微生物学化脓性细菌PPT课件

1,微生物学各论,三性两法生物学性状 微生物学检查法致病性免疫性 防治法,2,第十四章 化脓性细菌,3,化脓性细菌：一类能够感染人体并引起化脓性炎症的细菌。常引起创伤感染和医院内感染。 根据革兰染色性的不同可分成 G+菌：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等 G-菌：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、铜绿假单胞菌等。,4,第一节 葡萄球菌属 (Staphylococcus),对人类致病的主要是金黄色葡萄球菌（S.aureus）。,5,分布广泛，是最常见的化脓性球菌 医院内交叉感染的重要传染源 所致疾病 化脓性炎症 食物中毒 烫伤样皮肤综合征 毒性休克综合征 耐药率高,6,1、形态与染色 球形或椭圆形，平均直径1m，典型排列呈葡萄串状； 无鞭毛，无芽胞，体外培养时一般不形成荚膜； 革兰染色阳性。 衰老、死亡或被中性粒细胞吞噬后易G。,一、生物学性状,7,脓标本革兰染色镜检,8,2、培养特性,营养要求不高，耐盐，最适生长温度为37，最适pH为7.4。 在普通琼脂平板上孵育2448h后，形成S型（光滑）菌落。 可产生脂溶性色素，菌落呈现金黄色、白色、柠檬色不同的颜色。 血琼脂平板上，致病性葡萄球菌形成明显的全透明溶血环（溶血）。,9,三种葡萄球菌培养,琼脂培养基,金黄色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,腐生葡萄球菌,金黄色色素,白色色素,柠檬或白色色素,致病力强,条件致病菌,一般不致病,10,金黄色葡萄球菌金黄色菌落,11,金黄色葡萄球菌血平板,12,3、生化反应,触酶阳性；可与链球菌区别 多数菌株能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖； 致病株能分解甘露醇。,13,4、抗 原 结 构,14,葡萄球菌A蛋白(staphylococcus A protein ，SPA)是葡萄球菌细胞壁的一种表面蛋白，可与人类免疫球蛋白IgG的Fc段非特异性结合，而IgG分子的Fab段仍能同相应抗原分子特异性结合，介导完成协同凝集试验。,15,意义：,I. 含SPA的葡萄球菌可作为载体，结合特异性抗体后，开展简易、快速的协同凝集试验，检测多种微生物抗原。,16,II. SPA 与IgG结合后的复合物具有抗吞噬、促细胞分裂、引起超敏反应、损伤血小板等多种生物学活性。,17,荚膜：体内的大多数金黄色葡萄球菌有荚膜，有粘附作用，与细菌侵袭力有关。 多糖抗原：具有群特异性，存在于细胞壁。,18,5、抵抗力,葡萄球菌在无芽胞菌中抵抗力最强。60 1h或8030分钟才被杀死。 对碱性染料敏感，龙胆紫可抑制其生长。 对许多抗生素敏感，但易产生耐药性。近年来出现的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）已成为医院感染最常见的致病菌。,19,根据色素与生化反应根据噬菌体：分为5个噬菌体群和26个噬菌体型。,金黄色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,腐生葡萄球菌,6、分类,20,二、致病性与免疫性,致病物质所致疾病,21,（一）致病物质,毒素细胞毒素（、杀白细胞素）、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1、肠毒素等。 酶凝固酶、纤维蛋白溶酶、耐热核酸酶、透明质酸酶、脂酶等。 其他粘附素、荚膜、胞壁肽聚糖等。,22,凝固酶（coagulase）,能使含有枸橼酸钠或肝素抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质。 作用： 抗吞噬作用（纤维蛋白沉积细菌表面） 保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏 使感染易于局限化和形成血栓 意义：鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。,23,葡萄球菌溶素（膜损伤毒素）： 损伤细胞膜的毒素，主要是溶素。 溶素对多种哺乳动物RBC有溶血作用。对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞等均有损伤作用。 溶素是一种外毒素，可制成类毒素。 杀白细胞素：攻击中性粒细胞和巨噬细胞，能抗吞噬和增强病菌的侵袭力。,24,肠毒素（enterotoxin）,约1/3临床分离的金黄色葡萄球菌可产生肠毒素。 耐热的外毒素 引起急性胃肠炎即食物中毒。 作用机制：到达中枢神经系统后刺激呕吐中枢而导致以呕吐为主要症状的食物中毒。,25,表皮剥脱毒素（exfoliatin）,蛋白质外毒素，使表皮和真皮脱离。 可引起烫伤样皮肤综合征（staphylococcal scalded skin syndrome, SSSS），又称剥脱性皮炎，多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人。,26,毒性休克综合征毒素-1 （ TSST-1）,TSST-1可引起机体发热，增加对毒素的敏感性； 可引起机体多个器官系统的功能紊乱或毒性休克综合征（TSS）。,27,其他,耐热核酸酶（heat-stable nuclease） 致病性葡萄球菌能产生该酶。耐热，经10015min或60 2h不被破坏；能较强的降解DNA和RNA。耐热核酸酶可作为测定葡萄球菌有无致病性的重要指标之一。,28,（二）所致疾病,1、化脓性感染: 化脓性炎症大多由致病性较强的金葡菌引起。 （1）局部感染：疖、痈、毛囊炎、甲沟炎、蜂窝组织炎、脓胸、伤口化脓 （2）全身感染：败血症、脓毒血症特点：脓液稠厚，不易扩散,29,化脓性感染,疖,痈,:,30,化脓性感染,31,2、毒素性疾病食物中毒由葡萄球菌肠毒素引起。为毒素性食物中毒，16h出现症状，以呕吐为主要症状，大多于12d内恢复。,32,假膜性肠炎是一种菌群失调性肠炎。主要表现为腹泻。病理特点是肠粘膜被一层炎性假膜覆盖。现认为主要由艰难梭菌所致，金黄色葡萄球菌仅为伴随菌。,33,烫伤样皮肤综合征由表皮剥脱毒素引起，导致表皮上层脱落。,34,毒性休克综合征由毒性休克综合征毒素-1引起，主要表现为急性高热、低血压、腥红热样皮疹伴脱屑。严重时出现休克。,35,（三）免疫性,人类对葡萄球菌有一定的天然免疫力。 患病后，能获得一定的免疫力，但不强。,36,幼猫试验,三、微生物学检查法,标本,脓汁、血液、脑脊液、剩余食物、呕吐物等,分离培养 与鉴定,触酶 血浆凝固酶 发酵甘露醇 耐热核酸酶,直接涂片镜检,革兰阳性葡萄球菌,生长现象,色素、溶血等,生化反应,毒素检查,37,致病性葡萄球菌的主要鉴别依据,金黄色色素 溶血 凝固酶阳性 耐热核酸酶阳性 分解甘露醇,38,四、防治原则,防,注意 消毒隔离,注意 个人卫生,防止 医源性感染,防止 耐药性产生,治,抗菌素 药敏试验,自身菌苗疗法,39,第二节 链球菌属 （Streptococcus）,对人类致病的主要是A群链球菌和肺炎链球菌。,40,1、形态与染色 球形或椭圆形，呈链状排列。 无芽胞，无鞭毛。培养早期（24h）形成透明质酸的荚膜。 细胞壁外有菌毛样结构，含有型特异性M蛋白。 革兰染色阳性。,一、生物学性状,41,42,2、培养特性,营养要求较高，需补充血液、血清、葡萄糖等。 在血清肉汤中易形成长链，管底呈絮状沉淀。 在血琼脂平板上形成灰白色半透明、表面光滑、边缘整齐的菌落，不同菌株溶血不一。,43,3、生化反应,分解葡萄糖，产酸不产气。 触酶阴性。 链球菌一般不分解菊糖，不被胆汁溶解，这两特性可用来鉴别甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌。,44,4、抗原结构,蛋白质抗原：或称表面抗原。具有型特异性。A群链球菌有M、T、R和S不同性质的蛋白质抗原，与致病性有关的是M抗原。 多糖抗原：或称C抗原。是群特异性抗原，是细胞壁的多糖组分。 核蛋白抗原：或称P抗原。无特异性。,45,5、分类,根据溶血现象分类 根据抗原结构的分类,46,根据溶血现象分类,甲型溶血性链球菌：草绿色溶血环，称甲型溶血或溶血，溶血环中的红细胞并未完全溶解。多为条件致病菌。 乙型溶血性链球菌：完全透明溶血环，称乙型溶血或溶血，溶血环中的红细胞完全溶解，致病力强。 丙型链球菌：无溶血环，又称不溶血性链球菌。一般不致病。,47,48,根据抗原结构的分类,按多糖抗原，可分成20群。对人致病的链球菌菌株，90%左右属A群。 A群根据其M抗原不同，可分为100个型。,49,6、抵抗力,抵抗力比较弱。 对常用消毒剂敏感。 对青霉素、红霉素，四环素和磺胺药都很敏感。青霉素是治疗首选药物，极少发现有耐药菌株。,50,二、致病性与免疫性,51,（一）致病物质,链球菌溶素（streptolysin）致热外毒素（pyrogenic exotoxin） 透明质酸酶,脂磷壁酸 M蛋白 链激酶（streptokinase; SK） 链道酶（streptodornase; SD）,52,1、毒素,致热外毒素（红疹毒素猩红热毒素） 是人类猩红热的主要毒性物质。 由A群链球菌溶原菌菌株产生。,53,根据对氧的稳定性可分为： SLO (链球菌溶素O)： 对O2敏感，氧化后即失去溶血活性。 抗原性强，可刺激机体产生SLO抗体（即抗“O”）， 常用于风湿热活动性及肾小球肾炎的辅助诊断。（1:400） SLS (链球菌溶素S)： 对O2稳定 破坏红细胞 无免疫原性，不产生抗体。,链球菌溶素:,54,2、侵袭性酶,透明质酸酶 又名扩散因子 能分解细胞间质的透明质酸，使病菌易在组织中扩散。,55,链激酶（streptokinase; SK）,能使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶，可溶解血块或阻止血浆凝固，有利于病菌在组织中扩散。,链道酶（streptodornase; SD）,亦称链球菌DNA酶。能降解脓液中具有高度粘稠性的DNA，使脓液稀薄，促进病菌扩散。,56,3、细胞壁成分,脂磷壁酸（LTA）围绕在M蛋白外层，与M蛋白共同组成链球菌的菌毛样结构。 与人类多种细胞膜上的受体结合，使细菌能定植在皮肤和粘膜表面。 M蛋白,有抗吞噬和抵抗吞噬细胞内的杀菌作用 与某些超敏反应疾病有关,57,58,（二）所致疾病,A群链球菌为主，占90% 化脓性（淋巴管炎、淋巴结炎、扁桃体炎、咽炎、中耳炎等） 中毒性 猩红热 超敏反应性 风湿热 急性肾小球肾炎,59,猩红热皮疹,小儿猩红热,60,61,（三）免疫性,可获得对同型链球菌的特异性免疫力。 但因其型别多，各型间无交叉免疫力，故常可反复感染。 患猩红热后能建立牢固的同型抗毒素免疫。,62,三、微生物学检查法,标本：脓液、咽拭子 直接涂片镜检 分离培养与鉴定接种在血琼脂平板 如有溶血菌落，应与葡萄球菌区别 溶血菌落，要和肺炎链球菌鉴别,63,血清学诊断,抗链球菌溶血素O试验（antistreptolysin O test, ASO test）SLO+RBC 溶血SLO+患者血清+RBC 不溶血,结果：效价大于400单位 意义：风湿热及其活动性的辅助诊断,64,四、防治原则,减少传染源 注意消毒 治疗患者以青霉素G为首选药物，须治疗彻底，防止超敏反应性疾病的发生。,65,第三节 肺炎链球菌 （S.pneumoniae）,66,G+双球菌，呈矛尖状 培养：营养要求高。在血平板上的菌落细小、圆形略扁、灰白色半透明，菌落周围出现草绿色溶血环，培养时间 48小时，菌落呈脐状 生化反应：与甲型链球菌的鉴别菊糖发酵试验、胆汁溶菌试验,一、生物学性状,67,肺炎球菌,68,肺炎链球菌菌落-扁平状,69,肺炎链球菌落-脐状,70,二、致病性,致病物质 荚膜 肺炎链球菌溶素O 脂磷壁酸 神经氨酸酶 所致疾病 大叶性肺炎 化脓性中耳炎、胸膜炎、脓胸、脑膜炎或败血症,71,三、微生物学检查法,标本：取痰液、脓汁、血液或脑脊液等 直接涂片镜检 分离培养与鉴定：（与甲型溶血性链球菌鉴别） 胆汁溶菌试验 Optochin试验 荚膜肿胀试验 动物试验：少量具有毒力的肺炎链球菌注入小鼠腹腔内，一般24h内死亡。,72,右侧：肺炎链球菌（澄清、透明） 左侧：甲型溶血性链球菌（浑浊）,胆汁溶菌试验,73,四、防治原则,荚膜多糖多价疫苗 治疗前作常规药物敏感试验,74,第四节 奈瑟菌属 （Neisseria）,75,概述,革兰阴性双球菌。无鞭毛。无芽胞。有荚膜和菌毛。 种类 脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis） 淋病奈瑟菌（N. gonorrhoeae） 干燥奈瑟菌（N. sicca）、浅黄奈瑟菌（N. subflava）、金黄奈瑟菌（N. flavescens）、粘膜奈瑟菌（N. mucosa）等,76,一、脑膜炎奈瑟菌 （meningococcus）,77,（一）生物学性状,形态与染色：肾形或豆形革兰阴性双球菌，新分离菌株大多有荚膜和菌毛。 培养特性：营养要求较高，常用巧克力（色）培养基。专性需氧，5% CO2 条件下生长更佳。菌落为圆形光滑似露滴状。血平板上不溶血。 抵抗力：很弱。对干燥、热力、消毒剂等均敏感。,78,脑膜炎双球菌,79,A B,A.脑膜炎奈瑟菌在血琼脂平板上的菌落特征(18-24h) B.脑膜炎奈瑟菌在巧克力琼脂平板上的菌落特征(18-24h),80,（二）致病性,致病物质 侵袭力：荚膜和菌毛 毒素：内毒素，是脑膜炎奈瑟菌的主要致病物质。 所致疾病 流行性脑脊髓膜炎（简称流脑）主要经飞沫传播：鼻咽部炎症-败血症-脑膜炎,81,标本,分离培养与鉴定,脑脊液、血液、出血点渗出液、鼻咽拭子 保暖、保湿、立即送检，培养基预温。 最好床边接种。,直接涂片镜检,中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌，可作出初步诊断。,巧克力（色）培养基，5% CO2气体。 生化反应和玻片凝集试验鉴定。,快速诊断,对流免疫电泳，SPA协同凝集试验,（三）微生物学检查法,82,（四）防治原则,流脑荚膜多糖疫苗（A+C）进行特异性预防。 注意隔离治疗流脑患者，控制传染源。 流行期间儿童可口服磺胺药物等预防。,83,二、淋病奈瑟菌 （gonococcus）,84,（一）生物学性状,形态与染色：革兰阴性双球菌，似一对咖啡豆。无芽胞。无鞭毛。有荚膜和菌毛。 培养特性：专性需氧，初次分离培养时需供给5% CO2。营养要求高，巧克力（色）血琼脂平板是适宜培养基。 抵抗力：热、冷、干燥和消毒剂极敏感，1%石炭酸 3 min或1:4000硝酸银2 min即死亡。,85,Neisseria gonorrhoeae Gram stain of pure culture,Neisseria gonorrhoeae Gram stain of a pustular exudate,Neisseria gonorrhoeae,淋病奈瑟菌,86,致病物质菌毛：粘附作用；抵抗吞噬。 外膜蛋白：有助于粘附。 IgA蛋白酶：能破坏黏膜表面sIgA。 内毒素：损害人体黏膜的重要因素。,87,人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主。 主要通过性接触引起泌尿道和生殖系统炎症。,淋病,新生儿 淋菌性结膜炎,新生儿由产道感染,所致疾病,88,（三）微生物学检查法,标本,用无菌棉拭沾取,直接涂片镜检,在中性粒细胞内发现有革兰阴性双球菌时，有诊断价值,分离培养与鉴定,标本采集后应注意保暖保湿，立即送检接种,泌尿生殖道脓性分泌物 子宫颈口表面分泌物,巧克力色平板，510% CO2气体,89,（四）防治原则,防,开展防治性病的知识教育,防止不正当的两性关系,治,新生儿1%硝酸银滴眼。,抗生素。参考体外药敏试验。 对青霉素、头孢胺噻肟钠、环丙沙星、壮观霉素等多种抗生素敏感，近年报告耐药菌株增多。,90,Purulent conjunctivitisOphthalmia neonatorum Infection in newborns during vaginal delivery,91,第五节 假单胞菌属 Pseudomonas,92,一类G-杆菌，种类繁多，其中铜绿假单胞菌是一种常见的条件致病菌，也是院内感染常见菌。 因在生长过程中产生绿色水溶性色素，感染后的脓汁或敷料上出现绿色，故俗称绿脓杆菌。,93,直或微弯G杆菌，有荚膜，单端有13根鞭毛，运动活泼。,革兰染色,荧光染色,电镜图,形态特征,94,需氧，4不生长，42生长。可产生带荧光的绿色水溶性色素，有溶血环。,血平板上细菌生长,普通培养基上细菌生长,培养特性,95,临床表现,多见于皮肤粘膜受损部位（烧伤和创伤等）与机体免疫力下降病人，表现为局部化脓性炎症和全身感染。引起中耳炎、角膜炎、尿道炎、胃肠炎、 心内膜炎、脓胸，也可引起菌血症、败血症及引起婴儿严重的流行性腹泻。 医源性感染。,96,本章主要内容小结,葡萄球菌和链球菌的生物学性状、致病性、微生物学检查方法。 致病性葡萄球菌的鉴别要点、抗O试验。 其它球菌主要的生物学特点、致病性。,