微生物学沙门菌弧菌PPT课件

第三节 沙门菌属 (Salmonella),1.种类繁多（血清型超过2500个)2.宿主范围广，多对动物致病3.只对人类致病的占少数 伤寒沙门菌 甲型副伤寒沙门菌 肖氏伤寒沙门菌 希氏伤寒沙门菌4. 动物沙门菌也可对人致病 鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌 、肠炎沙门菌、鸭沙门菌,1,一、 生物学性状,形 态 染 色,2,1.未接种细菌,3.分解乳糖和葡萄糖产酸产气、硫化氢阴性,2.分解乳糖和葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性,4.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢,5.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢,主要生化特性,3,4,5,主要沙门菌的生化特性,6,抗原结构（O抗原、H抗原、Vi抗原）1、沙门菌“O”抗原- 耐热菌体抗原用阿拉伯数字 1、2、3、表示（从167），实际上共有58种。不同沙门菌可有相同的O抗原，故将有共同O抗原沙门菌归一群（组），共可分40多组。引起人类疾病的沙门菌，其O抗原大多属于AE组（P126 表10-5）。,7,2、沙门菌“H”抗原- 不耐热鞭毛抗原H抗原分为第 1 相、第 2 相第 1 相特异性高，以英文小写字母表示第 2 相特异性较低，以阿拉伯数字表示各组沙门菌可依H抗原不同分种、型，H 抗原为特异性抗原。化学本质为蛋白质。,8,3、沙门菌“Vi”抗原- 表面抗原少数沙门菌（伤寒杆菌等）新从病人体内分离标本常有表面抗原Vi-virulence 毒力Vi抗原可阻断O抗原与相应抗体的凝集，在细菌鉴定中应予注意。Vi抗原可刺激机体产生低效价抗体，随细菌清除，此抗体消失，故测定Vi抗体有利于检出带菌者。,9,二、致病性,1、侵袭力沙门菌有毒株经口感染 小肠末端派伊尔淋巴结M细胞 被吞噬 在吞噬细胞内增殖（不完全吞噬）,致病物质,10,2、内毒素 导致体温升高、白细胞数变化等,3、肠毒素 个别沙门菌可产生肠毒素（鼠伤寒），作用 与大肠杆菌、霍乱弧菌肠毒素相似，引起胃肠炎,致病物质,11,致病菌 伤寒沙门菌，副伤寒甲、乙等沙门 传染源 病人、带菌者（尤为重要） 传播途径 经粪-口途径传播 易感者 人群普遍易感,所致疾病,1、肠热症（伤寒、副伤寒）,12,血流（第？次菌血症、内毒素）,全身淋巴组织中大量增殖 （肝、脾、肾、骨髓）,伤寒沙门菌,肠粘膜局部淋巴组织中增殖,局部炎症、症状,加重局部炎症 溃疡、穿孔,全身症状（发热、不适、全身疼痛） 潜伏期/前驱期（病程第1周）,全身症状（稽留高热 肝脾肿大等） 极期（病程第2-3周）,13,整个病期约一个月左右,少数患者病后带菌（肠道内、胆囊带菌）成为重要的传染源,感染后体内有抗体产生，但对胞内菌无免疫作用，常用抗体测定作为伤寒病的辅助诊断肥达反应。,细胞免疫逐渐增强 细胞内细菌被清除,逐步痊愈,病后免疫以细胞免疫为主，终身免疫,14,因摄入大量（108）其它沙门菌污染食物后引起 潜伏期 6-12小时 主要表现 恶心、呕吐、腹痛、腹泻、发热持续3-5天,2、胃肠炎（食物中毒）,15,3、败血症,多见小儿及免疫功能低下者 病原菌为其它沙门菌（猪霍乱、鼠伤寒等） 可致全身感染，败血症、脑膜炎、骨髓炎、心内膜炎等。局部胃肠炎少见。,4、无症状带菌者,多见伤寒、副伤寒患者 带菌部位 胆囊 与年龄性别关系密切,16,三、微生物学检查,伤寒病人按病程不同取不同标本,第一周,第二周起,病程全程,食物中毒者取排泄物、呕吐物、可疑食物,败血症患者取血液,细菌的分离鉴定,标本,血,尿、粪便,骨髓,17,细菌分离鉴定步骤,粪便、尿,增菌培养,SS 中国兰,挑取不发酵 乳糖菌落,血清学鉴定：直接玻片凝集,伤寒杆菌表现葡萄糖 +乳糖 动力 +H2S +/,双糖管,18,19,用已知的伤寒杆菌“O” 、“H”抗原及副伤寒甲、乙的“H”抗原与不同稀释度的病人血清作试管凝集试验。根据血清中抗体效价及动态变化，可作为伤寒、副伤寒病人的辅助诊断试验。,血清学试验 肥达反应（Widal test),概念,20,1、正常效价 O抗体 1:80 H抗体 1:160PA抗体 1:80 PB抗体 1:80 2、病程中动态观察二份血清,第二次效价增长四倍以上有意义 3、O、H抗体的区别O-Ab-IgM （特点）H-Ab-IgG （特点）,分析肥达反应结果,21, O、H均不增高伤寒、副伤寒可能性小 O增高、H不增高感染早期、其它沙门 菌感染O不增高、H增高预防接种后、非特异性回忆 反应 O、H均增高伤寒、副伤寒可能性大4、抗体始终不升高的可能因素早期使用抗生素、免疫功能低下等,22,例：发热两周后入院，肥达反应结果如下,甲：O 1:160 H 1:80 PA 1:40 PB 1:40,乙 O 1:80 H 1:320 PA 1:40 PB 1:40,丙 O 1:160 H 1:80 PA 1:40 PB 1:320,丁 O 1:320 H 1:640 PA 1:40 PB 1:40,23,伤寒病人微生物检查阳性率,系列1-尿液中细菌培养；系列2-血液中细菌培养； 系列3-粪便中细菌培养；系列4-肥达反应抗体效价,阳 性 率,病程：发 病 后 周 次,24,细菌培养（按前面步骤进行） Vi抗体效价测定 Vi抗体 1：10 有意义。,四、防治原则（了解）, 预防接种：死菌苗、活菌苗（Ty21a株）, 彻底治疗病人及带菌者, 注意饮食卫生，防止病从口入,伤寒带菌者检查,25,变形杆菌属（简述 P181 ）,变形杆菌属肠杆菌科 有周身鞭毛，运动活泼，培养基中迁徙生长 能分解尿素（重要特征） 主要引起各种创伤感染、尿路感染等,变形杆菌的迁徙生长现象,26,变形杆菌的迁徙生长现象,27,变形杆菌某些菌株的菌体抗原，与部分立克次体间有共同抗原成分。因此可用变形杆菌作为抗原与立克次体感染者血清做交叉凝集反应，称外裴试验（Weil-Felix test)辅助诊断斑疹伤寒等疾病,外裴试验,28,第11章 弧菌属 (Vibrio),为一大群菌体弯曲呈弧状的革兰阴性菌主要特点：有单鞭毛，运动活泼培养要求为碱性环境自然界广泛分布, 尤其是水体中，致病菌主要有霍乱弧菌、副溶血性弧菌。 与肠杆菌科不同的是氧化酶试验阳性。,29,自1817年已发生过7次世界性霍乱大流行，前6次由霍乱弧菌古典生物型引起，第7次由霍乱弧菌El Tor生物型引起。 霍乱弧菌古典生物型的发现与命名1854年首次发现，1884年分离成功-Koch,第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌病原菌的发现与命名,30, EI Tor 弧菌的发现与命名1905年在埃及EI Tor检疫所检出，当时未发现与霍乱发病有关系。1961年确定为霍乱病原菌，命名为EI Tor 型霍乱弧菌 1992年出现新流行菌株O139，是目前在东南亚各国流行的主要病原菌，这是首次由非O1群霍乱弧菌引起的流行,霍乱弧菌病原菌的发现与命名,31,一、生物学性状, 形态与染色G 弧形，有单鞭毛，运动十分活泼。,霍乱弧菌 扫描电镜 15000,32,33,营养要求不高，普通培养基上 生长良好。 耐碱怕酸 pH8.89.0 碱性蛋白胨水/碱性琼脂平板。 霍乱弧菌可在无盐的环境中生长，其他弧菌不能。, 培养特性,34,35,霍乱弧菌具有 O 抗原、H 抗原 O 抗原 目前发现的已有155个血清群，O1、O139群引起霍乱，其他血清群引起人类胃肠炎等疾病。 O1群又可分为3个血清型。, 抗原构造与分型,36,霍乱弧菌O1群血清型,37, 抗原构造与分型,根据表型差异，O1群霍乱弧菌的每一个血清型还可分为2个生物型。,38,39,40, 1992年在印度、盂加拉国暴发O139 群霍乱流行。O139 群在抗原性方面与O1 群无交叉。WHO规定， 霍乱的病原体包括O1群和O139 群霍乱弧菌, O-1群 有3个血清型， 每一血清型均含有 二种生物型，古典生物型、 EI Tor 生物型, 二种生物型均可引起霍乱流行,41, 抵抗力,对酸、含氯的化学 消毒剂敏感 正常胃酸4 min 漂白粉：水= 1：4 ，1h,42,二、致病性,致病物质 1、侵袭力鞭毛-穿透能力强，穿过肠道粘液层，有利于细菌粘附于肠壁上皮细胞。菌毛-定居因子，是细菌定居于小肠粘膜上皮细胞的重要因素。2、霍乱肠毒素,43,44,45,霍乱肠毒素化学结构与致病机理,性质 外毒素，是肠毒素的典型代表,结构 A+B亚单位构成，A是毒性部分，B是运载和保护部分,致病机理 B与肠粘膜上皮细胞受体(GM1) 结合，形成穿膜孔道 A进入细胞内， 作用于细胞内腺苷环化酶 细胞内 cAMP 分泌增多再吸收 剧烈吐泄,46,47,2、所致疾病-霍乱 传染源 病人，带菌者 传播途径 经口传播 人类为唯一易感者霍乱弧菌对酸敏感，正常胃酸可杀死细菌。 霍乱弧菌肠毒素作用后，引起剧烈腹泻、呕吐，典型病例大便为米泔水样。病人可严重脱水、酸中毒；最终因循环衰竭，死亡。 未经治疗者死亡率高达50%75%,48,3、免疫性,牢固的终身免疫 以体液免疫为主，出现保护性抗肠毒素抗体、抗菌抗体。 O139与O1 之间无交叉免疫：抗原基因由rfb区域编码，O139弧菌O抗原基因大部分缺失，使O-1菌苗对O139弧菌不起作用。,49,三、微生物学检查,霍乱为烈性传染病，传播速度极快。 对首例病例要及时诊断，封锁疫区，上报疫情。 一般根据病情诊断，必要时将可疑物密封保存于碱性蛋白胨水，送上级检疫部门。,直接镜检-动力、染色,分离培养-碱性培养基,快速诊断-免疫荧光,血清学鉴定,检查步骤,50,51,O1群霍乱弧菌死菌苗肌肉注射 目前疫苗的研制转向口服疫苗、基因 工程减毒活疫苗 治疗：补液、抗菌,防治原则,52,嘉兴市秀城区某餐厅因承办婚宴发生一起食物中毒事件。2004年4月28日中午12时左右，婚宴10桌，100人就餐。从当日17时起，就餐人群开始出现病人，至次日11时，中毒病人31人，罹患率为31。症状主要为腹痛、腹泻、恶心、呕吐等胃肠道症状。副溶血性弧菌广泛生存近岸海水和鱼贝类等食物中，温、热地带较多。我国华东沿海该菌的检出率为57.466.5，尤以夏秋季较高。海产鱼虾的带菌率平均为4548，夏季可高达90。腌制的鱼贝类带菌率也可达42.4。,53,第五节 副溶血弧菌（了解）,副溶血弧菌（原名-嗜盐弧菌） 主要引起疾病-食物中毒 特点： 细菌嗜盐，易污染海产品，在海水中可存活50天。 培养要求3.5% 氯化钠 潜伏期短，几小时即可发病。症状严重，可有水样、血水样便。恢复较快。,54,TCBS培养基：显示绿色菌落，非蔗糖发酵,55,第12章 幽门螺杆菌（HP）,G-杆菌，弧形、S形或螺旋状 营养要求高，生长缓慢 尿素酶试验强阳性 抵抗力弱，易产生耐药性,生物学性状,Helicobacter pylori，是螺杆菌属的代表菌种,56,致病性,感染普遍，粪-口传播 与胃炎、十二指肠溃疡及胃癌有关 （1983年，澳大利亚皇家医院内科医生马歇尔、沃伦，2005年医学诺贝尔奖获得者） 致病物质及致病机制不详,幽门螺杆菌,57,幽门螺杆菌,微生物学检查,有创检查 直接涂片脲酶试验分离培养 无创检查 碳标记呼吸试验血清学试验,传统方法,新法 PCR、核酸探针技术,治疗 抗生素（联用），痢特灵（呋喃唑酮）,58,Salmonella 沙门菌属 Widal test 肥达反应 Vibrio 弧菌属 V.cholera 霍乱弧菌 non-agglutinating Vibrio, NAG 不凝集弧菌,本章专业英语词汇,59,了解主要沙门菌的生化反应。 伤寒沙门菌的主要致病因素及伤寒发病过程。 何谓肥达反应？如何观察分析肥达反应结果？ 弧菌属的O抗原分型及与霍乱发病的关系。 霍乱弧菌的致病因素。 霍乱肠毒素的致病机理。,本 章 要 点,60,