纸过滤时 滤纸中如含有氯化物 可预先用含有硝酸的水溶液洗净后使用 AgNO3 100 2 当有其它干扰物质存在时 必需在检查前除去 1 碘中氯化物的检查 2 碘化物中氯化物的检查 3 溴化物中氯化物的检查 101 3 不溶于水的有机药物 1 加水振摇 过滤 取滤液进行检查 2 加热 放冷 过滤 取滤液进行检查 3 溶于有机溶剂如稀乙醇 丙酮 可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查 102 4 有机药物中有机氯杂质的检查 具体情况 具体分析 方法 必须使结状态的氯变为游离状态的氯 有机破坏的方法 103 药物中氯化物杂质检查 是使该杂质在酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物浑浊 所用的稀酸是 A 硫酸B 硝酸C 盐酸D 醋酸E 磷酸 104 例1 中国药典 2000年版 规定 检查氯化物杂质时 一般取用标准氯化钠溶液 10 gCl ml 5 8ml的原因是 A 使检查反应完全B 药物中含氯化物的量均在此范围C 加速反应D 所产生的浊度梯度明显E 避免干扰 105 例2 采用硝酸银试液检查氯化物时 加入硝酸使溶液酸化的目的是 A 加速生成氯化银浑浊反应B 消除某些弱酸盐的干扰C 消除碳酸盐干扰D 消除磷酸盐干扰E 避免氧化银沉淀生成 106 例3 当采用比浊法检查氯化物杂质时 若药物本身有颜色而干扰检查的话 应该选用的处理方法为 A 内消色法B 外消色法C 比色法D 差示比浊法E 差示可见分光法 107 例4 若要进行高锰酸钾中氯化物的检查 最佳方法是 A 加入一定量氯仿提取后测定B 氧瓶燃烧C 倍量法D 加入一定量乙醇E 以上都不对 108 例5 下列哪些条件为药物中氯化物检查的必要条件 A 所用比色管需配套B 稀硝酸酸性下 10ml 50ml C 避光放置5分钟D 用硝酸银标准溶液做对照E 在白色背景下观察 109 三 硫酸盐检查法 一 原理对照法药物中存在的微量硫酸盐与氯化钡在盐酸酸性介质中生成硫酸钡白色浑浊 与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件生成的浑浊比较 浊度不得更大 110 二 测定条件 1 标准K2SO4溶液0 1mg ml 50ml溶液中含0 1 0 5mg的所显浑浊梯度明显 相当于标准K2SO4溶液1 5ml 2 反应需在盐酸酸性条件下进行 且以50ml供试溶液中含稀盐酸2ml为宜 111 3 试剂 氯化钡 5 比浊方法 同置于黑色背景上 自上向下观察 4 供试液和对照液稀释后 再加氯化钡溶液 使生成白色浑浊而不是白色沉淀 112 若供试品有色 也可用内消色法即倍量法处理 三 干扰及排除 113 例 药物中硫酸盐检查时 所用的标准对照液是 A 标准氯化钡B 标准醋酸铅溶液C 标准硝酸银溶液D 标准硫酸钾溶液E 以上都不对 114 三 铁盐检查法 1 原理对照法 一 硫氰酸盐法ChP 2000 USP 24 铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子 再与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈的颜色比较 颜色不得更深 115 116 117 2 检查方法药典附录除另有规定外 取各药品项下规定量的供试品 加水溶解使成25ml 移置50ml纳氏比色管中 加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg 用水稀释使成 118 35m1后 加30 硫氰酸铵溶液3ml 再加水适量稀释成50ml 摇匀 如显色 立即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液 取各药品项下规定量的标准铁溶液 置50ml纳氏比色管中 119 加水使成25ml 加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg 用水稀释使成35m1后 加30 硫氰酸铵溶液3ml 再加水适量稀释成50ml 摇匀 比较 即得 120 3 测定条件 1 用FeNH4 SO4 2 12H2O 硫酸铁铵 配制标准铁贮备液 加入硫酸防止Fe3 的水解 标准铁溶液临用前稀释而成 标准铁溶液10 gFe3 ml 50ml溶液中含10 50 g的Fe3 显色梯度明显 一般取标准铁溶液1 0 5 0ml 121 2 反应需在盐酸酸性条件下进行 且以50ml供试溶液中含稀盐酸4ml为宜 3 试剂 硫氰酸铵 加过量硫氰酸铵 使反应向正反应方向进行 4 检查Fe2 和Fe3 122 5 铁盐检查时 加氧化剂氧化Fe2 为Fe3 加过硫酸铵可氧化Fe2 为Fe3 同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色 加硝酸后加热也可氧化Fe2 为Fe3 123 6 比色方法 同置于白色背景上 自上向下观察 124 4 干扰及排除 1 为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时 可用正丁醇提取后 分取正丁醇层比色 2 具环状结构的有机药物 需经700 800 炽灼破坏处理后再依法检查 3 干扰离子的影响 阴离子 125 二 巯基醋酸法BP 1998 原理硫氰醋酸还原Fe3 为Fe2 在氨碱性溶液中进一步与Fe2 作用生成红色配位离子 与一定量标准铁溶液经同法处理后产生的颜色进行比较 以限制铁的量 126 对照法 本法灵敏度较高 但试剂较贵 127 例1 中国药典 2000年版 规定铁盐的检查方法为 A A 硫氰酸盐法B 巯基醋酸法C 普鲁士蓝法D邻二氮菲法E 水杨酸显色法 128 例2 中国药典 2000年版 规定 硫氰酸铵法检查铁盐时 加入过硫酸按的目的是 AB A 使药物中铁盐都转变为Fe3 B 防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色C 使产生的红色产物颜色更深D 防止干扰E 便于观察 比较 129 例3 某药物 黄色 欲进行铁盐检查 应采用下面哪种方法 E A 倍量法B 微孔滤膜过滤法C 调色法D 600 700 炽灼残渣后测定E 以上都不对 130 例4 中国药典收载的铁盐检查 主要是检查 D A FeB Fe2 C Fe3 D Fe2 和Fe3 E 以上都不对 131 四 重金属检查法以铅为代表 中国药典 2000年版 共收载四法 重金属 在实验条件下能与硫代乙酰胺或者硫化钠作用显色的金属杂质 银 铅 汞 铜 镉 铋 锑 锡 砷 镍 钴 锌等等 132 一 第一法硫代乙酰胺法 原理硫代乙酰胺在弱酸性 pH3 5醋酸盐缓冲液 条件下水解 产生硫化氢 与微量重金属离子生成黄色到棕黑色的硫化物均匀混悬液 与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈现颜色比较 颜色不得更深 133 对照法 适用于溶于水 稀酸和乙醇的药物 134 2 测定条件 1 用硝酸铅配制标准铅贮备液 加硝酸防止Pb2 水解 标准铅溶液临用前稀释而成 标准硝酸铅溶液10 gPb2 ml 适宜比色范围为27ml溶液中含10 20 g的Pb2 135 2 本法用2mlpH3 5的醋酸盐缓冲液控制溶液pH值为3 3 5 3 显色剂 从ChP 1990 开始改用硫代乙酰胺做显色剂 136 1 供试品如有色 需经处理后方可检查 A 外消色法 在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液 B 内消色法 C 改用第四法 微孔滤膜过滤法 3 干扰及排除 137 2 若供试品中有微量Fe3 存在 会氧化硫化氢生成单质硫 干扰比色 加入抗坏血酸或盐酸羟胺 0 5 1 0g 还原Fe3 为Fe2 可消除干扰 138 二 第二法炽灼残渣法 适用于含芳环 杂环以及不溶于水 稀酸 乙醇及碱的有机药物 500 600 炽灼后的残渣 经处理后 依一法检查 1 原理对照法 139 2 操作方法 140 含钠及氟的有机药物应用铂坩埚 石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿 因可腐蚀瓷坩埚 带入大量重金属 141 三 第三法硫化钠法 适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物 如磺胺类 巴比妥类 1 原理对照法 142 2 测定条件 1 NaOH碱性条件下 2 显色剂 硫化钠 143 四 第四法微孔滤膜法 适用于含2 5 g重金属杂质及有色供试液的检查 依一法检查 结果微孔滤膜过滤后比较色斑 同第一法使重金属生成的硫化物富集于微孔滤膜上 铅斑 提高检查的灵敏度 144 145 重金属检查中 加入硫代乙酰胺时溶液控制最佳的pH值是 A 1 5B 3 5C 7 5D 9 5E 11 5 146 微孔滤膜法是用来检查 A 氯化物B 砷盐C 重金属D 硫化物E 氰化物 147 例1 中国药典 2010年版 重金属检查法中 所使用的显色剂是 A 硫化氢试液B 硫代乙酰胺试液C 硫化钠试液D 氰化钾试液E 硫氰酸铵试液 148 例2 葡萄糖中进行重金属检查时 适宜的条件是 A 用硫代乙酰胺为标准对照液B 用10ml稀硝酸 50ml酸化C 在pH3 5醋酸盐缓冲溶液中D 用硫化钠为试液E 结果需在黑色背景下观察 149 五 砷盐检查法 一 古蔡法ChP 2000 BP 1998 金属锌与酸作用产生新生态的氢与药物中微量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢 遇溴化汞试纸产生黄色至棕色的砷斑 与同条件下一定量标准砷溶液所生成的砷斑比较 判断砷盐的量 标准砷溶液2ml 1 g ml 1 原理对照法 150 遇HgBr2试纸生成黄色 棕色的砷斑 与2ml标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较 151 反应式如下 152 2 操作方法 1 标准砷斑用2ml标准砷溶液制备 2 供试品需经有机破坏 则标准砷溶液应平行操作 153 古蔡氏法检砷器 8cm 有孔玻璃旋塞 导气管 AsH3发生瓶 溴化汞试纸 醋酸铅棉花 60mg HClZn粒碘化钾试液酸性氯化亚锡试液 生成砷斑 吸收硫化氢气体 154 加锌粒2g 立即将装妥的导气管B密塞与A瓶 置25 40 水浴中 反应45分钟 取出溴化汞试纸 比较砷斑 导气管B中装入醋酸铅棉球 再于旋塞C的平面上放两片溴化汞试纸 样品 对照品分别置于检砷瓶中 加盐酸5ml与水21ml 再加2 5 碘化钾试液5ml与0 3 酸性氯化亚锡试液5滴 在室温放置10分钟 2操作 155 1 试剂的作用 a KI的作用 还原剂 As5 As3 五价砷生成AsH3的反应速度比三价砷速度慢 加入KI使五价砷还原为三价砷后再与活泼氢反应 以增大AsH3的生成速度 3 讨论 156 还原剂 表现在2方面 将五价砷还原为三价砷 As5 As3 b 酸性SnCl2的作用 157 进而促进AsH3不断生成 稳定的络离子 将KI被氧化生成的I2再还原为I 158 c PbAc2棉花的作用 排除硫化物的干扰 1mgS2 159 2 古蔡氏法特点 对含锑药物中砷盐的检查不能用古蔡氏法 需用白田道夫法 白田道夫法 160 二 二乙基二硫代氨基甲酸银法 Ag DDC法 silverdiethyldithiocarbamate 本法不仅用于砷盐的限量检查 而且可用作微量砷盐的含量测定 161 1 原理 162 用有机碱吸收反应产生的HDDC有利于反应的进行 USP 24 用吡啶 ChP 2000 用三乙胺 本法适用于含Sb量小于500 g的供试品 163 2 Ag DDC法的特点 a灵敏度高0 5 gAs 30mlb可仪器测定 还可定量1 g 10 g 40mlcSb干扰小 500 g锑不干扰 164 在药物的杂质检查中 其限量一般不超过百万分之十的是 A 氯化物B 硫酸盐C 醋酸盐D 砷盐E 淀粉 165 在用古蔡法检查砷盐时 导气管中塞入醋酸铅棉花的目的是 A 除去I2B 除去AsH3C 除去H2SD 除去HBrE 除去SbH3 166 砷盐检查法中 在检砷装置导气管中塞入醋酸铅棉花的作用是 A 吸收砷化氢B 吸收溴化氢C 吸收硫化氢D 吸收氯化氢E 吸收锑化氢 167 古蔡氏法中 SnC12的作用有 A 使As5 As3 B 除去H2SC 除去I2D 组成锌锡齐E 除去其它杂质 168 Ag DDC法检查砷盐的原理为 砷化氢与Ag DDC吡啶作用 生成的物质是 A 砷斑B 锑斑C 胶态砷D 三氧化二砷E 胶态银 169 中国药典 1995年版 收载的古蔡法检查砷盐的基本原理是 A 与锌 酸作用生成H2S气体B 与锌 酸作用生成AsH3气体C 产生的气体遇氯化汞试纸产生砷斑D 比较供试品砷斑与标准品砷斑的面积大小E 比较供试品砷斑与标准品砷斑的颜色强度 170 例8 葡萄糖中砷盐的检查 需要的试剂应有 A Pb2 标准液B SnCl2试液C KI试液D ZnE 醋酸铅棉花 171 例9 Ag DDC法检查砷盐时 加入碘化钾和酸性氯化亚锡的作用为 A 将As5 还原为As3 B 有利于AsH3生成反应C 抑制SbH3的生成D 形成Zn Sn齐以均匀而连续地发生氢气E 催化加速生成AsH3 172 例10 古蔡氏法检砷 药典规定制备标准砷斑时 应取标准砷溶液 A 1mlB 5mlC 2mlD 依限量大小决定E 以上都不对 173 例11 古蔡氏法检查所用的溶液是 A 强碱性溶液B 强酸性溶液C 含稀盐酸10ml 50ml溶液D 含稀硝酸10ml 50ml溶液E 含强氧化剂 硝酸或过硫酸铵 溶液 174 96 96 100 所含待测杂质的适宜检测量为A 0 002mgB 0 01 0 02mgC 0 01 0 05mgD 0 05 0 08mgE 0 1 0 5mg96 96 硫酸盐检查法中 50ml溶液中 E 96 97 铁盐检查法中 50ml溶液中 C 96 98 重金属检查法中 35ml溶液中 B 96 99 古蔡氏法中 反应液中 A 96 100 氯化物检查法中 50ml溶液中 D 175 97 106 110 A 硝酸银试液B 氯化钡试液C 硫代乙酰胺试液D 硫化钠试液E 硫氰酸盐试液97 106 药物中铁盐检查 E 97 107 磺胺嘧啶中重金属检查 D 97 108 药物中硫酸盐检查 B 97 109 葡萄糖中重金属检查 C 97 110 药物中氯化物检查 A 176 例 1 5 杂质检查中所用的酸是A 稀硝酸B 稀盐酸C 硝酸D 盐酸E 醋酸盐缓冲液1 氯化物检查法 A 2 硫酸盐检查法 B 3 铁盐检查法 B 4 重金属检查法 E 5 砷盐检查法 D 177 目的 检查药物中酸碱性杂质适用对象 1 在工艺中使用过酸或碱处理的药物 2 对酸碱不稳定的药物 酯类 酰胺类 标准中表述 酸度 pH低于7 0 碱度 pH高于7 0 酸碱度 pH7 0两侧pH值 六 酸碱度检查法 178 检查方法 1 酸碱滴定法 用消耗滴定液的体积来控制酸碱性杂质量 2 指示剂法 3 pH值法 179 更精确的pH测试仪器 180 携带非常方便的笔式pH计 181 七 溶液澄清度检查法 检查药物中的微量不溶性杂质 用作注射剂的原料药一般应作此项检查 1 检查方法对照法 182 2 浊度标准液的配制 中国药典规定用浊度标准液作为澄清度检查的标准 反应原理 乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛 甲醛与肼缩合生成甲醛腙 不溶于水 形成白色浑浊 183 1 00 硫酸肼溶液与10 乌洛托品溶液等量混合配制浊度标准贮备液浊度标准原液浊度标准液 5个级号 184 3 判断药典中规定的 澄清 系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂 或未超过0 5号浊度标准液 4 溶剂 水 酸 碱 有机溶剂有机酸的碱金属盐类药物强调用 新沸过的冷水 185 检查方法 Ch P 室温供试品溶液等量分别置于配对的比浊用玻璃管中浊度标准液暗室内垂直同置于伞棚灯下照度1000lx水平方向观察 比较检查 186 浊度标准液 硫酸肼 乌洛托品 水 甲醛腙 浊度标准液 贮备液 原液 比浊用液 187 九 溶液颜色检查法 控制药物中有色杂质限量的方法 ChP 2010 采用三种方法检查 第一法目视比色法即与标准比色液比较的方法 全波长范围定性观察 188 第一法 目视比色法 黄绿色黄色橙黄色橙红色棕红色 比色用重铬酸钾液 比色用硫酸铜液 比色用氯化钴液 水 189 观察方法 190 标准比色液的配制 191 第二法分光光度法单一波长定量 第三法色差计法全波长范围定量 本法是通过色差计直接测定溶液的透视三刺激值 对其颜色进行定量表述和分析的方法 测色仪器一般为光电积分型色差计 192 色差值 标准液 供试液 水 第三法 色差计法 原理 193 十 易炭化物检查法 检查药物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量有机杂质 方法 H2SO4炭化后与对照液比较 194 对照液 1 溶液颜色检查 项下的标准比色液 2 由比色用氯化钴液 比色用重铬酸钾液 比色用硫酸铜液按规定方法配成的对照液 195 比色 同置白色背景前 平视观察比较 3 高锰酸钾液 196 检查不含金属的有机药物或挥发性无机药物中混入的无机杂质 金属氧化物或无机盐类 1 原理样品炭化后 H2SO4湿润 700 800 炽灼至恒重 炽灼残渣 硫酸灰分 限量一般为0 1 0 2 十 炽灼残渣检查法 197 2 操作方法 198 3 注意事项 1 供试品的取样量应根据炽灼残渣限量和称量误差决定 199 3 若残渣需留作重金属检查 则500 600 炽灼至恒重 2 含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀 应采用铂坩埚 4 加硫酸处理是使杂质转化为稳定的硫酸盐 并帮助有机物炭化 200 例1 炽灼残渣检查法一般加热恒重的温度为 C A 500 600 B 600 700 C 700 800 D 800 1000 E 1000 1200 201 例2 炽灼残渣检查后 将残渣留作重金属检查时 炽灼温度应为 A A 500 600 B 600 700 C 700 800 D 800 1000 E 1000 1200 202 例3 炽灼残渣的限量一般为 E A 1 B 0 5 1 C 0 4 0 5 D 0 2 0 3 E 0 1 0 2 203 例4 炽灼残渣检查时 炭化后经硫酸处理后灰化至完全的称为 C A 灰分B 残渣C 硫酸灰分D 炽灼灰分E 残余灰分 204 九 干燥失重测定法 干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量 主要是水分 也包括其它挥发性物质 测定方法 205 一 常压恒温干燥法 适用于受热较稳定的药物 干燥温度一般为105 干燥失重 第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1h后进行 206 炽灼残渣 第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续炽灼 5h后进行 二 干燥剂干燥法 适用于受热易分解或挥发的供试品 干燥剂 硅胶 浓硫酸 P2O5 207 208 三 减压干燥法 适用于熔点低 受热不稳定或水分难赶除的药物 除另有规定外 压力应在2 67kPa 20mmHg 以下 209 210 211 例 1 5 A 干燥失重测定法B 炽灼残渣检查C 两者皆是D 两者皆不是1 有机物杂质检测法 D 2 不溶物的测定法 D 3 杂质检查法 C 4 有机药物中不挥发无机物的检测法 B 5 药物中挥发性物质的检测法 A 212 例6 干燥失重测定的方法有 BCDE A 炽灼 500 600 法B 常压恒温干澡法C 减压干燥法D 干燥剂干燥法E 减压干燥剂干燥法 213 例7 干燥失重测定中应注意哪几个方面 ABCD A 供试品平铺在称量瓶中的厚度一般不超过5mmB 干燥温度一般为105 C 可用干燥剂干燥D 主要指水分和挥发性物质E 测定时间不超过3小时 214 十 水分失重测定法中国药典2000版收载的方法有费休法和甲苯法 215 216 217 指示终点方法 目视法Fisher试液颜色淡黄色 红棕色 永停法 218 第五节特殊杂质检查及安全性检查 一 异常毒性检查法原理系将一定剂量的供试品溶液注入小鼠体内或口服给药 在规定时间内观察小鼠死亡情况 以判定供试品是否符合规定 方法给药途径 219 二 热原检查法热原细菌产生的一种内毒素 轻者出现发烧 恶心 呕吐 腹泻等 重者坑内休克 死亡 兔温法 原理系将一定剂量的供试品溶液 静脉注入家兔体内 在规定时间内观察家兔体温升高的情况 以判定供试品是否符合限度规定 方法 220 三 升压物质检查法原理系比较神经垂体标准品与供试品升高大鼠血压的程度 以判定供试品中所升压物质的限度是否符合规定 方法 221 四 降压物质检查法原理系比较组胺对照品与供试品引起麻醉猫或者狗血压下降的程度 以判定供试品中所含降压物质的限度是否符合规定 方法 222 四 致敏物质检查法原理系比较组胺对照品与供试品引起麻醉猫或者狗血压下降的程度 以判定供试品中所含降压物质的限度是否符合规定 方法 223