粮油检验 粮食及其制品中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测-征求意见稿

ICS 点击此处添加 ICS 号点击此处添加中国标准文献分类号LS中 华 人 民 共 和 国 粮 食 行 业 标 准LS/T XXXXXXXXX粮油检验 粮食及其制品中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测Inspection of grain and oils - Rapid determination for organophophate and carbamate pesticide residues in grains点击此处添加与国际标准一致性程度的标识（征求意见稿）XXXX - XX - XX 发布 XXXX - XX - XX 实施国 家 粮 食 和 物 资 储 备 局    发 布XX/T XXXXXXXXXI前  言本标准按照 GB/T 1.12009 给出的规则起草。本标准由国家粮食和物资储备局提出。本标准由全国粮油标准化技术委员会（SAT/TC 270）归口。本标准主要起草单位：本标准主要起草人：XX/T XXXXXXXXX1粮油检验 粮食及其制品中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测1 范围本标准规定了粮食及其制品中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测的原理、试剂及材料、仪器及设备、样品制备、结果计算等内容。本标准适用于粮食及其制品中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测。本标准的方法检出限为 0.1 g/kg 75 g/kg（详见附录 A） 。2 规范性引用文件下列标准对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用标准，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用标准，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量GB/T 5491 粮食、油料检验 扦样、分样法GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 原理样品中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留抑制昆虫酯酶和酶受体发生反应，荧光底物被激活发出荧光信号减弱，通过荧光信号的变化计算该样品的酶抑制率并与限量浓度酶抑制率比较，从而进行快速定性判定。4 试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的二级水。4.1 丙酮：分析纯4.2 乙酸乙酯：分析纯4.3 无水硫酸钠 ：分析纯4.4 乙酸乙酯-丙酮溶液（95+5）：取 5 mL 丙酮加入 95 mL 乙酸乙酯，混匀。4.5 硫酸钠溶液：取 200g 无水硫酸钠，用水溶解后稀释至 1000 mL，混匀。4.7 昆虫酯酶溶液：由农药残留快速检测产品配套提供，或按照其说明书进行配制。4.8 酶受体溶液：由农药残留快速检测产品配套提供，或按照其说明书进行配制。4.9 荧光底物溶液：由农药残留快速检测产品配套提供，或按照其说明书进行配制。XX/T XXXXXXXXX25 仪器和设备5.1 天平：感量 0.01g。5.2 粉碎机：电机转速1000r/min。5.3 分样筛：20 目。5.4 空气吹干仪：温度45。5.5 漩涡振荡器。5.6 离心机：转速4500 r/min。5.7 离心管：10 mL。5.8 螺口带盖检测微管：1.5 mL。 5.9 孵育器：温度35。5.10 荧光检测仪：激发波长 460 nm-550 nm，发射波长 590 nm。6 样品制备6.1 扦样与分样按照 GB/T 5491 执行。6.2 样品粉碎用粉碎机（5.2）将样品粉碎至全部通过分样筛（5.3） ，充分混合均匀。6.3 样品提取称取试样 0.5 g（精确至 0.01g）于 10 mL 的离心管（5.7 ）中，加入 2mL 硫酸钠溶液（4.5） ，再加入 2 mL 乙酸乙酯 -丙酮溶液（ 4.4） ，混匀。在 4500 r/min 下离心 2 min，取 100L 上清液至 2 mL 离心管（5.7）中，在 45下用空气吹至近干。加入 1mL 水复溶，此溶液为待测溶液 A。6.4 测定步骤准确吸取 100L 待测溶液 A（6.3）加入检测微管（5.8）中，然后加入 50 L 昆虫酯酶溶液（4.7） ，混匀。将微管置于 35的孵育器（5.9）中，孵育 10 min。向微管底部加入 50 L 酶受体溶液（4.8） ，混匀。将微管置于 35的孵育器（5.9）中，孵育 5 min。然后微管加入 1 mL 荧光底物溶液（4.9） ，用荧光检测仪读取数据。注：30 秒内完成荧光底物溶液（4.8）的添加，避免产生气泡影响检测。6.5 空白试验除不加试样外，空白试验应与测定平行，并采用相同的分析步骤。7 结果分析XX/T XXXXXXXXX37.1 结果计算结果以样品中的农药残留对酶的抑制的程度（酶抑制率）表示，酶抑制率按式（1）计算：（1）010()/yI式中：酶抑制率（%）y空白试验响应值0I待测样品响应值1计算结果保留三位有效数字。7.2 结果判定7.2.1 选择目标农药种类根据样品基质种类、来源及产地农残监测情况和施药指南情况，确定可能的目标农药种类。7.2.2 数据库检索从限量抑制率数据库中检索相应的农药残留抑制率，得到该基质限量浓度下所有目标农药残留抑制率，选取最低的抑制率作为最终的判定抑制率。7.2.3 判定方法当样品的抑制率高于判定抑制率，表示样品中可能有高剂量有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留存在，该样品判定为疑似阳性样品，对疑似阳性样品，需用参考方法进一步复检，确定具体农药的种类和含量。当样品的抑制率低于判定抑制率，表示样品中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留较低，该样品判定为阴性样品。报告时应标明对何种目标农药残留呈疑似阳性或阴性。XX/T XXXXXXXXX4A A附 录 A（规范性附录）表 A 方法检出限英文名称 中文名称 农药检测限 （g/kg） 代谢产物检测限 （g/kg ）Phoxim 辛硫磷 0.5Azinphosmethyll 谷硫磷 0.3Carbophenothion 三硫磷 2 0.3Carbophenoxon 杀螨硫磷 0.3Chlorfenvinphos 毒虫畏 0.5Chlorpyriphos 毒死蜱 50 0.3Coumaphos 蝇毒磷 50 0.1Crotoxyphos 巴毒磷 0.25Crufomate 育畜磷 4Diazinon 二嗪磷 2.5Dichlorvos (DDVP) 敌敌畏 0.25Dimethoate 乐果 12.5Disulfoton 乙拌磷 3.5EPN 苯硫磷 0.1Ethion 乙硫磷 2.5 0.6Ethoprop 灭线磷 5Fenamiphos 苯线磷 7Fensulfothion 丰索林 75 0.2Fenitrooxon 杀螟氧磷 0.1Fenitrothion 杀螟硫磷 20 0.1Fonofos 地虫硫磷 75 0.1Leptophos 溴苯磷 0.2Leptophosoxon 溴苯氧磷 0.2Malaoxon 马拉氧磷 0.7Malathion 马拉硫磷 2Methidathion 杀扑磷 0.6Methyl paraoxon 甲基对氧磷 0.1Methyl parathion 甲基对硫磷 0.1Mevinphos 速灭磷 0.1Monocrotophos 久效磷 50Naled 二溴磷 0.2XX/T XXXXXXXXX5Paraoxon 对氧磷 0.2Parathion 对硫磷 20 0.1Phorate 甲拌磷 0.6Phorateoxon 氧甲拌磷 0.6Phosalone 伏杀硫磷 60 0.1Phosphamidon 磷胺 20Phosmet 亚胺硫磷 0.5Primiphosmethyl 甲基嘧啶磷 50 0.15Profenofos 丙溴磷 0.5Tetrachlorvinphos 杀虫畏 0.3Triazophos 三唑磷 0.1Trichlorfon 敌百虫 1Aldicarb 涕灭威 12Carbaryl 甲萘威 0.2Carbofuran 克百威 5Isoprocarb 异丙威 2.5Methiocarb 甲硫威 0.3Oxamyl 杀线威 12Propoxur 残杀威 11XX/T XXXXXXXXX6附 录 B（规范性附录）B.1 限量抑制率数据库的建立以 GB 2763-2016 食品中农药最大残留限量为基础，进行空白基质限量浓度加标，分别测定每个样品的抑制率，每天测试 6 个平行，测试 3 天，限量抑制率按式（2）计算：（2）(1.74)0MRLmyS式中：限量酶抑制率（% ）MRLy空白基质限量浓度加标的抑制率平均值。m标准偏差。S日内相对标准偏差应小于 20%，日间相对标准偏差应小于 25%。表 B.1 限量抑制率数据库模板限量抑制率/%基质 1 基质 n农药 1农药 2农药 3 -农药 n_