血红蛋白病初稿分生讨论ppt课件

血红蛋白病 第三组 世界卫生组织估计 全球约有1 5亿人携带血红蛋白病基因 并已将血红蛋白病列为严重危害人类健康的6种常见病之一 是常见的遗传病之一 从分子结构到发病机理研究的均较清楚 是研究人类分子病的最好模型 血红蛋白病Hemoglobinopathy 由于珠蛋白分子结构异常或合成量异常所引起的疾病 原因 1 红细胞取材方便 来源丰富2 血红蛋白浓度高 不需纯化3 网织红细胞含有 珠蛋白mRNA 便于克隆其cDNA4 血红蛋白异常引起的疾病种类很多 2 异常血红蛋白病 血红蛋白分子结构异常 珠蛋白生成障碍性贫血 珠蛋白肽链合成速率异常 临床表现 溶血性贫血 高铁血红蛋白血症或因血红蛋白氧亲和力增高或减低而引起组织缺氧或代偿性红细胞所致紫绀 3 血红蛋白简介hemoglobin HGB 血红蛋白是一种结合蛋白四个亚基组成 2个 亚基和2个 亚基一个亚基 一条肽链 一个血红素 4 血红蛋白的一级结构 氨基酸排列顺序多肽链螺旋 二级结构 类 链 141个氨基酸类 链 146个氨基酸 5 三级结构 四级结构 6 肽链类型 链 由141个氨基酸残基构成 含较多组氨酸 其中 87位 即F8 组氨酸与血红素铁的结合 类 链 有 结构与 链相似 及 5种 血红素 具有卟啉结构 卟啉分子中心与亚铁离子配位结合 7 正常人出生后三种正常Hb 血红蛋白A HbA 由一对 链和一对 链组成 2 2 为正常人主要血红蛋白95 以上 胎儿血红蛋白 HbF 由一对 链和一对 链组成 2 2 1 左右 血红蛋白A2 HbA2 由一对 链和一对 链组成 2 2 2 3 8 链基因位于第16号染色体 链基因位于第11号染色体 呈连锁关系 珠蛋白基因突变而致肽链的单个或多个氨基酸替代或缺如 导致珠蛋白分子结构改变 称为异常血红蛋白 珠蛋白基因的缺失或缺陷 导致 珠蛋白链合成减少或缺乏 称为 海洋性贫血 珠蛋白基因缺陷 导致 珠蛋白链合成减少或缺乏 称为 海洋性贫血 9 异常血红蛋白病 异常Hb病 基因突变导致珠蛋白结构改变例如 镰状细胞贫血 地中海贫血 基因突变导致珠蛋白肽链合成缺乏或合成量异常如 地贫 10 异常血红蛋白病 由于珠蛋白基因突变导致珠蛋白肽链结构异常 如有临床表现者称为异常血红蛋白病 主要类型 1 镰状细胞病 2 不稳定血红蛋白病 3 血红蛋白M病 4 氧亲和力改变的血红蛋白病 11 镰状细胞病 临床表现 血管阻塞的继发症状 一过性剧痛 腹痛 关节痛 急性大面积组织损伤 心梗 肺 肾脏损伤 慢性溶血性贫血 12 镰状红细胞贫血分子基础 G 13 14 限制性酶切图谱分析 15 PCR分析 设计引物PCR扩增 珠蛋白基因第6密码子区域110bp 再用限制性内切酶MstII消化 进行琼脂糖凝胶电泳 正常 产生54bp和56bp两个片段 异常 DNA片段不被酶切 仍为110bp 16 PCR ASO探针杂交 17 二 地中海贫血 珠蛋白链合成数量不平衡 最初发现在地中海地区居住的人群发病率特别高而得名 实际上世界各地都有发生 非洲和东南亚也比较常见 珠蛋白基因缺失 突变导致某种珠蛋白链合成障碍造成 链和 链合成数量不平衡 引起的溶血性贫血称为地中海贫血 18 地中海性贫血 19 地中海贫血 地中海贫血 由于 珠蛋白基因的缺失或缺陷使 链的合成受到抑制而引起的溶血性贫血 地中海贫血 由于 珠蛋白基因的缺失或缺陷使 链的合成受到抑制而引起的溶血性贫血 基因突变是引起 地中海贫血的主要原因 基因缺失是引起 地中海贫血的主要原因 20 地中海贫血 珠蛋白基因点突变 单个碱基取代 插入或缺失 绝大多数 转录受阻 mRNA剪切加工错误 翻译无效 合成不稳定 珠蛋白 珠蛋白链不平衡 溶血性贫血 21 患儿颅骨及面颊部骨骼增大 头颅变大 额部隆起 颧高 鼻梁塌陷 两眼距离增宽 眼睑浮肿 形成地中海贫血的特殊面容 22 基因检测方法及分子基础 140 473nt 第17位碱基 17A T突变时中国人一种常见突变类型 PCR RFLP 613bpDNA片段 正常 可产生455bp片段 异常 产生72bp和373两个片段 MaeI酶切 产生新的MaeI酶切位点 23 1 未酶解片段2 A A3 A T4 T T 出现373bp片段 表明有 17A T无义突变发生 24 反向印迹杂交 RDB 将多种ASO探针点在尼龙膜上 分别与每个样品杂交 基因突变分析示意图 25 基因检测报告单 26 谢谢观看欢迎提问 27