消费品中亚硝胺迁移量的测定方法

中华人民共和国国家标准GB/T 201消费品中亚硝胺迁移量的测定方法Determination of the migration of nitrosamines in consumer products（征求意见稿）201-发布 201-实施中 华 人 民 共 和 国 国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会发布ICS 97.200.50Y 57GB/T 2011前 言本 标 准 按 照 GB/T 1.12009给 出 的 规 则 起 草 。请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利 。 本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 这 些 专 利 的 责任 。本 标 准 由 全 国 消 费 品 安 全 标 准 化 技 术 委 员 会 （ SAC/TC508） 提 出 并 归 口 。本 标 准 起 草 单 位 ：本 标 准 主 要 起 草 人 ： GB/T 2012消费品中亚硝胺迁移量的测定方法1 范围本 标 准 规 定 了 消 费 品 中 N-亚 硝 胺 及 可 亚 硝 化 物 质 迁 移 量 的 气 相 色 谱 -串 联 质 谱 测 定 方 法 。本 标 准 适 用 于 以 乳 胶 、 橡 胶 等 弹 性 体 为 材 质 的 消 费 品 ， 如 气 球 、 奶 嘴 、 玩 具 等 。2 规范性引用文件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 注 日 期 的 版 本 适 用于 本 文 件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。GB/T 6682 分 析 实 验 室 用 水 规 格 和 试 验 方 法3 原理试样用人工唾液迁移提取，迁移溶液经固相萃取净化浓缩，样液用气相色谱-串联质谱（GC-MS/MS）进行测定，采用多反应监测模式（MRM ）进行定性和外标法定量。4 试剂和材料除 另 有 规 定 外 ， 所 用 试 剂 均 为 分 析 纯 ， 水 为 GB/T 6682规 定 的 一 级 水 。4.1 碳 酸 氢 钠 。4.2 氯 化 钠 。4.3 碳 酸 钾 。4.4 亚 硝 酸 钠 。4.5 甲 醇 ： 色 谱 纯 。4.6 乙 酸 乙 酯 ： 色 谱 纯 。4.7 无 水 硫 酸 钠 。4.8 N-亚 硝 胺 标 准 品 ： 纯 度 均 大 于 95 ， 参 见 附 录 A。4.9 0.1 mol/L的 氢 氧 化 钠 溶 液 。4.10 0.1 mol/L的 盐 酸 溶 液 。4.11 人 工 唾 液 ： 称 取 4.2 g碳 酸 氢 钠 （ 4.1） ， 0.5 g氯 化 钠 （ 4.2） ， 0.2 g碳 酸 钾 （ 4.3） ， 30 mg亚 硝 酸 钠 （ 4.4） ， 溶 解 于 900 mL水 中 。 用 0.1 mol/L的 氢 氧 化 钠 溶 液 （ 4.9） 或 0.1 mol/L的 盐 酸溶 液 （ 4.10） 调 节 pH为 9.0， 用 水 定 容 到 1 L。 该 人 工 唾 液 每 天 现 用 现 配 。4.12 1 mol/L的 氢 氧 化 钠 溶 液 。4.13 1 mol/L的 盐 酸 溶 液 。4.14 标 准 储 备 液 ： 分 别 准 确 称 取 适 量 标 准 物 质 （ 4.8） （ 精 确 到 1 mg） ， 以 甲 醇 （ 4.5） 配 制成 浓 度 为 1000 mg/L的 单 标 储 备 溶 液 。 单 标 储 备 液 于 （ -183） 避 光 保 存 。4.15 混 标 储 备 溶 液 ： 准 确 移 取 适 量 各 标 准 储 备 液 于 容 量 瓶 中 ， 以 甲 醇 （ 4.5） 配 制 成 浓 度 为50 mg/L的 混 标 储 备 溶 液 。 混 标 储 备 液 于 （ -183） 避 光 保 存 。4.16 标 准 工 作 溶 液 ： 准 确 移 取 适 量 混 标 储 备 液 ， 根 据 需 要 以 乙 酸 乙 酯 （ 4.6） 配 制 一 系 列 质GB/T 2013量 浓 度 的 标 准 工 作 液 。注 ： 由 于 N-亚 硝 胺 类 物 质 易 被 紫 外 线 分 解 ， 需 避 光 以 避 免 其 暴 露 于 日 光 或 荧 光 灯 等 光 源下 。5 仪器和设备5.1 气 相 色 谱 -三 重 四 级 杆 质 谱 仪 。5.2 HP-5 MS UI毛 细 管 柱 （ 30 m0.25 m， 0.25 m） ，或相当者。5.3 氮 吹 仪 。5.4 分 析 天 平 ： 感 量 为 0.1 mg。5.5 恒 温 振 荡 水 浴 锅 ： 可 控 制 温 度 在 （ 402） 。5.6 固 相 萃 取 装 置 ： 配 有 真 空 泵 。5.7 固 相 萃 取 柱 ： Chromabond Easy固 相 萃 取 柱 （ 500 mg， 6 mL） ，或相当者。注 ： 经 实 验 验 证 ， 该 固 相 萃 取 柱 适 合 用 于 本 标 准 中 覆 盖 的 15种 N-亚 硝 胺 的 富 集 净 化 ， 仅 做 参 考 。 若 采用 其 他 固 相 萃 取 柱 ， 须 确 保 目 标 物 质 的 回 收 率 与 本 标 准 列 出 回 收 率 数 据 相 当 。5.8 有 机 滤 膜 ： 孔 径 0.45 m。5.9 棕 色 容 量 瓶 ： 10 mL， 50 mL， 100 mL。5.10 具 塞 棕 色 锥 形 瓶 ： 50 mL， 100 mL。6 分析步骤6.1 总则整个样品处理及分析过程均在避光条件下进行，防止 N-亚硝胺光降解。6.2 试样制备及迁移提取6.2.1 气球类样品将待测气球样品沿纵向对称切成两半。若样品质量大于取样量，则继续纵向对称剪切成四半。称取 5 g（精确至 1 mg）样品于 100 mL 具塞锥形瓶中，加入 45 mL 人工唾液，玻璃珠若干，盖上盖子，轻轻摇匀，保证样品完全被模拟唾液浸润，于（402）恒温振荡 60 min。其中人工唾液和玻璃珠预先加热到 40 。迁移完成后，立即将锥形瓶中的迁移溶液转移至 50 mL 棕色容量瓶，用适量人工唾液洗涤样品，与上述迁移溶液合并，以人工唾液定容至 50 mL。该迁移溶液分别用于 N-亚硝胺及可亚硝化物质的测定。立即准确移取 10 mL 迁移溶液进行亚硝化反应（6.3） ，用于可亚硝化物质的测定；剩余 40 mL 迁移溶液加入 1 mL 的 1 mol/L 氢氧化钠溶液（4.12） ，记作溶液 A，用于 N-亚硝胺的测定。6.2.2 非气球类弹性体样品选取非气球类弹性体样品的表面部分，尽量减少剪切边缘，并使剪切边缘平滑。取样面积至少（101）cm 2，厚度不应大于 1 mm。若弹性体部分表面积不足 10 cm2，或剪切步骤会影响实验结果时，该样品不需剪切，直接进行迁移提取。制样后，按照 6.2.1 进行迁移试验操作。6.3 亚硝化过程GB/T 2014迁移溶液定容后，立即准确移取 10 mL 迁移溶液至 50 mL 具塞锥形瓶，加入 1 mL 1.0 mol/L 盐酸溶液（4.13） ，混匀，于（402）下避光反应 30 min。反应结束后，加入 2 mL 1.0 mol/L 氢氧化钠溶液（4.12） ，此为溶液 B，用于可亚硝化物质的测定。注：可亚硝化物质包括亚硝酸盐、氮氧化物、胺类物质等，难以直接测定。本标准使迁移溶液中的可亚硝化物质在一定条件下发生亚硝化反应，转化成相应的亚硝胺，以亚硝胺测定结果间接表示可亚硝化物质的含量。6.4 固相萃取浓缩将 Chromabond Easy 固相萃取柱依次用 6 mL 乙酸乙酯、6 mL 甲醇活化，用 10 mL 水平衡。溶液 A（或溶液 B）以 1 mL/min 左右的流速过柱。上样完成后，抽干 10 min。用 6 mL 乙酸乙酯分两次洗脱（每次 3 mL） ，收集洗脱液，用无水硫酸钠（4.7）除去洗脱液中水分，然后用缓慢的氮气流吹至近干，然后定容至 1 mL，样液摇匀后装入棕色进样小瓶，密封冷冻避光保存待测。6.5 测定6.5.1 气相色谱-串联质谱测定条件由于测试结果取决于所使用的仪器，因此不可能给出色谱分析的普遍参数。下列给出的参数已被证明是可行的。气相色谱-三重四极杆质谱仪；a）色谱柱：HP-5 MS UI（30 m0.25 mm，0.25 m） ，或相当者；b）柱温： ； min)5( 240C/min102min/40in)3( 10min/20in)7( 80min/30in)3( 50 CCCc）进样口温度：280 ；d）离子源温度：180；e）传输线温度：250 ；f）载气：氦气（纯度99.999%） ，流量：1.0 mL/min ；g）电离方式：EI；h）电离能量：70 eV；i）进样方式：不分流进样；j）进样量：1 L；k）碰撞气：氩气（纯度99.999%） ，碰撞气压：0.32 Pa；l）数据采集模式：多反应监测（MRM） ，各物质的分析参数参见附录 A；m）溶剂延迟：3 min。6.5.2 标准曲线的绘制将标准工作溶液（4.16）按照上述分析条件（6.5.1）进行实验，以定量离子的峰面积为纵坐标，与其对应的浓度为横坐标，绘制标准工作曲线。在上述分析条件下各标准物的总离子流图参见附录 B。6.5.3 气相色谱-串联质谱定性及定量分析将样品溶液（6.4）按照上述分析条件（6.5.1）进行测定，如果检出的色谱峰的保留时间与GB/T 2015标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所有选择离子对均出现，则可判断样品中存在相应的 N-亚硝胺。采用外标标准曲线法定量，将样品溶液中待测物的色谱峰峰面积代入标准曲线，得到待测物的浓度。样液中待测物的响应值应在标准曲线的线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样分析。6.6 空白实验除不称取试样外，均按步骤 6.16.5 进行。7 结果计算样品中每种 N-亚硝胺的含量，由式（ 1）计算：（1）mVcwAAN40)(560式中：wNA 样品中 N-亚硝胺的质量浓度， g/kg；cA 溶液 A 最终得到的上样溶液（6.4）中 N-亚硝胺的质量浓度， mg/L；c0 空白试验中溶液 A 最终得到的样品溶液（6.4）中 N-亚硝胺的质量浓度，mg/L ；m 样品称样量（6.2） ， g；VA 溶液 A 最终得到的样品溶液（ 6.4）的体积，为 0.001 L；计算结果表示到小数点后一位，当结果超过 100 g/kg 时，表示到个位。样品中可亚硝化物质的含量，由式（2）计算：（2）NABBNSAwmVcw-10)(560式中：wNSA 样品中可亚硝化物质的质量浓度，g/kg；wNA 样品中 N-亚硝胺的质量浓度（式（ 1） ） ，g/kg ；cB 溶液 B 最终得到的样品溶液（6.4）中 N-亚硝胺的质量浓度，mg/L；c0 空白试验中溶液 A 最终得到的样品溶液（6.4）中 N-亚硝胺的质量浓度，mg/L ；m 样品称样量（6.2） ， g；V B 溶液 B 最终得到的样品溶液（6.4）的体积，为 0.001 L；计算结果表示到小数点后一位，当结果超过 100 g/kg 时，表示到个位。8 检出限和定量限本方法对 N-亚硝基乙基苯基胺和 N-亚硝基二苯基胺的测定低限为 2 g/kg，对 N-亚硝基二甲基胺和 N-亚硝基二丁基氨的测定低限为 20 g/kg，对 N-亚硝基甲基乙基胺、N-亚硝基二丙基胺和 N-亚硝基二环己胺的测定低限为 30 g/kg，对其余待测物的测定低限均为 10 g/kg。GB/T 20169 回收率和精密度在试样中定量加入适当已知浓度的标准溶液，按上述检测步骤 6.16.5 进行回收率分析。本标准对 N-亚硝基二甲基胺的回收率为 55，对其余 N-亚硝胺回收率为 80%110%。GB/T 2017附录 A（资料性附录）15 种 N-亚硝胺的名称及其标准品的质谱分析参数表 A.1序号 N-亚硝胺名称 英文名及简称 CAS No.保留时间监测离子对，m/z，(碰撞能量/eV) *1 N-亚硝基二甲 基胺 NDMAN-nitrosodimethylamine 62-75-9 3.67 74.0 44.0 (3)*74.0 42.1 (10)2 N-亚硝基甲基 乙基胺 NMEAN-Nitroso-methyl-ethylamine 10595-95-6 4.60 88.1 71.1 (3)*88.1 57.1 (7)3 N-亚硝基二乙 基胺 NDEAN-nitrosodiethylamine 55-18-5 5.65 102.1 85.1 (3)*102.1 56.1 (11)4 N-亚硝基二异 丙胺 NDiPAN-nitrosodiisopropylamine 601-77-4 8.62 130.15 88.13 (4)*130.15 71.1 (10)5 N-亚硝基 -N-甲基苯胺 NMPhAN-nitroso-N-methyl-N-phenylamine 614-00-6 10.51 106.0 77.0 (14)*106.0 51.1 (25)6 N-亚硝基吗啉 NMORN-nitrosomorpholine 59-89-2 10.70 116.0 86.1 (2)*116.0 56.1 (9)7 N-亚硝基二丙 基胺 NDPAN-nitrosodipropylamine 621-64-7 10.90 130.15 113.2 (3)*130.15 71.1 (12)8 N-亚硝基哌啶 NPIPN-nitropiperidine 100-75-4 12.17 114.1 84.1 (5)*114.1 97.1 (5)9 N-亚硝基 -N-乙基苯胺 NEPhAN-nitroso-N-ethyl-N-phenylamine 612-64-6 12.71 121.1 106.1 (13)*121.1 77.1 (26)10 N-亚硝基二异 丁基胺 NDiBAN-nitrosodiisobutylamine 997-95-5 13.39 115.1 84.1 (2)*141.1 85.1 (7)11 N-亚硝基二丁 基胺 NDBAN-nitrosodibutylamine 924-16-3 15.32 116.1 99.1 (2)*158.2 99.1 (9)12 N-亚硝基二苯 基胺 NDPhAN-nitrosodiphenylamine 86-30-6 19.38 169.1 168.2 (10)*169.1 167.2 (15)13 N-亚硝基二环 己胺 NDCHAN-Nitrosodicyclohexylamine 947-92-2 20.57 129.0 83.2 (7)*210.0 128.2 (7)14 N-亚硝基二苄 基胺 NDBzAN-nitrosodibenzylamine 5336-53-8 21.27 181.1 103.1 (16)*181.1 165.2 (16)15 N-亚硝基二异 壬胺 NDiNAN-nitrosodiisononylamine 1207995-62-7 21.43 169.2 99.15 (9)*169.2 113.2 (5)注：带*为定量离子对GB/T 2018附录 B（资料性附录）15种 N-亚硝胺标准溶液的 MRM色谱图46810214618200240680120 51438912765431 /min图 B.11 N-亚硝基二甲基胺2 N-亚硝基甲基乙基胺3 N-亚硝基二乙基胺4 N-亚硝基二异丙胺5 N-亚硝基 -N-甲基苯胺6 N-亚硝基吗啉7 N-亚硝基二丙基胺8 N-亚硝基哌啶9 N-亚硝基 -N-乙基苯胺10 N-亚硝基二异丁基胺11 N-亚硝基二丁基胺12 N-亚硝基二苯基胺13 N-亚硝基二环己胺14 N-亚硝基二苄基胺15 N-亚硝基二异壬胺GB/T 2019