不同类型疫苗的作用机制ppt演示课件

不同类型疫苗的作用机制,2,.,3,1 弱毒疫苗,基本概念：弱毒疫苗，是一种病原致病力减弱但仍具有活力的完整病原疫苗，也就是用人工致弱或自然筛选的弱毒株，经培养后制备的疫苗。 作用机制：通过特殊途径致弱后，其致病力减弱且免疫原性保持不变，经过首免、二免甚至三免后，畜禽不产生明显损伤，却能被刺激产生明显的免疫保护力畜禽不再被感染。,.,4,突出的特点表现在以下几个方面 ： （1）诱导包括体液免疫、细胞免疫的免疫方式，具有较强保护作用。 （2）由于是活病毒，病毒可以在体内增殖，长时间和机体细胞发生作用，诱导较强的免疫力。 （3）需接种多次，即可以达到满意的效果。 （4）可以通过自然感染途径接种（点眼、滴鼻、口服等），这样不仅可以产生全身免疫反应，而且可以诱导产生局部免疫反应。 （5）可以通过病毒所有抗原（病毒包括多种抗原，其中一种或两种就能引起反应）刺激机体产生反应。 （6）一般采用真空冻干工艺，需冷冻保存（-15-20）。,.,5,其主要缺点： (1)既然是活病毒制剂，有可能污染其它活的病原体； (2)一些减毒活疫苗仍保留有一定的毒力； (3)传统的减毒活疫苗可能出现病毒毒力回复； (4)在一些免疫缺陷的个体中可能诱发严重疾病； (5)在某些时候，野毒株感染可以导致活疫苗效果降低； (6)缺损颗粒可以干扰疫苗的免疫效果； (7)对保存和运输的要求较高。,.,6,2 灭活疫苗,基本概念：灭活疫苗是先对病毒或细菌培养，然后用加热或化学剂（通常是福尔马林）将其灭活。灭活疫苗即可由整个病毒或细菌组成，也可由它们的裂解片段组成为裂解疫苗。,.,7,作用机制：灭活疫苗常需多次接种，接种1剂不产生具有保护作用的免疫，仅仅是“初始化”免疫系统。必须接种第2剂或第3剂后才能产生保护性免疫。它引起的免疫反应通常是体液免疫，很少甚至不引起细胞免疫。接种灭活疫苗产生的抗体滴度随着时间而下降，因此，一些灭活疫苗需定期加强接种。灭活疫苗通常不受循环抗体影响，即使血液中有抗体存在也可以接种（如在婴儿期或使用含有抗体的血液制品后）；它在体内不能复制，可以用于免疫缺陷者。灭活疫苗使受种者产生以体液免疫为主的免疫反应，它产生的抗体有中和、清除病原微生物及其产生的毒素作用，对细胞外感染的病原微生物有较好的保护效果。灭活疫苗对病毒、细胞内寄生的细菌和寄生虫的保护效果较差或无效。,.,8,其主要优点： (1)由于不存在有感染性病毒存在，比较安全； (2)保存方便，无须冻干保存； (3)其它活病原体污染问题较少； (4)生产相对简单。,.,9,主要缺点： (1)免疫效果一般低于减毒活疫苗，虽然能够诱导产生包括中和抗体在内的免疫反应，但不能诱导细胞毒T淋巴细胞反应。 (2)诱导产生的免疫反应持续时间较短，需要多次接种。 (3)灭活剂对病毒抗原有影响，而且对不同的抗原成分影响不同。 (4)由于诱导的免疫反应水平较低，以及各个抗原成分之间的疫苗应答不平衡，可能诱发疾病。 (5)一般要求对疫苗进行浓缩纯化。 (6)一般不能通过自然途径接种，不易产生局部免疫反应。 (7)需要使用佐剂，制剂中存在灭活剂。,.,10,3 类毒素,基本概念：细菌的外毒素经甲醛处理后，失去毒性而仍保留其免疫原性，能刺激机体产生保护性免疫的制剂。常用的甲醛溶液的浓度是0.30.4%。它可使细菌外毒素的电荷发生改变，封闭其自由氨基，产生甲烯化合物（CH2=N-）。其他基团（如吲哚异吡唑环）与侧链的关系亦可改变，成为类毒素。常用的类毒素有白喉类毒素，破伤风类毒素。另外，若在类毒素中加入适量的磷酸铝或氢氧化铝，即成吸附精制类毒素。,.,11,作用机制： 该类制剂在体内吸收较慢，能较长时间刺激机体，使机体产生高滴度抗体，增强免疫效果。类毒素也可与死疫苗混合制成联合疫苗。如百白破三联疫苗，就是由百日咳死菌苗、白喉类毒素、破伤风类毒素混合制成的。主要用于儿童，注射后可同时预防儿童易发的白喉、百日咳、破伤风三种疾病。类毒素在预防由外毒素引起的传染病中起重要作用，可用于人和动物的免疫接种，使其通过人工自动免疫获得抗病能力；还可用来免疫动物，再从动物血液中提取含抗毒素的血清，将此抗血清注入人体后，可使人体通过被动免疫的方式，立即获得相应的特异性免疫力。,.,12,其优点：与灭活菌疫苗相同，不具持续力，所以必须经常追加接种。 其缺点：制备简单，成本低廉。,.,13,4 亚单位疫苗,基本概念：亚单位疫苗是将致病菌主要的保护性免疫原存在的组分制成的疫苗.在大分子抗原携带的多种特异性的抗原决定簇中，只有少量抗原部位对保护性免疫应答起重要作用。通过化学分解或有控制性的蛋白质水解方法使天然蛋白质分离，提取细菌、病毒的特殊蛋白质结构，筛选出具有免疫活性的片段制成的疫苗，称为亚单位疫苗。,.,14,作用机制： 亚单位疫苗仅有几种主要表面蛋白质，因而能消除许多无关抗原诱发的抗体，从而减少疫苗的副反应和疫苗引起的相关疾病。A群脑膜炎球菌多糖疫苗、伤寒Vi多糖疫苗是比较早的亚单位疫苗，该类疫苗减少了全菌疫苗使用中所出现的不良反应；此外，流感裂解疫苗的免疫效果及安全性已在国内外的广泛应用中得到了肯定。亚单位疫苗的不足之处是免疫原性较低，需与佐剂合用才能产生好的免疫效果，所以，若全菌（病毒）疫苗不存在严重不良反应，仍应以全菌（病毒）疫苗为首选。 其优点：易制备，价格低廉。 其缺点：需追加免疫，制备疫苗有局限性。,.,15,生物技术疫苗,.,16,1结合疫苗,基本概念：结合（以蛋白为载体的细菌多糖类）疫苗是指采用化学方法将多糖共价结合在蛋白载体上所制备成的多糖-蛋白结合疫苗，用于提高细菌疫苗多糖抗原的免疫原性，如b型流感嗜血杆菌结合疫苗、脑膜炎球菌结合疫苗和肺炎球菌结合疫苗等。,.,17,作用机制： 病原菌中的抗原性多糖通常是由一相同结构单位重复组成的线性聚合体，这一结构单位称之重复单位（repeat unit,RU),一个RU常有2-8个单糖，其中的O-乙酰基、丙酮酰基、糖苷键和磷酸酯（Hib荚膜多糖中有此结构）等成分是多糖抗原的主要决定簇。具有这种重复决定簇结构的多糖抗原能专一性地被B细胞表面抗原识别受体而与之牢固结合，并引起足够数量的受体发生交联，产生成帽现象，从而可单独触发B细胞分化。因此单一多糖抗原在刺激机体产生免疫应答时，不需要T辅助性细胞（TH 细胞）的辅助就能直接激活B细胞，是一种T细胞不依赖性抗原（Ti-Ag）。与Ti-Ag发生应答的是B1细胞，其细胞膜表面的抗原识别受体（即膜表面免疫球蛋白SmIg)为IgM单位，故应答中仅产生IgM抗体，无记忆B细胞(Bm)形成，不产生加强应答，因而免疫原性弱。,.,18,将多糖分子经化学共价结合到蛋白质上，由于蛋白质是一个大分子载体，其分子表面存在多种不同的决定簇，能专一性地被TH细胞表面抗原识别受体识别，从而激活TH细胞，使之参与免疫应答，因此多糖-蛋白结合物注射机体后诱发T细胞依赖性免疫应答，应答过程中存在着TH-B2细胞间的协同作用，其中TH细胞专一地识别多糖（抗原）决定簇，是产生抗体的效应细胞。由于B2细胞（成熟的B淋细胞）表面的抗原识别受体为IgG和IgM,故应答中产生这两种抗体，且能形成记忆细胞，出现加强应答，使结合物中多糖的免疫原性大大提高。同单一多糖疫苗相比，多糖蛋白结合疫苗具有许多免疫优势，即它属于Td-Ag,有TH细胞参与，刺激机体产生的抗体主要为IgG，另有少量的IgM，能产生细胞免疫和加强应答，免疫原性强，免疫接种范围广。,.,19,其优点：由于结合疫苗中两种抗原经化学共价结合后其各自的免疫原性均得以增强,如此不仅起到了联合接种的目的,还同时提高了免疫接种效果,带来一定 的 社会效益和经济效益。 其缺点：作为一个在单一多糖疫苗基础上进一步化学结合的疫苗, 其制备成本较高,在某些特殊情况下其发展受到一定限制；在具体化学合成中还存在许多问题,其中如多糖和载体蛋白质在结合中均存在自身交联而变形,产生一种新抗原( 副反应物)的可能。,.,20,2 合成肽疫苗,基本概念：合成肽疫苗是一种仅含免疫决定簇组分的小肽, 即用人工方法按天然蛋白质的氨基酸顺序合成保护性短肽, 与载体连接后加佐剂所制成的疫苗,是最为理想的安全新型疫苗,也是目前研制预防和控制感染性疾病和恶性肿瘤的新型疫苗的主要方向之一。,.,21,作用机制： 合成肽疫苗能否产生对B细胞表位的特异性免疫应答以及应答水平的高低主要取决于设计的几种抗原表位的组成和组合方式。一般而言,作为理想的免疫原,抗原分子中要同时包含目的抗原B细胞表位和自身或外源T细胞表位,可诱导出高度特异性的体液或细胞免疫反应,从体液免疫和细胞免疫水平起到预防或治疗作用,使机体产生较强的保护性。另外,通过设计隐藏于抗原分子内部的表位可增强抗原的免疫原性, 因为泛 D R 辅助T细胞表位( pan - DR helper T cell ep itopes , PADRE )或通用T表位( universal T ep itope)以高亲和力与机体内常见的HLADR分子结合,较少受MHC限制。,.,22,其优缺点：合成肽疫苗能克服常规疫苗的缺点，很早就被认为是动物传染病预防用的终极疫苗。然而多年的研究结果表明，合成肽疫苗免疫动物后所起的免疫保护作用并没有象人们当初设想的那样理想，同时证明了构建的合成肽疫苗的抗原性及其免疫原性要受到其自身组成及宿主免疫系统等多种因素的影响。在诱导机体产生免疫的过程中，单一的中和抗原表位是远远不够的，增加中和抗原表位的数目和引入细胞抗原表位将起到必不可少的辅助协同作用。,.,23,3 基因工程疫苗,使用DNA重组生物技术，把天然的或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中，使之充分表达，经纯化后而制得的疫苗。应用基因工程技术能制出不含感染性物质的亚单位疫苗、稳定的减毒疫苗及能预防多种疾病的多价疫苗。包括基因亚单位疫苗、基因工程活载体疫苗、DNA疫苗、转基因植物疫苗、基因缺失疫苗。,.,24,3.1 基因工程亚单位疫苗,基本概念： 基因工程亚单位疫苗（Subunit vaccine）又称生物合成亚单位疫苗或重组亚单位疫苗，是指将保护性抗原基因在原核或真核细胞中表达，并以基因产物蛋白质或多肽制成疫苗。,.,25,作用机制：例如FMDV基因工程亚单位疫苗主要是利用各种表达系统表达VP1蛋白，制成疫苗。Kupper等（1981）等克隆了FMDVVP1基因，将其插入到原核表达载体PL启动子的下游，实现VP1基因的原核表达，并通过间接ELISA和放射免疫试验证实了其表达产物具有抗原性，从而为FMDV基因工程亚单位疫苗的研制提供了理论依据。同年Kield用大肠杆菌表达的A型FMDVVP1蛋白免疫猪和牛，都可诱导中和抗体的产生，用高浓的VP1蛋白或重复接种牛，可使牛抵抗FMDV强毒的攻击。,.,26,Morgan证实：用A12-32二聚体多次接种猪，猪也可产生高水平的中和抗体，可以保护猪免受强毒的攻击，但是该技术不适合O型FMDV。目前，已经发现FMDV结构基因和非结构基因2A、3C串联起来表达，可以产生76S的类病毒粒子，提纯该病毒粒子，用来免疫动物，其免疫效果类似于全病毒，可产生高水平的中和抗体，能抵抗强毒的攻击，并彻底解决了FMDV常规疫苗散毒的危险。除此以外，酵母和杆状病毒系统也用来表达VP1蛋白，解决VP1蛋白在原核表达系统中不被修饰加工等问题，以期提高其免疫原性。,.,27,其优点：安全性高；纯度高，稳定性好；产量高；用于病原体难于培养或有潜在致癌性，或有免疫病理作用的疫苗研究。 其缺点：与传统亚单位疫苗相比，免疫效果较差。 增强其免疫原性的方法： 调整基因组合使之表达成颗粒性结构。 是在体外加以聚团化，包入脂质体或胶囊微球。 加入有免疫增强作用的化合物作为佐剂（adjuvant）。,.,28,用于亚单位疫苗生产的表达系统主要有大肠埃希氏菌、枯草杆菌、酵母、昆虫细胞、哺乳类细胞、转基因植物、转基因动物。比较成功的基因工程亚单位疫苗是乙型肝炎表面抗原疫苗。,.,29,3.2 基因工程活载体疫苗,基本概念：活载体疫苗(Live recombinant vaccine)可以是非致病性微生物通过基因工程的方法使之表达某种特定病原物的抗原决定簇基因,产生免疫原性,也可以是致病性微生物通过基因工程的方法修饰或去掉毒性基因,但仍保持免疫原性。在这种疫苗中,抗原决定簇的构象与致病性病原体抗原的构象相同或者非常相似,活载体疫苗克服了常规疫苗的缺点,兼有死疫苗和活疫苗的优点,在免疫效力上很有优势,主要有基因突变疫苗和复制性活载体疫苗。 已报道的活病毒载体研究包括痘病毒、腺病毒、疱疹病毒、腺联病毒、反转录病毒、甲病毒、脊髓灰质炎病毒和门戈病毒、登革热病毒、流感病毒、水疱性口炎病毒。,.,30,作用机制：,痘病毒载体疫苗：NYVAC株痘病毒是来自哥本哈根疫苗株的高毒致弱毒，不能够在多数人类细胞系中增值，在动物体内也表现出高度致弱的特征。ALVAC株是来自金丝雀的疫苗株痘病毒，广泛用作都病毒载体，只限于在禽类中复制，而不能在哺乳动物体内和细胞中增殖。这俩株非复制型痘病毒载体都能用于表达外源基因，刺激机体产生保护性的免疫反应。,.,31,腺病毒载体疫苗：重组腺病毒载体的构建相对容易，重组腺病毒可以达到很高的滴度，可以通过肌肉、鼻腔或口服进行免疫，可以感染很多类型的分裂或静止期细胞，进入细胞的效率很高。通过基因工程的方法可以构建3种类型的重组腺病毒：一种是可以复制的重组腺病毒；二是不需要辅助病毒的复制缺陷型的重组腺病毒，需要有特定的包装细胞系；三是需要辅助病毒的复制缺陷型的重组腺病毒。缺失E1/E3区的复制缺陷型的重组腺病毒可以插入约7.5kb的外源基因片段；外源基因插入E3和E4缺失区可以产生可复制的重组腺病毒,插入的外源基因可达5-6kb。,.,32,在增殖E1缺失的重组体的时候存在一个问题，是容易通过重组产生一定比例的可复制的腺病毒，现在已经研制出一种包装细胞可以解决这一问题。尽管可复制腺病毒疫苗应用已经有许多年了，但已经发现了Ad4弱毒在人群中水平传播的例子。不需要辅助病毒的复制缺陷型重组腺病毒在应用中可能更安全，但复制缺陷型的重组腺病毒的免疫效果却没有可复制的重组腺病毒好，表达伪狂犬病毒gD糖蛋白的复制缺陷型重组腺病毒的保护剂量至少是可复制型重组腺病毒的250倍。,.,33,活载体疫苗的优点：可以将外源抗原基因有效地导入机体，而不需要动用原始活毒，因而相对安全；而且，不同的抗原可以使用一种载体传递系统，一次性免疫就可以达到保护机体抵抗几种疾病2。 活载体疫苗的缺点：宿主会产生强大的针对病毒载体的免疫反应，如果机体已经存在对病毒载体的免疫力，那么初次免疫会受到影响，再次免疫会激起机体强大的排斥反应。,.,34,3.3 DNA疫苗,基本概念： 基因疫苗（gene vaccine),也称DNA疫苗、核酸疫苗，即将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。,.,35,DNA疫苗的作用机理,DNA疫苗能像病毒的活疫苗一样，进入宿主细胞的细胞核中转录为信使RNA，再在细胞浆中翻译成蛋白质。其中一部分蛋白质在降解后与MHC的类分子结合；而另一部分蛋白质也可以分泌出去，再像外源蛋白质一样被APC摄取后，在吞噬溶酶体中降解成的多肽和MHC的类分子结合(图7.3)。所以DNA疫苗既能诱导细胞免疫，又能刺激产生体液免疫。,.,36,DNA疫苗诱导免疫反应的原理 (1)肌细胞的直接参与,摄取了DNA的肌细胞可直接对表达的蛋白质抗原进行加工、处理和呈递。DNA疫苗在肌细胞内表达蛋白质抗原，然后被细胞内的水解酶降解成8-12个氨基酸的短肽，它们和MHC的类分子结合，并呈递到细胞表面被CD8 T细胞的受体识别而诱发免疫反应。,.,37,DNA疫苗诱导免疫反应的原理 (2)以树突状细胞为主的抗原呈递细胞,以树突状细胞为主的抗原呈递细胞，即采源于骨髓的APC也可被DNA转染。DNA疫苗在APC中表达抗原，蛋白质被水解酶降解成多肽后与MHC的类分子结合，再呈递给CD8 T细胞而导致体内CTL的免疫应答。 另外，肌细胞在摄取DNA以后，DNA疫苗的基因在质粒所携带的强启动子的作用下，在肌细胞内表达相应的蛋白质抗原。此时的肌细胞不能自己加工处理抗原，而是将蛋白质抗原释放出去，然后被来源于骨髓的APC捕捉和摄取。,.,38,DNA疫苗诱导免疫反应的原理 (3)肌细胞和APC共同参与,都能摄取DNA ，并能对表达的蛋白质抗原进行加工和处理，降解后的多肽与MHC的类分子结合，并呈递给CD8 T细胞而产生CTL的免疫应答。,.,39,3.5 转基因植物疫苗,基本概念：转基因植物疫苗是指用植物基因工程技术与机体免疫机理相结合，生产出的能使机体获得特异性抗病能力的疫苗。,.,40,作用机制：动物及人体的呼吸道、消化道及生殖道黏膜与病原体接触后会引起机体的黏膜免疫反应，在黏膜的微环境中产生分泌型IgA抗体和特异的免疫淋巴细胞，从而构成机体防御病原体感染的第一道屏障。口服疫苗就是以胃肠道黏膜为接种免疫部位，从而是机体在胃肠道黏膜产生局部免疫应答进而获得全身性的免疫保护。,.,41,许多文献报道，转基因口服疫苗不仅诱导了机体系统免疫反应，而且还诱导了黏膜免疫反应。诱导黏膜免疫是从M细胞识别抗原开始的。黏膜免疫反应过程如下： （1）抗原与M细胞表面尚未明确的部位结合。 （2）抗原被摄入M细胞的吞饮泡。 （3）M细胞将识别的抗原传递给巨噬细胞，巨噬细胞和其他抗原呈递细胞再将抗原展示给Th细胞。 （4）当Th细胞识别外源的蛋白质片段后，Th细胞协助激活B细胞，活化的B细胞转移到肠系淋巴结，并在那成熟分化为IgA浆细胞。,.,42,（5）IgA在浆细胞内产生，由J链连接成双聚体分泌出来。当IgA通过黏膜或浆膜上皮细胞向外分泌时，与上皮细胞产生的分泌片连接成完整的分泌型IgA（sIgA),释放到分泌液中，分布在黏膜或浆膜表面发挥作用。当疾病因子出现时，记忆Th细胞一方面刺激胞毒T细胞攻击受感染的细胞；另一方面迅速刺激记忆B细胞分泌中和抗体，消灭入侵的病原体。 其优点：安全性好、生产成本低。 其缺点是：免疫原性差。,.,43,3.6 基因缺失疫苗,基本概念：通过缺失与病毒力相关的基因，减弱其毒力但不丧失其免疫原性而制成的疫苗。 该类疫苗中最有代表性的例子是猪伪狂犬病毒(PRV)糖蛋白E基因 (原称gT基因)缺失(gE-)及胸腺核苷酸激酶基因突变失活(TK-)株的活疫苗。gE 和TK基因产物的缺失使野毒PRV的致病性显著减弱, 其免疫力不仅与常规的弱毒苗相当,而且由于gE基因的缺失,使其成为一种标记性疫苗。即接种该疫苗免疫的猪在产生免疫力的同时不产生抗gE抗体,而自然感染的带毒猪具有抗gE抗体。,.,44,作用机制： 第一代基因缺失疫苗 PRV的TK基因是主要的毒力基因,对其进行缺失便成为第一代基因缺失疫苗。TK 基因缺失株经生物学和动物试验证明对 Balb/c小白鼠有较高的安全性,接种猪能产生很强的免疫力并能抵抗PRV强毒的攻击,而且免疫猪后还可以通过PCR的方法将免疫接种猪与自然感染猪区分开来。但是,由于 TK基因属于酶蛋白基因,在体内不能产生其相应的抗体, 因此仅缺失TK基因不能用血清学方法区别开免疫接种猪与自然感染猪,要将此区别开来必须缺失相应 的糖蛋白基因。此外,仅缺失TK基因的弱毒株对犊牛还有较低的毒力, 对狗、 猫毒力更强。,.,45,第二代基因缺失疫苗 第二代基因缺失疫苗是在TK缺失疫苗的基础上发展起来的,比仅仅TK缺失的疫苗更加优越。第一代TK缺失疫苗只能够采用核酸杂交,限制性内切酶图谱, 空斑放射自显影同野毒株相区别, 第二代基因缺失疫苗除 了在TK基因引入了一个缺失外,在非编码必需糖蛋白的基因内引入了一个新的缺失,或插入一个报告基因,这样得到的突变株就不能产生被缺失的糖蛋白,从而免疫动物就不能产生相应的抗体, 且可以通过血清学方法将免疫接种猪与自然感染野毒的猪相区别, 这也是第二代基因缺失疫苗的最显著特点。此外, 某些糖蛋白的缺失,可以进一步降低毒力。,.,46,其优缺点：基因缺失疫苗的突出优点是疫苗株不易返祖而重新获得毒力。由于基因缺失疫苗株病毒的复制能力并不明显降低, 其所导致的免疫应答不低于常规的弱毒活疫苗。在单基因缺失的基础上成功构建的双基因缺失或多基因缺失疫苗会更为安全可靠。基因缺失疫苗的生产工艺与相应的弱毒疫苗相同,在生产过程和生产成本上都不存在投入过高的问题。尽管存在实际应用中的安全性问题, 特别是病毒在自然状态下可能与野毒株发生重组, 或者发生核酸修补,使疫苗株原来缺失的基因恢复而重新获得毒力,以及部分基因缺失疫苗对孕畜和仔畜的毒力偏高问题。,.,47,4 抗原-抗体复合物疫苗,基本概念： 抗原-抗体复合物疫苗是由特异性高免血清按照恰当的比例与抗原混合而制成。,.,48,作用机制：使用抗原抗体复合物疫苗可增强鸡和哺乳动物免疫反应，加强保护性免疫，其作用机制和方式尚不明了。以下是俩种常见的解释。 （1）与滤泡树状细胞结合 ：许多抗原以抗原递呈细胞（APCs)如单核细胞、巨噬细胞表面的Fc受体为中介，而被捕获、加工和递呈。病毒与抗体形成复合物以后，由于抗体分子的Fc片段与APC的Fc受体有很高的亲和性，因而使得与抗体的病毒更易更有效地与APC结合，一旦抗原-抗体复合物被APC吞噬和内化，即可激活B淋巴细胞和T淋巴细胞，刺激B淋巴细胞成为抗体分泌细胞，从而引起强烈的体液免疫和细胞免疫应答。并且，树突状细胞（DC）位于次生淋巴器官，可转运抗原-抗体复合物至淋巴结。,.,49,Boursne等研究表明。接种IBDV-Ab疫苗后,导致脾脏产生更多的生发中心。他们推测, 复合物疫苗的作用机理可能与脾脏、法氏囊的滤泡树突状细胞的结合有关。另外,Wen曾报道小鼠腹腔巨噬细胞(M5) 、脾脏及骨髓树突状细胞(DC)体外摄取IC的量明显多于单纯抗原,同时等研究发现机体抗原递呈细胞(APC)对IC的摄取量主要通过以下两种途径: 抗 H BsIgG可通过Fc段与APC膜上的Fc受体交联结合而大量摄入IC; 通过抗HBs对HBsA g的聚集作用,形成较大颗粒,易被APC内化摄入删除。,.,50,（2）通过Fc受体与APC结合,增强APC的递呈能力,促进APC分泌细胞因子：Fc受体广泛分布于APC等免疫效应细胞表面, 抗体通过与 Fc 受体结合,能够介导免疫效应细胞对抗原的摄取等作用,参与对抗原诱生的免疫应答调节作用。APC细胞被激活而摄入大量颗粒性抗原异物,不仅可增强依赖抗体的细胞杀伤活性(antibody dependent cell mediated cytotoxicity,ADCC)作用,而且还可使激活的M5等APC通过分泌白细胞介素 1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素12(interleukin-12,IL-12)等细胞因子调节机体免疫应答,并增强对T细胞应答的剌激作用。,.,51,另据报道，HBsAg与ant-iHBs结合成免疫复合物后,可增强鼠巨噬细胞、树突状细胞摄取抗原,并且通过对脾T细胞的抗原递呈试验显示,可使脾T细胞产生更强的淋巴细胞增殖反应及释放细胞因子。比单纯抗原刺激机体产生免疫反应的作用更强大,且免疫复合物本身还可起佐剂作用,增加抗原的免疫原性, Zheng 等研究通过HBsAg转基因小鼠证明,经HBsAg-抗HBs抗复合物免疫后,能够诱生细胞毒性T淋巴细胞反应和Th1型细胞因子。,.,52,（3）抗原-抗体复合物具有交叉递呈能力：近年来国外相关研究表明, APC通过一系列复杂机制使外源性的免疫复合物抗原,在细胞内细胞器的加工处理后,与MHC iv类分子结合后被递呈APC表面,激活 CD8+T淋巴细胞,进而激活( cytoto xict lymphocyte,CTL) 10 - 11。 此外, M ontfoort NV等12进一步认为,血液中的补体成分C1q可直接加强免疫复合物的交叉传递。,.,53,5 肿瘤细胞疫苗,基本概念： 它是在机体肿瘤组织中提取肿瘤细胞，经灭活处理后使瘤细胞丧失致瘤性，但仍保持其免疫原性和抗原性，将其主动免疫机体，在理论上能提供肿瘤细胞的所有抗原，包括特异性抗原和广谱性抗原，以期形成抗肿瘤免疫应答。,.,54,作用机制： 特异性抗原表达低下，免疫原性低，常无法诱导有效的抗肿瘤免疫应答。因此，通常采用在疫苗中加入诱导免疫的细胞因子，或导入细胞因子的编码基因，或导入协同共刺激分子的编码基因，借此来达到增强疫苗免疫原性的目的。还有白细胞介素、白细胞介素和粒-巨噬细胞集落刺激因子（-）参与。,.,55,6 病毒颗粒样疫苗,基本概念： 病毒样颗粒（VLP）是含有某种病毒一个或多个结构蛋白的空心颗粒形态结构上类似完整病毒具有与完整病毒相似的免疫原性并通过激活抗原提呈细胞诱导免疫应答，从而制得病毒颗粒样疫苗。,.,56,作用机制：VLP在形态上与真正病毒粒子相同或相似，作为颗粒性抗原可激活树突状细胞等抗原提呈细胞，将其提呈给T，B淋巴细胞，从而有效地诱导机体产生免疫保护反应。 在免疫小鼠的脾细胞中，VLP以HA特异性MHCI或MHCII限制性多肽结合物方式刺激HA特异性CD4和CD8细胞分泌Th1型( IFN-）和Th2型IL-4 IL-5 细胞因子。免疫过VLP的小鼠可观察到明显的MHC或MHC型抗原肽刺激产生的IFN-和IL-2，而rHA疫苗免疫则不会出现CD4T细胞比CD8T细胞分泌更多的IL-4和IL-5。提示VLP可同时诱导产生Th1和Th2型细胞免疫反应。 Zhang等 研究表明HA VLP免疫C57BL6小鼠,可激活B2细胞活性,并产生以IgG2a为主的抗体,.,57,其优点：由于ALP不含核酸不能自主复制不具有传染性，并且能够诱导交叉免疫中关键的细胞免疫应答，可能具有更广泛的抗感染谱更适合老年人等高危人群。 其缺点：安全、稳定还有待研究。,.,谢谢,