2019高考生物二轮专题训练--生物技术实践（含解析）与2019高考生物二轮专题训练--胚胎工程和生态工程（有解析）

2019 高考生物二轮专题训练-生物技术实践（含解析）与 2019 高考生物二轮专题训练 -胚胎工程和生态工程（有解析）2019 高考生物二轮专题训练- 生物技术实践（含解析）限时规范训练 练思维 练规范 练就考场满分1为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。(1)为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是_。制备的培养基常用_法进行灭菌。K2HPO4 MgSO4 NaNO3 FeSO4 琼脂 0.1 g 0.5 g 3 g 0.01 g 2 g 15 g 加至 1 L(2)科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，振荡混匀，制成悬液。为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行_，用_法接种于固体培养基上。接种后的培养基_状态放入培养箱。(3)选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液(果胶与刚果红结合后显红色)，一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和_直径的比值，筛选果胶酶高产菌株。(4)将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的_( 填“上清液”或“沉淀物”)获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性。进行吸光值测定时，需将_与等量果胶溶液混合，作为实验的对照。答案：(1)果胶和蒸馏水 高压蒸汽灭菌(2)梯度稀释( 或系列稀释) (稀释) 涂布平板 倒置(3)水解(或透明 )圈(4)上清液 等量失活的粗提果胶酶2(2018 山西太原模拟) 在微生物连续培养时，一部分旧的液体培养基以一定的速度流出，同时不断有等量的新鲜液体培养基流入以保证微生物对营养物质的需要。研究人员将大肠杆菌 JA122 菌株接种到葡萄糖含量受到限制的液体培养基中，连续培养多代，然后取样分析其中存在的新菌株。请回答：(1)液体培养基中除了把葡萄糖作为_ 外，还应该含有_。(2)样品中还发现了 CV101、CV103 新品种，对其菌株的代谢差异进行分析发现，CV103 对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐。进一步研究表明，CV101 可以在过滤的、培养过 CV103 的培养基中生长，据此作出的推测是：_。请再设计并完成下列实验，来验证你的观点。配制_的固体培养基(A 组)和不含碳源的固体培养基(B 组)。将等量且适量稀释的 CV101 菌液分别接种到 A、B 培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况。实验过程应在_条件下进行。预期实验结果：_。解析：(1)根据题意，微生物连续培养时，一部分旧的培养基以一定的速度流出，同时不断有等量的新鲜培养基流入以保证微生物对营养物质的需要，因此该培养基一定为液体培养基；液体培养基的基本营养成分为碳源、氮源、水、无机盐和生长因子，其中葡萄糖为碳源。(2)由题意知， CV103 对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐。进一步研究表明，CV101 可以在过滤的、培养过CV103 的培养基中生长，据此可以推测 CV101 菌株能以 CV103 菌株产生的醋酸盐为碳源。答案：(1)碳源 氮源、水、无机盐、特殊营养物质(生长因子)(2)CV101 菌株能以 CV103 菌株产生的醋酸盐为碳源以醋酸盐为唯一碳源 无菌(或适宜的温度等) A 组菌株生长(形成菌落)，B 组菌株不能生长(无菌落)3三孢布拉霉菌能用来生产胡萝卜素，但该菌株的高产性状容易退化，需要定期筛选出高产菌株，研究表明菌体细胞内的H可将无色的 TTC 还原为红色复合物，且菌体细胞内H含量越高，还原能力越强，胡萝卜素合成能力也越强。请结合下列筛选菌株及提取胡萝卜素的流程图回答问题：三孢布拉霉菌液梯度稀释涂布到含有 TTC 的培养基上挑取单菌落扩大培养收集菌丝并处理萃取鉴定(1)工业生产上提取天然胡萝卜素的方法主要有三种，除可利用上述微生物的发酵生产之外，还可以从植物中提取和从_中获取。(2)将菌液涂布到含 TTC 的培养基上，目的是筛选出_ ，对照组需涂布等量的_以判断培养基是否被污染。挑取单菌落时，若菌落周围_，则菌株合成胡萝卜素的能力较强。(3)从该微生物中提取胡萝卜素时，扩大培养后要收集菌丝进行的处理是粉碎和_，以提高萃取效率。萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是防止_。(4)鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常采用_ 法，该方法也可用于分离色素，其原理是_。解析：由于三孢布拉霉菌菌体细胞内含有H，可将无色的 TTC 还原为红色复合物，由此可确定三孢布拉霉菌的存在，且红色越深，说明菌体内产生H越多，越符合生产提取要求。(1)工业生产上提取胡萝卜素的方法是利用微生物的发酵生产，从植物中提取和从大面积养殖的岩藻中获取。(2)由题干可知，三孢布拉霉菌细胞内的H可将无色的 TTC 还原为红色复合物，且H含量越高，胡萝卜素合成能力也越强。所以，将菌液涂布到含 TTC 的培养基上的目的是筛选出合成胡萝卜素能力较强的菌体，对照组需涂布等量的无菌水。挑取单菌落时，若菌落周围红色较深，则菌株合成胡萝卜素的能力较强。(3)收集菌丝后要进行粉碎和干燥，除去水分，其目的是提高萃取效率；由于胡萝卜素易溶于有机溶剂，有机溶剂具有易挥发的特点，所以萃取加热时安装冷凝回流装置的目的是防止有机溶剂挥发。(4)鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，类比叶绿体色素提取与分离实验，根据不同色素在有机溶剂中的溶解度不同的原理，采用纸层析法，将色素分离出来，并与标准色素带进行对比。答案：(1)(大面积养殖的 )岩藻(2)合成胡萝卜素能力较强的菌体( 或“高产菌株”) 无菌水 红色较深(3)干燥 有机溶剂挥发(4)纸层析 不同色素在有机溶剂中的溶解度不同4(2018 广州中山模拟) 毒死蜱(C9H11C13NO3PS)是一种有机磷杀虫剂，长期使用将导致土壤中农药残留严重。某研究小组从长期施药的韭菜温室土壤(偏酸性)里分离出能降解毒死蜱的木霉，并对其降解特性进行初步研究。请回答：(1)用于分离木霉菌种的培养基属于_ 培养基。配制此培养基时，应加入_作为唯一碳源。接种前，将培养基在适宜温度下放置适当的时间，观察培养基_以确定培养基是否被污染。(2)纯化木霉时，统计出 0.2 mL 的稀释液在稀释倍数为 105 的平板上的平均菌落数为 40 个，则每 mL 样液中的菌落数为_个。用此法测定木霉数量，实际活菌数量要比统计的菌落数量_，原因是_。(3)探究 pH 对木霉降解毒死蜱活性的影响研究小组向不同 pH 的培养基中分别加入 100 mg/L 毒死蜱，5 天后检测毒死蜱的残留量(图 1)。由图可推知：在偏酸性的土壤中，_。研究小组向不同 pH 的培养基中分别加入 100 mg/L 毒死蜱，再分别接种 1 mL 木霉悬液，混合均匀， 5 天后检测毒死蜱的残留量(图 2)。在此韭菜温室土壤中，若要提高木霉对毒死蜱的降解活性，可对土壤作何处理？_。解析：(1)要分离出能降解毒死蜱的木霉，需要以毒死蜱作为唯一碳源培养基，在该培养基上只有能降解毒死蜱的木霉能生存，其他微生物都不能生存，因此该培养基属于选择培养基。接种前，将培养基在适宜温度下放置适当的时间，观察培养基是否产生菌落，以确定培养基是否被污染。(2)纯化木霉时，统计出0.2 mL 的稀释液在稀释倍数为 105 的平板上的平均菌落数为 40 个，则每 mL样液中的菌落数为 4051052107( 个)。用此法测定木霉数量，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此实际活菌数量要比统计的菌落数量多。(3)由图 1 可推知：在偏酸性的土壤中，毒死蜱稳定性较好。由图 2 可知，在此韭菜温室土壤中，若要提高木霉对毒死蜱的降解活性，可适当提高土壤的 pH 至 7 左右。答案：(1)选择 毒死蜱 是否产生菌落(2)2107 多 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(3)毒死蜱稳定性较好 适当提高土壤的 pH 至 7 左右5为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”，某同学进行了如下实验。请分析回答下列问题：(1)配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外，还应加入适量的_和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间，要进行的操作是_。(2)接种微生物的方法有很多，图中过程所示的方法为 _。用该方法统计样本菌落数后，所得数据需要乘以 10n 后，才可表示乳酸菌的数量(单位：个 /mL)，这里的 n_ 。用该方法统计样本菌落数时，同时需要做 A、B、C 三个培养皿，原因是_。(3)为了检测乳酸菌对抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，在 37 培养箱中培养 24 h，使其均匀生长，布满平板。将分别含有A、B、C 三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含 A 的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素 A_(填“敏感”或“不敏感”) ；含 C 的滤纸片周围的透明圈比含 A 的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是_。解析：(1)配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外，还需要维生素，由于该培养基为固体培养基，因此还应加入适量的琼脂作为凝固剂。在培养基各成分溶化与灭菌之间，要进行的操作是调 pH。(2) 接种微生物的方法有很多，图中过程所示的方法为稀释涂布平板法。用该方法统计样本菌落数时，同时需要做 A、B、C 三个培养皿，分别计数 3 次，取平均值，使实验结果更加准确可靠，用该方法统计样本菌落数后，所得数据需要乘以 10n 后，才可表示乳酸菌的数量( 单位：个/mL)，分析图解可知，图中酸奶样品总共稀释 105 倍，并且稀释涂布平板时只取了 0.1 mL，因此这里的n6 。(3)在抗药性检验过程中，如果在菌落周围出现透明的圆圈，说明此种抗生素可抑制该细菌，因此该致病菌对抗生素 A 敏感；含 C 的滤纸片周围的透明圈比含 A 的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素 C 的耐药菌。答案：(1)维生素 调 pH(2)稀释涂布平板法 6 分别计数 3 次，取平均值，使实验结果更加准确可靠(3)敏感 抗生素 C 的耐药菌6.在农业生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。(1)如图是利用_法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步 _分散到培养基的表面。(2)分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO47H2O、KCl 、H2O 。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述_成分，并加入_，以补充_源。(3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为 106 的培养基中，得到以下统计结果：甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是 236 和 260，取平均值 248；乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240 和 250，取平均值 233；丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、 212 和 256，取平均值 163；在三位同学的统计中，只有一位同学的统计是正确的，指出另两位同学的统计为什么不正确。_。(4)若在稀释倍数为 106 的培养基中测得平板上菌落数的平均值为 233，那么每毫升样品中的菌株数是(涂布平板时所用稀释液的体积为 0.2 mL)_。解析：(1)据图分析，图示接种方法为平板划线法，平板划线操作就是把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。(2)培养分解尿素的细菌，其氮源是尿素，所以培养基中要除去含氮物质，即去除 NaNO3，并加入尿素和葡萄糖，以补充氮源和碳源。(3)甲同学只涂布了两个平板，实验数据说服力不够；丙同学虽然涂布了三个平板，但其中一个平板的计数结果与另两个相差太远，说明操作过程出现错误，实验数据缺乏说服力。(4)根据题意可知，每毫升样品中的菌株数平板上菌落数的平均值稀释液体积 稀释倍数2330.21061.165109。答案：(1)平板划线 稀释(2)NaNO3 尿素和葡萄糖 氮、碳(3)甲同学只涂布了两个平板，实验数据说服力不够；丙同学虽然涂布了三个平板，但其中一个平板的计数结果与另两个相差太远，说明操作过程出现错误，实验数据缺乏说服力(4)1.1651097下面是利用微生物制作葡萄酒的流程示意图，请回答：葡萄除梗破碎自然发酵葡萄酒灭菌贮藏(1)葡萄酒制作的原理是_，葡萄可为发酵菌提供_等生长繁殖必需的物质。(2)葡萄除梗应在冲洗之_( 填“前”或“后”)完成，原因是_。(3)葡萄酒制作过程中，在没有严格灭菌的条件下，通过控制_和通入_等措施，使酵母菌大量繁殖而成为优势菌种。(4)在葡萄酒制作过程中出现葡萄酒变酸现象，其原因可能是发酵液中混有的_菌发酵产生乳酸；也可能是_ ，导致醋酸菌生长繁殖，产生醋酸。解析：(1)葡萄酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，葡萄可为发酵菌提供碳源、氮源、水和无机盐等生长繁殖必需的物质。(2)为避免除梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会，葡萄除梗应在冲洗之后完成。(3)葡萄酒制作过程中，在没有严格灭菌的条件下，通过控制温度和通入氧气等措施，使酵母菌大量繁殖而成为优势菌种。(4)在葡萄酒制作过程中出现葡萄酒变酸现象，其原因可能是发酵液中混有的乳酸菌发酵产生乳酸；也可能是发酵容器密闭不严，导致好氧型的醋酸菌生长繁殖，产生醋酸。答案：(1)酵母菌在无氧条件下，将葡萄中的葡萄糖分解为酒精和 CO2 水、无机盐、碳源、氮源(2)后 避免除梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会(3)温度 氧气( 无菌空气)(4)乳酸 发酵容器密闭不严8请回答下列与发酵食品有关的问题：(1)葡萄酒酿造前需要冲洗葡萄，其主要目的是_，葡萄酒呈现红色的原因是_。喝剩的葡萄酒放置一段时间后变酸的原因是_。(2)苹果醋生产过程中利用了_ 菌的发酵作用，该过程需将温度控制在_。(3)制作酸奶需要的细菌的代谢类型是_ 。含有抗生素的牛奶能否作为酸奶发酵原料_(填“能”或“否”)，原因是_。解析：(1)葡萄酒酿造前冲洗葡萄的目的主要是洗去浮尘；葡萄皮中含有色素，溶解在发酵液中，使葡萄酒呈现红色；葡萄酒中乙醇在醋酸菌作用下会转变为醋酸。(2)苹果醋生产过程中利用了醋酸菌的发酵作用；醋酸菌生长最适温度为30 35 。 (3)制作酸奶利用了乳酸菌发酵作用，乳酸菌的代谢类型为异养厌氧型；抗生素能杀死乳酸菌。答案：(1)洗去浮尘 红葡萄皮中的色素溶解在发酵液中 空气中的醋酸菌混入葡萄酒后发酵产生了醋酸(2)醋酸 3035 (3)异养厌氧 否 抗生素可以杀死乳酸菌9“树橘柚者，食之则甘，嗅之则香”。橘子全身都是宝：不仅果肉的营养价值高，药用价值较高，其皮、核、络、叶都是“地道药材”。请回答下列问题：(1)橘皮精油是一种广谱性的杀虫剂，具有很高的经济价值，常采用_法提取橘皮精油。若采取水蒸气蒸馏法提取，橘皮精油的有效成分会发生_，使用水中蒸馏法又会产生_ 的问题。(2)下图是提取橘皮精油的实验流程示意图：图中过程处理的作用是_；过程一般加入相当于橘皮质量 0.25%的小苏打和 5%的硫酸钠，其目的是_。(3)若想利用橘子生产果醋需要用到醋酸菌，醋酸菌的最适生长温度为_，当_都充足时，醋酸菌可将柑橘汁中的糖分解成醋酸。解析：(1)由于橘皮精油的有效成分在水蒸气蒸馏过程中会发生部分水解，用水中蒸馏法又会导致原料焦糊问题，因此一般采用压榨法提取橘皮精油。(2)图中过程是将干燥去水的橘皮用石灰水浸泡，该处理的作用是破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率。过程为压榨，在压榨过程中一般加入相当于橘皮质量 0.25%的 NaHCO3(小苏打 )和 5%的 Na2SO4(硫酸钠)，并将 pH 调至 78 ，其目的是使橘皮精油易于与水分离。 (3)醋酸菌的最适生长温度为 30 35 ，当氧气和糖源都充足时，醋酸菌可将柑橘汁中的糖分解成醋酸。答案：(1)压榨 部分水解 原料焦糊(2)破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率 使橘皮精油易于与水分离(3)3035 氧气和糖源10 (2018东北三省三校联考)青蒿素，无色针状晶体，易溶于有机溶剂，不溶于水、不易挥发。获取途径主要是从黄花蒿中直接提取得到。根据生物相关知识，回答下列问题：(1)使用水蒸气蒸馏法_( 填“适用”或“不适用 ”)提取青蒿素，原因是_。(2)从黄花蒿中提取青蒿素时，应采用_ 法，并且通常在提取前将黄花蒿茎叶进行_和干燥，以提高效率；干燥过程应控制好_和_，以防止青蒿素分解。(3)提取过程中宜采用_加热以防止燃烧、爆炸；所得液体浓缩前需进行_。(4)最后需要对所提取物质进行_ ，以确定是否提取到青蒿素。解析：(1)水蒸气蒸馏法的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后混合物又重新分出油层和水层，由于青蒿素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出，故青蒿素不适于用水蒸气蒸馏法提取。(2)为了提高萃取效率，萃取前应将茎叶进行粉碎和干燥。高温会使青蒿素分解，所以在加热干燥过程中，应注意控制好温度和时间。(3)有机溶剂易燃，直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸，提取过程中宜采用水浴加热；所得液体浓缩前需进行过滤，除去萃取液中的不溶物。(4)为确定是否提取了青蒿素，可以用纸层析法进行鉴定。答案：(1)不适用 水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质，而青蒿素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出(2)萃取 粉碎 温度 时间(3)水浴 过滤(4)鉴定2019 高考生物二轮专题训练-胚胎工程和生态工程（有解析）限时规范训练 练思维 练规范 练就考场满分1下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病( 基因缺陷导致胰岛 B 细胞不能正常合成胰岛素)的过程设计图解。请据图回答：(1)图中、所示的结构分别是 _、_。(2)图中、所示的生物工程技术分别是 _、_ 。(3)过程通常用去核卵细胞作受体细胞的原因除了它体积大、易操作，含有营养物质丰富外，还因为它_。(4)过程通常采用的方法是_。(5)过程的完成需要用到的非酶基因操作工具为 _。(6)图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是_ 。解析：(1)体细胞核移植利用体细胞的细胞核和去核卵细胞。内细胞团细胞具有发育的全能性，其中导入健康胰岛 B 细胞基因，可以形成能正常分泌胰岛素的胰岛 B 细胞群。(2)图中是将体细胞的细胞核和去核卵细胞重组为一个细胞，为体细胞核移植技术。图中是将健康胰岛 B 细胞基因导入受体细胞，为基因工程技术。(3)过程通常用去核卵细胞作为受体细胞，除了因为它体积大，易操作，含有营养物质丰富外，还因为其含有能够激活细胞核全能性表达的物质。(4)将目的基因导入动物细胞通常用显微注射法。(5)基因工程的基本工具为限制酶、DNA 连接酶、载体，载体为非酶基因操作工具，通常为质粒。(6)图示方法与一般的异体移植相比可避免免疫排斥。答案：(1)细胞核 内细胞团(2)(体细胞)核移植技术 基因工程(转基因技术或 DNA 重组技术)(3)含有促进( 或激活)细胞核全能性表达的物质(4)显微注射法(5)载体(6)不发生免疫排斥反应2Leigh 氏综合征是一种神经障碍性疾病，其致病基因位于线粒体 DNA 中。一位母亲约有 1/4 的线粒体携带这种致病基因，她的前两个孩子因为患有Leigh 氏综合征而夭亡。她的第三个孩子因为接受另一名女性捐赠的健康基因而成为全球首个拥有“三个父母”的男婴。请根据男婴孕育过程回答下面的问题：(1)该母亲的前两个孩子患病夭亡的原因是_，该健康男婴孕育过程中依次使用了_、早期胚胎培养和胚胎移植等技术。(2)图示过程中代表该母亲卵母细胞的是_(填 “A”或“B”)。取卵之前，该母亲需要注射_激素。(3)早期胚胎需经过_(水平)检测合格后才能植入母亲的子宫继续发育。(4)在胚胎孕育过程中，医疗团队特意选择了男性胚胎移入子宫发育，原因是_。解析：(1)根据题意可知，该母亲约有 1/4 的线粒体携带这种致病基因，并且该母亲可能产生含较多缺陷线粒体的卵细胞，而受精卵的线粒体几乎全部来自卵细胞，这导致前两个孩子患病夭亡；根据图示信息可知，该健康男婴孕育过程中依次使用了核移植、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术。(2)图中首先对卵母细胞 A 去核，然后与卵母细胞 B 的细胞核融合，重组的卵细胞中含有卵母细胞 A 的细胞质，说明 A 的细胞质基因是正常的，因此代表该母亲卵母细胞的是 B。取卵之前，该母亲需要注射促性腺激素，进行超数排卵。(3)早期胚胎需经过 DNA 分子水平检测合格后才能植入母亲的子宫继续发育。(4)在胚胎孕育过程中，由于男性的线粒体不会遗传给后代，因此医疗团队特意选择了男性胚胎移入子宫发育。答案：(1)该母亲可能产生含较多缺陷线粒体的卵细胞，而受精卵的线粒体几乎全都来自卵细胞，导致前两个孩子患病夭亡 核移植、体外受精(2)B 促性腺(3)DNA 分子水平(4)男性的线粒体不会遗传给后代3Rag2 基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES 细胞) 对 Rag2 基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：请回答：(1)步骤中，在核移植前应去除卵母细胞的 _。(2)ES 细胞除来源于早期胚胎外，还可来源于_，它在形态上的特性_；在功能上的特性是_。(3)步骤中，需要构建含有 Rag2 基因的表达载体。可以根据 Rag2 基因的_设计引物，利用 PCR 技术扩增 Rag2 基因片段。用 Hind 和 Pst 限制酶分别在片段两侧进行酶切获得 Rag2 基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有_的酶切位点。(4)为检测 Rag2 基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞中的_，用抗 Rag2 蛋白的抗体进行杂交实验。解析：(1)动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，因此在核移植之前应去除卵母细胞的细胞核。(2)ES 细胞可来源于早期胚胎或者原始性腺。它在形态上的特性：体积小、细胞核大、核仁明显；在功能上的特性是具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。(3)不同基因的核苷酸序列不同，而引物与核苷酸序列互补配对，因此设计引物可以根据基因的核苷酸序列进行；因为重组基因片段的连接需要有相同的黏性末端，因此所选择的表达载体上应具有 Hind和 Pst限制酶的酶切位点。(4)基因表达的最终产物为蛋白质，因此要检测该基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞中的蛋白质，用特异性抗体(抗蛋白的抗体) 进行杂交实验。答案：(1)细胞核(2)原始性腺 体积小、细胞核大、核仁明显 具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞(3)核苷酸序列 Hind 和 Pst 限制酶(4)蛋白质4如图、图分别表示两项胚胎工程技术应用图解，请据图回答下列问题：(1)图 中，细胞 E 的形成利用了_技术。图和图共同用到的生物工程技术有_、_和_。(2)图 中，首先要用激素对 C 羊和代孕羊 H 进行_处理，然后用促性腺激素处理 C 羊获得大量卵子，体外受精前应对精子进行_处理，选择处于_期的卵母细胞与处理后的精子在体外完成受精得到受精卵 F。(3)图 中，过程 d 的操作，在相应酶处理后一般选用_作为外源基因的载体，通过显微注射法导入受精卵 F 中。外源基因是否导入受精卵并稳定遗传，可以采用_方法对 b 过程产生的细胞进行检测。(4)细胞 E 和 F 一般在体外培养到_期即可移植到代孕母体子宫内。解析：(1)图中 a 表示核移植过程，b 表示早期胚胎培养过程，c 表示胚胎移植过程，因此小羊 X 是采用核移植和胚胎移植技术等产生的克隆羊；图中 a表示体外受精过程，b 表示早期胚胎培养过程，c 表示胚胎移植过程，d 过程采用了转基因技术，因此小羊 Y 是采用体外受精、基因工程和胚胎移植技术等产生的转基因试管羊。图与图均采用了动物细胞培养、早期胚胎培养和胚胎移植技术。(2)图中，首先要用激素对 C 羊和代孕羊 H 进行同期发情处理；后用促性腺激素实现超数排卵，M中期的卵母细胞具备与获能精子在体外完成受精的能力。(3)图中，过程 d 表示将目的基因导入受体细胞，该过程一般选用质粒作为外源基因的载体，显微注射法是将目的基因导入动物细胞的最有效方法；检测外源基因是否导入受精卵，可采用 DNA 分子杂交技术(基因探针技术)。(4)早期胚胎需在体外培养到桑椹胚或囊胚期才可移植到代孕母体子宫内。答案：(1)动物体细胞核移植 动物细胞培养 早期胚胎培养 胚胎移植(2)同期发情 获能 M中(3)质粒 DNA 分子杂交(4)桑椹胚或囊胚5下图表示培育转基因克隆羊和胚胎工程的部分操作流程，其中字母代表有关结构或个体，数字代表过程、方法。请据图回答：(1)图中过程所涉及的生物技术有 _(两种即可)。(2)通过、过程获取分散的细胞时，用到的酶是_，培养的细胞在充满培养皿底时停止分裂，这种现象称为_。(3)动物细胞培养过程中应将细胞置于 5%CO2 的气体环境中，CO2 的作用是_。此培养过程中为防止杂菌感染，需要添加一定量的_。(4)早期胚胎可通过 _技术移入代孕母体子宫内继续发育，该技术在生产实践中的意义在于_。(5)通常用去核的卵母细胞作为受体细胞。此时的卵母细胞应该培养到_(细胞分裂方式及时期 )。f 细胞在形态上的特点是_。解析：(1)图中为动物细胞培养获得细胞群， 是用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理获得单个细胞，、为体细胞核移植获得重组细胞的过程，是早期胚胎培养过程，为胚胎移植，为从早期胚胎中获取胚胎干细胞。(2)培养的细胞在充满培养皿底时会出现接触抑制现象，细胞分裂会停止。(3)图中动物细胞培养过程中应将细胞置于 5%CO2 的气体环境中，CO2 的作用是维持培养液的pH，为细胞培养提供稳定的环境。培养过程中为防止杂菌感染，需要添加一定量的抗生素。(4)早期胚胎可通过胚胎移植技术移入受体子宫内进行发育，胚胎移植技术可以提高优良母畜的繁殖率。(5)用去核卵母细胞作为受体，此时的卵母细胞应处于减数第二次分裂中期。f 细胞是胚胎干细胞，在形态上的特点是体积小、细胞核大、核仁明显。答案：(1)动物细胞培养、早期胚胎培养、胚胎移植、细胞核移植(2)胰蛋白酶( 或胶原蛋白酶) 接触抑制(3)维持培养液的 pH 抗生素(4) 胚胎移植 提高优良母畜的繁殖率(5)减数第二次分裂的中期 体积小、细胞核大、核仁明显6(2018 广东佛山质检) 下图是利用 乳球蛋白(BLG)基因 5端调控序列和人乳铁蛋白(hLF)基因构建能在羊乳腺细胞特异性表达的运载体的简要流程图，请据图回答下列问题：(1)为 PCR 过程，除了要加入引物、原料外，还需要加入 _，在此过程中引物的作用是_。(2)BamH的识别序列为GGATTC ，Hind 的识别序列为AAGCTT，选用这两种酶进行操作的意义是_，除此之外，过程还需要_酶。(3)BLG 基因 5端调控序列能使 hLF 基因在羊的乳腺细胞中特异性表达，这是因为_。(4)要获得能表达目的基因的羊，应将重组质粒导入羊的_(填“乳腺细胞”“去核卵细胞”或“受精卵”)，获得优良胚胎后，为了提高胚胎的利用率，常采用_的方法来处理胚胎。解析：(1)PCR 过程中，除了要加入引物、原料外，还需要加入耐高温的 DNA聚合酶和模板，引物的作用是使 DNA 聚合酶能够从引物的 3端开始连接脱氧核苷酸。(2)BamH 和 Hind 切割形成的黏性末端不同，选用这两种酶切割目的基因和质粒，目的是避免目的基因和运载体产生的末端任意连接(环化连接)。构建基因表达载体还需要 DNA 连接酶。(3)BLG 基因 5端调控序列作为启动子，是 RNA 聚合酶识别和结合的部位，能驱动 hLF 基因转录出 mRNA，所以能使hLF 基因在羊的乳腺细胞中特异性表达。(4) 高度分化的动物细胞难以表达全能性，而受精卵易于表达全能性，要获得能表达目的基因的羊，应将重组质粒导入羊的受精卵，获得优良胚胎后，为提高胚胎的利用率，常采用胚胎分割的方法来处理胚胎。答案：(1)耐高温的 DNA 聚合酶、模板 使 DNA 聚合酶能够从引物的 3端开始连接脱氧核苷酸(2)避免目的基因和运载体产生的末端任意连接( 环化连接) DNA 连接(3)BLG 基因 5端调控序列作为启动子，是 RNA 聚合酶识别和结合的部位，能驱动 hLF 基因转录出 mRNA(4)受精卵 胚胎分割7下面是繁育良种奶牛的示意图，据图回答下列问题：(1)对供体母牛用_处理可获得更多的卵母细胞，经人工授精后可得到早期胚胎。在胚胎移植前，若对胚胎进行性别鉴定，可以在分子水平上对早期胚胎进行性别鉴定，也可以在细胞水平上通过对_的分析进行性别鉴定。体外培养受精卵时，培养液中提供 CO2 的目的是_。若要对囊胚阶段的胚胎进行分割，其操作过程中需要注意的问题是_。(2)对受体母牛要进行同期发情处理是为了_ ，图示流程中冲卵的“卵”是指_。实际生产中常利用体细胞克隆保持供体母牛的许多优良性状，操作中用于核移植的体细胞一般选用_代以内的细胞，其原因是_。解析：(1)对供体母牛用促性腺激素处理可使其超数排卵，以获得更多的卵母细胞。若在细胞水平上对胚胎进行性别鉴定，可通过对性染色体分析加以鉴别。体外培养受精卵时，培养液中提供 CO2 用于维持培养液的 pH。若要对囊胚阶段的胚胎进行分割，需要注意将内细胞团均等分割。(2)对受体母牛要进行同期发情处理是为了给供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境。题图过程中的冲卵实际上是获得早期胚胎。实际生产中常利用体细胞克隆保持供体母牛的许多优良性状，操作中用于核移植的体细胞一般选用 10 代以内的细胞，其原因是10 代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。答案：(1)促性腺激素 性染色体 维持培养液的 pH 将内细胞团均等分割(2)使供体、受体的生理变化相同 早期胚胎 10 10 代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型8请回答下列与基因工程、胚胎工程、生态工程有关的生物学问题：(1)基因工程技术中获得目的基因后，利用 PCR 技术将该基因扩增，前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成_。培育抗病转基因植物时，使用最多的抗病基因是_基因和病毒复制酶基因。(2)在胚胎工程中，早期胚胎发育到_ 阶段即可移植到代孕母体子宫中，移植后的胚胎能在受体子宫内存活的生理基础是_。(3)与传统方法生成的抗体相比，单克隆抗体具有很多优点。在癌症治疗时，把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或_相结合，制成“生物导弹”，借助单克隆抗体的_作用，将药物带到癌细胞位置，将其在原位杀死。单克隆抗体的制备过程应用了_技术。(4)我国西北一些地区年降雨量较少，适宜种植灌木和草，却被硬性规定种植属于乔木的杨树，致使许多地方的杨树长成半死不活状，结果防护林成为残败的“灰色长城”，其失败的原因主要是违背了_原理。解析：(1)利用 PCR 技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。培育抗病转基因植物时，使用最多的抗病基因是病毒外壳蛋白基因和病毒复制酶基因。(2)在胚胎工程中，早期胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段即可移植到代孕母体子宫中；由于受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，所以移植后的胚胎能在受体子宫内存活。(3)在癌症治疗时，把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，制成“生物导弹”。“生物导弹”借助的是单克隆抗体的导向(或定向、定位)作用；单克隆抗体的制备过程应用了动物细胞融合、动物细胞培养技术。(4)我国西北一些地区年降雨量较少，适宜种植灌木和草，却被硬性规定种植属于乔木的杨树，致使许多地方的杨树长成半死不活状，结果防护林成为残败的“灰色长城”，其失败的原因主要是违背了协调与平衡原理。答案：(1)引物 病毒外壳蛋白(2)桑椹胚或囊胚 受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应(3)细胞毒素 导向 动物细胞融合和动物细胞培养(4)协调与平衡9. 我国科研人员克隆了 100 多个重要基因，取得了抗虫棉、抗虫玉米、耐除草剂大豆等一批重大转基因成果。请回答下列问题：(1)抗虫棉中转入的 Bt 毒蛋白基因是从苏云金 (芽孢)杆菌中分离出来的，该基因编码的 Bt 蛋白对哺乳动物_(填“有”或“无”)毒害作用。(2)每一种 Bt 毒蛋白的杀虫范围有限，对现有的毒蛋白进行_，使其具有更广杀虫范围，属于_(生物工程)的范畴。(3)随着转基因成果的不断涌现，人们对转基因生物的安全性的关注与日俱增，在食物安全、生物安全和_三个方面发生了激烈争论。.关注生态工程的建设。(1)与传统的工程相比，生态工程是一类少消耗、_ 、可持续的工程体系。(2)“无废弃物农业”是我国古代传统农业的辉煌成就之一，也是生态工程最早和最生动的一种模式，该模式主要遵循生态工程的_原理。(3)甘肃陇南地区的“九子登科 ”模式是哪种生态工程建设的实例 ( )A草原生态恢复工程 B城市环境工程C小流域综合治理生态工程 D湿地生态恢复工程解析：.(1)Bt 毒蛋白基因编码的 Bt 蛋白，在哺乳动物消化道中会被消化分解，因此对哺乳动物无毒害作用。(2)对现有的毒蛋白进行改造，使其具有更广杀虫范围，属于蛋白质工程的范畴。(3)人们对转基因生物的 安全性的关注与日俱增，在食物安全、生物安全和环境安全三个方面发生了激烈争论。.(1)与传统的工程相比，生态工程是一类少消耗、多效益、可持续的工程体系。(2)“无废弃物农业”主要遵循生态工程的物质循环再生原理。(3)甘肃陇南地区的“九子登科”模式是小流域综合治理生态工程建设的实例，C 项正确。答案：.(1)无(2)改造 蛋白质工程(3)环境安全.(1)多效益(2)物质循环再生(3)C