血栓与止血实验检查ppt课件

血栓与止血检验 1 第一节血栓与止血的筛选检验 一 一期止血缺陷的筛选检验二 二期止血缺陷的筛选检验三 纤溶活性增强的的筛选检验四 抗凝物质检验 2 一期止血的筛查检验 出血时间测定血小板计数束臂试验血块收缩试验毛细血管抵抗力试验 3 正常值 100 300 109 L 危险 4 出血时间测定bleedingtime BT 一 原理 测定在皮肤受特定条件外伤后 出血自然停止所需的时间即为出血时间 此过程反映了毛细血管与血小板的相互作用 包括内皮下组织与血小板粘附 通过vWF的作用 血小板的聚集和释放等反应 以及PGI2与TXA2的动态平衡 5 二 方法Ivy法 出血时间测定器法 卫生部推荐方法 三 试剂与器材 1 血压计 秒表 干净滤纸2 出血时间测定器 6 四 操作 1 血压计袖带缚于测定上肢的上臂 加压并维持在40mmHg 儿童减半 2 在肘前窝下5cm处的尺侧做局部消毒后 将测定器垂直贴于皮肤表面 按下按钮 同时启动秒表 移开测定器 3 每隔30s 用干净滤纸吸去流出的血液 直至流血自然停止 并记录秒表读数 7 五 参考值 2 5 9 5min六 临床意义 延长 1 出血时间延长见于血小板减少症2 血小板功能异常3 血管性血友病4 血管壁异常5 某些严重的凝血因子缺乏缩短 高凝状态和血栓性疾病 8 血小板检测 一 血小板生存时间检测二 血小板相关抗体检测三 血小板粘附试验四 血小板聚集试验五 血小板第3因子有效性检测六 血小板膜糖蛋白检测七 血小板活化指标检测 血浆 TG PF4 血小板P选择素检测 9 诱聚剂 PPP PRP 血小板聚集试验plateletaggregationtset PAgT 10 11 临床意义 血小板无力症 巨大血小板综合症 血小板贮存池病 低 无 纤维蛋白原血症 肝硬化 使用血小板抑制剂等 高凝状态 血栓形成性疾病 糖尿病 口服避孕药 人工瓣膜移植术 吸烟等 聚集率减低 聚集率增高 12 质量控制 1 采血要顺利 避免组织液混入 抗凝剂使用合理 不用EDTA抗凝 2 采集后3h内室温下完成3 试验前十天停用一切抑制血小板聚集的药物 试验前禁食高脂类食物4 注意PRP 800 1000r min离心10minPLT 200 400 X109 LPPP 3000r min离心20minPLT 20X109 L 13 血小板粘附试验plateletadhensiontest PAdT 原理 受检者血液一定速度通过一定量玻璃珠的塑料管 测定通过玻璃珠前后血液中血小板数的差值 即为粘附于玻珠和塑料管的血小板数 由此可计算出其占血小板总数的百分比 即为血小板粘附率 方法 玻球法 玻璃滤器法 玻珠法 14 临床意义 血管性血友病 巨大血小板综合症 血小板无力症 肝硬化 MDS 急性白血病 服用抗血小板药物等见于血栓前状态和血栓性疾病 妊高症 口服避孕药等 粘附率减低 粘附率增高 15 二期止血缺陷的筛选检验 全血凝固时间测定活化部分凝血活酶时间测定血浆凝血酶原时间测定 16 活化部分凝血活酶时间测定activatedpartialthromboplastintime APTT 一 原理 17 APTT Ca2 脑磷脂 白陶土 Ca2 脑磷脂 部分凝血活酶 18 二 操作 一 APTT手工法 试管法 血浆0 1ml APTT试剂各0 1ml CaCl20 1ml 混匀计时 结果观察 缓慢倾斜试管 观察液体流动状态 流动停止停止计时参考值25 45s 二 仪器法 37 温浴 19 APTT 延长 缩短 因子VIII IX XI活性减低 高凝状态 三 临床意义 肝素抗凝监测 20 APTT纠正试验 于患者血浆中分别加入1 4的正常新鲜血浆 硫酸钡吸附血浆 正常血清 再作APTT试验 硫酸钡吸附血浆VIII XI XII正常血清IX XI XII新鲜血浆VIII IX XI XII 21 血友病甲 血友病乙 F 缺乏 正常血浆 正常血清 缺 APTT纠正试验 血友病 纠正 不纠正 纠正 纠正 纠正 纠正 不纠正 患者血浆 纠正 纠正 22 凝血酶原时间测定Prothrombintime PT一 原理 Ca2 脑磷脂 PT 组织因子 Ca2 磷脂 23 1 直接报告患者及正常对照的PT秒数2 报告凝血酶原时间比值 PTR PTR 受检者PT 秒 正常对照PT 秒 3 报告国际标准化比值 INR INR PTRISI 二 报告方式 24 PT 延长 缩短 因子II V VII X Fg活性减低 高凝状态 三 临床意义 口服双香豆素类抗凝药物监测 25 要保证止凝血检验的质量必须做好以下十点 1 采血须顺利 尽量用大号针头 动作要轻柔 2 标本用加盖有刻度标记的塑料试管或硅化管收集 3 抗凝剂用109mmol L的枸橼酸钠 抗凝剂与血液的比例为1 9 26 当Hct增高 55 或 25 时 务必对抗凝剂用量或浓度进行调整 抗凝剂用量 ml 0 00185x全血量 ml x 1 Hct 27 4 标本采集至检验时间PT 4小时 APTT 2小时 一些因子活性检测要求即刻试验 5 使用仪器推荐或配套的试剂 使用时严格按照说明书 注意有效期和稳定性 6 反应温度控制在 37 1 7 手工操作必须做正常对照 复管检测 8 正确使用正常对照血浆及参比血浆 9 每天坚持室内质控 积极参加室间质评 10 建立本实验室的参考范围 28 凝血因子检验 一 凝血酶原消耗试验及其纠正试验二 简易凝血活酶生成试验及纠正试验三 血浆因子 促凝活性检测四 血浆因子 促凝活性检测五 凝血因子 III定性试验和亚基抗原检测 29 纤溶活性筛选检验 优球蛋白溶解时间血清纤维蛋白 原 降解产物检测血浆D 二聚体检测血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验 30 血清纤维蛋白 原 降解产物测定fibrin fibrinogenproduct FDP 一 原理 胶乳凝集法 在受检血清中加入特异性抗纤维蛋白 原 D E片段抗体标记的胶乳颗粒悬液 如果血清中含有纤维蛋白 原 降解产物 FDP 特别是D E片段 即可发生抗原抗体反应 导致胶乳颗粒凝集 31 二 临床意义 1 血清FDP轻度增高10 40mg L 见于急性静脉血栓 急性心梗 严重肺炎大手术后 恶性肿瘤 休克等 2 血清FDP明显增高 40mg L 见于原发性纤溶症 DIC M3 应用链激酶等溶栓治疗时 32 血浆D 二聚体测定D Dimer 一 原理 1 胶乳凝集法2 ELISA法二 临床意义 1 DIC时呈阳性或明显增高 另见深静脉血栓 心梗 肺栓塞 重症肝炎等2 可作为原发纤溶和继发纤溶鉴别的重要依据 33 34 生理性抗凝蛋白检验 一 抗凝血酶检测1 血浆抗凝血酶活性检测2 血浆抗凝血酶抗原检测二 蛋白C检测1 血浆蛋白C活性检测2 血浆蛋白C抗原检测三 血浆蛋白S抗原检测四 组织因子途径抑制物检测 35 病理性抗凝物质检验 一 复钙交叉试验二 凝血酶时间检测及甲苯胺蓝纠正试验三 普通肝素和低相对分子质量肝素检测四 凝血因子 抑制物检测五 狼疮抗凝物质的筛选试验和确诊试验 36 凝血酶时间测定及甲苯胺蓝纠正试验thrombintime TT一 原理 凝血酶 TT 37 二 结果判断 正常人凝血酶时间一般在16 18s 超过正常对照3s或在20s以上视为延长 如正常对照在20s以上 则超过5s为延长 加甲苯胺蓝后TT明显缩短 与未加甲苯胺蓝的TT比较相差5s以上 视为纠正 38 TT延长 血浆抗凝物质增多 纤维蛋白原异常 甲苯胺蓝能纠正 甲苯胺蓝不能纠正 链激酶 尿激酶溶栓治疗监测指标 39 纤维蛋白原异常 高纤维蛋白原血症为心脑血管血栓形成的独立危险因素 量 增高 严重肝病营养不良DIC 减低 老年人 慢性感染肿瘤 应激 口服避孕药期间等 40