肠杆菌科2018ppt演示课件

2001-02,1,本章小结,葡萄球菌,化脓性球菌,G+,金黄 表葡（白）腐生葡（柠檬）,SPA 凝固酶 葡萄球菌溶血素 杀白细胞素 肠毒素 表皮剥脱毒素 毒性休克综合征毒素,局部/全身性感染：化脓 中毒 烫伤样皮肤综合征 毒性休克综合征 菌群失调,甘露醇 凝固酶,.,2001-02,2,链球菌,三种（溶血）,脂磷壁酸 M蛋白,红疹毒素 溶素：SLO, SLS 酶：透明质酸酶，链激酶，链道酶,脓 中毒性疾病：猩红热 超敏 其它,ASO（抗O),.,2001-02,3,肺炎链球菌,不完全溶血，胆汁溶菌（+） 大叶肺炎,脑膜炎双球菌、淋球菌 G- 脑膜炎、淋病,.,肠杆菌科,4,.,肠杆菌科中与医学有关的常见菌族和菌属,埃希菌族 埃希菌属 大肠杆菌志贺菌属 痢疾志贺菌 爱德华菌族 爱德华菌属 迟钝爱德华菌 沙门菌族 沙门菌属 伤寒沙门菌枸橼酸菌属 佛劳第枸橼酸菌 克雷伯菌族 克雷伯菌属 肺炎克氏菌肠杆菌属 产气肠杆菌哈夫尼亚菌属 蜂窝哈夫尼亚菌沙雷菌属 粘质沙雷菌 变形杆菌族 变形杆菌属 普通变形杆菌摩根菌属 摩氏摩根菌属普罗威登斯菌属 雷氏普罗威登斯菌 耶尔森菌族 耶尔森菌属 鼠疫耶尔菌 欧文菌族 欧文菌属 草原居民欧文菌,菌族 菌属（菌种数） 代表种,5,.,致病性大肠杆菌的种类及致病机理 伤寒沙门菌的主要致病因素及伤寒发病过程。 何谓肥达反应？如何观察分析肥达反应结果？,本 章 要 点,6,.,肠杆菌科概述,一、概念是一大群寄居于人类和动物肠道中的生物学性状相近的革兰阴性杆菌。多为正常菌群埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属,7,.,二、肠道杆菌的共同特征：,大肠杆菌1000,大多有菌毛、鞭毛 无芽胞,1.形态与结构相似 G-杆菌,（染色镜检无意义）,8,.,2. 培养特性营养要求不高,3. 生化反应 十分活泼，是鉴定肠道菌的重要依据。,致病菌不分解乳糖,9,.,4. 抗原构造复杂肠道杆菌抗原构造十分复杂,10,.,菌体抗原“0”抗原 细菌细胞壁中脂多糖LPS，为群特异性抗原。 具有“0”抗原 细菌菌落呈光滑型(S);丢失多糖侧链的细菌菌落呈粗糙型(R). R型菌的致病性明显降低.,11,.,核心多糖,12,.,鞭毛抗原“H”抗原荚膜抗原 位于 0 抗原 外侧,常可阻遏 0 抗原与相应抗体的结合.如大肠杆菌中K抗原伤寒杆菌中的Vi抗原。,13,.,5、抵抗力,6、较易发生变异性,溶源性转换,生化反应性变异,通过,引起,耐药性变异,毒力性变异,转导,接合,不强，加热60经30分钟即死亡。胆盐、煌绿等对大肠杆菌等非致病菌有选择性作用，可制备肠道杆菌选择性培养基以分离肠道致病菌,14,.,第一节 埃希菌,埃希菌属(Escherichia)包括5个种，众多型别。 大肠埃希菌（大肠杆菌, E.coli ）一般为肠道内正常菌群，少数血清型有致病性（致病性大肠杆菌）,15,.,一、生物学性状,形态与染色,大肠埃希菌 1000,革兰阴性,短杆状,不规则排列,16,.,生化反应 发酵多种糖类，产酸产气 最重要的生化反应：乳糖发酵试验,肠道菌鉴定中常利用乳糖发酵试验作为区别大肠埃希菌与肠道致病菌的主要指标,17,.,其它生化反应 IMViC 试验 （与产气杆菌区别）,IMViC试验结果,吲哚试验（I） + ,大肠杆菌 产气杆菌,甲基红试验（M） + ,VP试验（Vi） +,枸橼酸利用（C） +,IMViC + + + +,18,.,抗原性 抗原结构: O抗原H抗原 K抗原 鉴定后大肠杆菌血清型命名法：O：K：H 如 O157：K58（B1）：H7,19,.,二、 致病性,致病物质,1、定植因子（colonization factor)现认为为菌体表面结构（菌毛）,20,.,2、肠毒素 二种,不耐热肠毒素 LT 加热6530分钟失活,耐热肠毒素 ST 加热100分钟不失活,21,.,肠毒素作用机制,22,.,LT化学结构与致病机理 大肠杆菌LT与霍乱弧菌肠毒素有80%同源性,受体GM1,细胞膜,腺苷环化酶,ATP,cAMP,H2O CI- Na+大量分泌,腹泻,腹泻,腹泻,23,.,ST 组成及作用机理 ST与霍乱弧菌肠毒素间无同源性,毒性中心,鸟苷酸环化酶,cGMP,腹泻,腹泻,腹泻,水电解质平衡率乱,24,.,其他内毒素作用：胞壁脂多糖的类脂A具有毒性，O特异多糖有抵抗宿主防御屏障的作用。K抗原有抗吞噬作用,25,.,所致疾病,1.肠道处感染：,败血症 新生儿脑膜炎 泌尿道感染,2.肠道感染（急性腹泻）：,肠产毒性大肠埃希菌ETEC 肠侵袭性大肠埃希菌EIEC 肠致病性大肠埃希菌EPEC 肠出血性大肠埃希菌EHEC 肠集聚性大肠埃希菌EAEC,26,.,致病性大肠杆菌的致腹泻机理, 肠产毒性大肠埃希菌enterotoxigenic E.coli; ETEC 临床表现- 旅游者腹泻、婴幼儿腹泻致病机理-定居因子、肠毒素,27,., 肠侵袭性大肠埃希菌 enteroinvasive E.coli, EIEC 临床疾病-痢疾样腹泻主要侵犯较大儿童与成人脓血便、里急后重 主要致病因素-破坏结肠粘膜上皮细胞 侵犯部位-结肠,28,., 肠致病性大肠埃希菌enteropathogenic E.cole; EPEC 所致疾病- 婴儿腹泻（严重者可致死） 致病因素- 菌毛粘附（小肠） 刷状缘破坏、 绒毛萎缩 上皮细胞功能受损 腹泻,29,., 肠出血性大肠埃希菌enterohemorrhagic E.coli; EHEC 主要疾病- 出血性结肠炎 剧烈腹痛及血便常可造成流行 致病因子- 菌毛志贺样毒素 主要O血清型- O157：H7,30,., 肠集聚型大肠埃希菌enteroaggregativeE.coli; EAEC 主要疾病-引起婴儿持续性腹泻 致病因子- 集聚粘附上皮细胞-“砖状”排列，阻止液体吸收,31,.,三、微生物学检查, 肠道菌分离鉴定步骤,标本,肠道鉴别选择培养基 （SS）,注,肠道鉴别选择培养基成分 基础培养基 乳糖+指示剂 抑制杂菌生长、 有利于肠道致病菌生长的药物,细菌分离,32,.,挑选可疑菌落进行下一步生化反应鉴定,SS培养基,发酵乳糖菌落,不发酵乳糖菌落,肠道致病菌,33,.,未接种管,大肠杆菌 生长管,葡萄糖 + 乳糖 + 动力 + H2S , 生化反应,34,., 血清学鉴定 如疑为致病性大肠杆菌需作血清学鉴定。,已知分型Ab,分离菌,直接法玻片凝集试验,+,35,.,在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的检测指标, 3个大肠菌群/1L饮水 100个细菌总数/1ml饮水,卫生学指标,大肠菌群指数,每1000ml水中大肠菌群数,我国的卫生标准：,细菌总数,每1ml或1g样品中细菌总数,大肠菌群：指在37，24小时内发酵乳糖产酸产气需氧和兼性厌氧的肠道杆菌，包括埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属及肠杆菌属等。,36,.,第二节 志贺菌属,志贺菌属（Shigella) 通称痢疾杆菌（dysentery bacteria) 引起疾病 细菌性痢疾,37,.,一、 生物学性状,形态染色 - 同大肠杆菌无鞭毛 生化反应 - 葡萄糖 + （产酸不产气）乳 糖 （宋内氏迟缓发酵）,动力 ,动力,动力+,38,.,一、 生物学性状,分类,A群：痢疾志贺菌 B群：福氏志贺菌 C群：鲍氏志贺菌 D群：宋内志贺菌,各类中又分为不同型、亚型,我国以福氏、宋内氏流行多见,39,.,二、致病性,致病物质主要致病物质为菌毛侵袭力、内毒素，少数菌株产生外毒素。 1、侵袭力-,菌毛,粘附并穿入回肠未端、 结肠粘膜上皮细胞,粘膜固有层上皮细胞增殖、炎症,菌毛粘附及穿入 是致病的首要 因素！,40,.,志贺菌侵袭肠粘膜上皮细胞过程 1：侵入M细胞；2：诱导吞噬；34：逃逸；57：从粘膜上皮细胞基底部侵入胞浆中并增殖；810：侵入邻近粘膜上皮细胞胞浆中，并生长繁殖。,41,.,2、内毒素 志贺菌仅在肠道内增殖，一般不侵入血流 各菌株均可产生强烈内毒素，引起典型痢疾症状,内毒素,全身表现：内毒素血症、 发烧、神志障碍、 严重者中毒性休克,破坏局部粘膜，加重坏死及溃疡形成 刺激肠壁植物神经-肠功能紊乱,典型痢疾症状 脓血粘液便、腹痛、 里急后重等,内毒素是志贺菌致病的主要因素,内毒素是志贺菌致病的主要因素,内毒素是志贺菌致病的主要因素,内毒素是志贺菌致病的主要因素！,42,.,3、外毒素A群志贺菌I型和II型产生，称志贺毒素 机制：,与EHEC类似,43,.,所致疾病 细菌性痢疾 -夏秋季节肠道传染病 传染病流行三环节 传染源- 病人、带菌者（尤为重要！） 传播途径- 粪口途径 易感者- 人类普遍易感,且敏感性较高，少 量菌体即可致病,44,.,病程表现： 急性菌痢 症状典型，预后较好。 慢性菌痢 治疗不彻底者易转成慢性（病程2个月以上），症状不典型，慢性带菌者是重要传染源。 中毒性菌痢 小儿多见，可无消化道症状，表现为中毒性休克，死亡率高。,45,.,三、微生物学检查,标本采取注意事项 脓血粘液部分，及时送检, 细菌分离培养与鉴定1. SS, 快速诊断-免疫标记技术（荧光、协同凝集试验）,46,.,挑选可疑菌落进行下一步生化反应鉴定,SS培养基,发酵乳糖菌落,大肠杆菌,不发酵乳糖菌落,肠道致病菌,47,.,第三节 沙门菌,沙门菌属 Salmonella沙门菌属为一大群寄生于人、动物肠道中，生 化反应和抗原构造相似的革兰阴性杆菌。 主要致病菌-伤寒杆菌、副伤寒甲、乙杆菌引起伤寒病,48,.,一、 生物学性状,一、形态与染色 同其它肠道杆菌 有鞭毛 动力+,沙门菌 1000,二、生化反应 不发酵乳糖,49,.,三、抗原结构1、沙门菌“O”抗原- 菌体抗原2、沙门菌“H”抗原- 鞭毛抗原3、沙门菌“Vi”抗原- 表面抗原,50,.,伤寒、副伤寒甲、副伤寒乙沙门菌 O抗原中均有共同组分12，因此为共同抗原。 O抗原化学本质为细胞壁中脂多糖,产生早、消退早-早期诊断,共同抗原刺激产生-无特异性,O抗原刺激机体产生抗体- IgM（特点）,51,.,2、沙门菌“H”抗原- 不耐热鞭毛抗原H抗原分为第 1 相、第 2 相特异性抗原。,52,.,出现较晚，维持时间较长,特 异 性 强,易受非特异性刺激产生回忆反应,H抗原刺激机体产生抗体-IgG（特点）,53,.,3、沙门菌“Vi”抗原- 表面抗原Vi抗原可刺激机体产生低效价抗体，随细菌清除，此抗体消失，故测定Vi抗体有利于检出带菌者。,54,.,二、致病性,1、侵袭力 沙门菌侵袭力较强，经口感染 穿过小肠粘膜上皮细胞 上皮下淋巴组织 被吞噬 具抗吞噬作用，可在吞噬细胞内增殖（不完全吞噬）,致病物质,55,.,目前证明-沙门菌侵袭细胞的能力与染色体中某些基因位点有关沙门菌侵入细胞及在细胞内存活对细菌的全身扩散及局部炎症形成均十分重要 Vi抗原存在于O抗原表面，可保护O抗原免受相应抗体及体内其它免疫因素作用，是伤寒沙门菌重要侵袭力,56,.,2、内毒素 导致体温升高、白细胞数变化等,3、肠毒素 个别沙门菌,57,.,由伤寒沙门菌，副伤寒甲、乙等沙门菌引起。 肠道传染病,所致疾病,1、肠热症,58,.,血流（菌血症、内毒素）,全身淋巴组织中大量增殖 （肝、脾、肠系膜）,伤寒、 副伤寒沙门菌,肠粘膜局部淋巴组织中增殖,局部炎症、症状,加重局部炎症 溃疡、穿孔,全身症状 发热、不适、全身疼痛,加重局部炎症 溃疡、穿孔,加重局部炎症 溃疡、穿孔,高热、缓脉、肝脾肿大、 中毒症状、玫瑰疹,59,.,临床表现： 消化道症状-肠粘膜局部炎症、水肿 全身表现- 中毒症状（持续性高热、相对缓脉、肝脾肿大、皮疹） 由内毒素血症、二次菌血症引起 肝、胆损伤-细菌在组织中繁殖后，经胆囊进入肠道 迟发性变态反应 加重肠道病变（严重者致坏死、溃疡、肠穿孔）,60,.,整个病期约一个月左右,少数患者病后带菌（肠道内、胆囊带菌）成为重要的传染源,感染后体内有抗体产生，但对胞内菌无免疫作用，常用抗体测定作为伤寒病的辅助诊断肥达反应。,细胞免疫逐渐增强， 细胞内细菌被清除,逐步痊愈,病后免疫以细胞免疫为主，终身免疫,61,.,2、胃肠炎（食物中毒）,多见小儿及免疫功能低下者,3、败血症,4、无症状带菌者,62,.,伤寒玛丽,63,.,三、微生物学检查,标本 伤寒病人按病程不同取不同标本,第一周 血,第二周 尿、粪便,病程全程 骨髓,食物中毒者取排泄物、呕吐物、可疑食物,败血症患者取血液,细菌的分离鉴定,64,.,细菌分离鉴定步骤,粪便、尿,增菌培养,SS,挑取不发酵 乳糖菌落,血清学鉴定：直接玻片凝集,伤寒杆菌表现 葡萄糖 + 乳糖 动力 + H2S +/,双糖管,65,.,用已知的伤寒杆菌“O” 、“H”抗原及副伤寒甲、乙的“H”抗原与不同稀释度的病人血清作试管凝集试验。根据血清中抗体效价及动态变化，可作为伤寒、副伤寒病人的辅助诊断试验。,血清学试验 肥达反应（Widal test),概念,66,.,1:2560,O抗原,伤寒H抗原,副甲H抗原,副乙H抗原,67,.,+ + ,68,.,1、正常效价 O抗体 1：80H抗体 1：160 2、病程中动态观察二份血清，第二次效价增长四倍以上有意义,分析肥达反应结果,69,., O、H均增高伤寒、副伤寒可能性大 O、H均不增高伤寒、副伤寒可能性小 O增高、H不增高感染早期、其它沙门菌感染O不增高、H增高预防接种后、非特异性回忆反应4、抗体始终不升高的可能因素早期使用抗生素、免疫功能低下等,70,.,伤寒病人微生物检查阳性率,系列1-尿液中细菌培养；系列2-血液中细菌培养； 系列3-粪便中细菌培养；系列4-肥达反应抗体效价,阳 性 率,病程：发 病 后 周 次,71,.,细菌培养（按前面步骤进行） Vi抗体效价测定 Vi抗体 1：10 有意义。,四、防治原则, 预防接种：, 彻底治疗病人及带菌者, 注意饮食卫生，防止病从口入,伤寒带菌者检查,72,.,变形杆菌属（简述）,变形杆菌属肠杆菌科 有周身鞭毛，运动活泼，培养基中迁徒生长,变形杆菌的迁徒生长现象,73,.,变形杆菌某些菌株的菌体抗原，与部分立克次体间有共同抗原成分。因此可用变形杆菌作为抗原与立克次体感染者血清做交叉凝集反应，称外裴试验（Weil-Felix test)辅助诊断斑疹伤寒等疾病,外裴试验,74,.,