生物产品降解植物纤维素功效评价技术规范征求意见稿.docx

1ICS 07.080A 21中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准GB/T XXXXX201X生物产品降解植物纤维素功效评价技术规范Technical specification of evaluation for degradation of plant cellulose in biologic products（征求意见稿）201X-XX-XX 发布 201X-XX-XX 实施中 华 人 民 共 和 国 国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会发 布GB/T 201 I前 言本标准按照 GB/T 1.12009 给出的规则起草。本标准由中国标准化研究院提出并归口。本标准起草单位：本标准主要起草人：GB/T 2011生物产品降解植物纤维素功效评价技术规范1 范围本标准规定了生物产品降解植物纤维素效果评价试验原理、仪器设备及器具、试剂与材料、试验步骤、结果分析。本标准适用于微生物和酶生物产品降解植物纤维效果评价。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 1886.232 食品安全国家标准 食品添加剂 羧甲基纤维素钠GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 术语和定义3.1 生物产品 biological products利用生物技术获得的产品。3.2 植物纤维素 cellulose由 D-葡萄糖以 -1,4 糖苷键组成的大分子多糖，不溶于水及一般有机溶剂，是植物细胞壁的主要成分。4 原理在一定条件下，纤维素底物（羧甲基纤维素钠）能够被微生物或酶制剂降解，底物粘度随之降低，通过粘度计测得粘度的数值，以粘度的降低换算出纤维素底物降解率。5 仪器与设备5.1 pH 计：精度0.01pH。5.2 恒温水浴锅：温度制范围在 30100，精度为 0.1。5.3 电子天平：精度为 0.001 g 和 0.01 g。6 试剂与材料 GB/T 2012本标准使用的试剂均为分析纯，水均为符合 GB/T 6882 中规定的二级水。6.1 羧甲基纤维素钠（CMCNa）溶液准确称取 5 g 羧甲基纤维素钠，溶解于 80 90的热水中，完全溶解后，冷却至室温定容至 100 mL。6.2 基础营养基溶液按照 GB/T 15818 要求进行配制。7 试验步骤7.1 试验设计不同类型生物产品降解植物纤维素效果试验设计应符合表 1 要求。表1 生物产品降解植物纤维素效果试验设计产品种类项目微生物产品 酶产品处理设计1.供试样品2.失活样品3.空白对照重复次数 不少于3次反应条件 按正交试验结果确定7.2 待测微生物试验实施7.2.1 供试样品处理固体产品应进行研磨处理，制成粉末状供试样品。7.2.2 失活样品处理取供试的固体或液体微生物样品进行 121 C，30 min 杀菌处理。7.2.3 最佳反应体系确定250 ml 三角瓶中加入 100 ml 基础营养基溶液，121 ，20 min 灭菌，冷却。设计正交实验，按照供试样品的影响因素宜选取反应温度、反应转速、底物浓度、反应时间等，确定最佳反应体系条件。7.2.4 降解处理试验取250 mL三角瓶9个，空白样3个，供试样品瓶3个，失活样品瓶3个。分别向9个瓶中加入100 mL基础营养基溶液，进行灭菌处理后备用。按照最佳反应体系条件进行降解试验。7.3 待测酶试验实施7.3.1 供试样品处理固体产品应用缓冲溶液溶解。GB/T 20137.3.2 失活样品处理用缓冲溶液溶解后的固体样品或液体酶样品在 100 C 环境下进行 15 min 去酶活处理。7.3.3 最佳反应体系确定250 ml 三角瓶中加入 100 ml 缓冲溶液，设计正交实验，影响因素宜选取酶量、底物浓度、 pH 值、反应时间等，确定最佳反应体系条件。7.3.4 降解处理试验取 250 mL 三角瓶 9 个，空白样品瓶 3 个，供试样品瓶 3 个，失活样品瓶 3 个。分别向 9 个瓶中加入100 mL 缓冲溶液。按照最佳反应体系进行降解试验。7.4 浓度测定按 GB 1886.232 要求进行。8 结果分析8.1 结果计算微生物产品降解率按照式（1）计算：（1）D=(0-1)(0-2)(3-3)(0)0 100%式中：D底物的降解率（%）；0为反应开始时的起始溶液粘度（mPas ）；1为供试样品反应后的溶液粘度（mPas ）；2为失活样品反应后的溶液粘度（mPas ）；3为微生物样品瓶反应后的溶液粘度（mPas ）；3为微生物样品瓶反应前的溶液粘度（mPa s）；为空白样品反应后的溶液粘度（mPa s）。酶产品降解率按照式（2）计算：（2）D=(0-1)(0-2)(0)0 100%式中：GB/T 2014D底物的降解率（%）；0为反应开始时的起始溶液粘度（mPas ）；1为供试样品反应后的溶液粘度（mPas ）；2为失活样品反应后的溶液粘度（mPas ）；为空白样品反应后的溶液粘度（mPa s）。以平行样的平均值为最终的降解率值，计算结果保留到小数点后两位。8.2 结果判定以降解率的大小评价被测试生物产品的降解功效：降解率大于等于 80%，小于 100%时，降解效果为好；降解率大于等于 60%，小于 80%时，降解效果为良好；降解率大于等于 40%，小于 60%时，降解效果为较好；降解率大于等于 20%，小于 40%时，降解效果为一般；降解率小于 20%时，降解效果为差。8.3 重复性在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10%。_