超敏反应及其检测PPT课件

超敏反应性疾病与免疫学检验（hypersensitivity and immunoassays）,教学内容前 言 第一节 型超敏反应第二节 型超敏反应 第三节 型超敏反应第四节 型超敏反应,1,目的要求1掌握超敏反应的概念、特点、分型；各型的发生机制。2熟悉各型超敏反应的免疫学检测及临床常见疾病。,2,变态反应(allergy) 超敏反应(hypersensitivity) ： 是机体受抗原持续刺激或再次受到相同抗原刺激后发生的一种异常或病理性的免疫应答。变应原(allergen )及变应原性质 类型：见下图 I型(速发型) 最常见 型(细胞毒型或细胞溶解型) 型(免疫复合物型或血管炎型) 型(迟发型)特点：特异性，记忆性，病理性，可转移性。,3,类型（1963年Gell和Coombs）,4,第一节 I型超敏反应性疾病与免疫学检验, 特点：主要由IgE抗体介导，发作迅速、强烈，但消退亦快；常引起机体生理功能紊乱，但无严重的组织细胞损伤；有明显的个体差异，与机体的遗传素质有关；效应器官：平滑肌，粘膜，毛细血管，皮肤等。 特应性素质个体： 过程：速发相和迟发相。,5,一、发生机制(一)致敏阶段1变应原 如图 吸人性变应原 食入性变应原 某些药物 动物免疫血清 2特异性IgE抗体的产生 3IgE与效应细胞表面FcR结合 效应细胞的致敏，机体致敏状态形成。 嗜酸粒细胞作用：双重性。,6,吸入性变应原花粉尘螨或其排泄物真菌或其孢子动物皮屑或羽毛,药物青霉素磺胺普鲁卡因有机碘化物,食物变应原,常见变应原（ Allergen ）,能够诱导变态反应的抗原性物质。,昆虫,7,8,9,(二)发敏阶段 1效应细胞活化和脱颗粒 2活性介质释放 (1)预存介质： 组胺(histamine) 激肽原酶(kininogenase) 嗜酸粒细胞趋化因子(eosinophil chemotactic factor of anaphylaxis，ECF-A)(三)效应阶段,10,(2)新合成的介质： 前列腺素D2(prostaglandin D2，PGD2)： 白三烯(1eukotriene，LT)： 血小板活化因子(platelet activating factor， PAF)： 细胞因子：IL-4、 IL-13等，可促进Th2细胞应答和B 细胞向IgE类型转换。,11,12,13,14,15,型超敏反应的发生过程和发生机制,16,17,二、临床常见疾病(一)过敏性休克 1药物过敏性休克 2血清过敏性休克 (二)呼吸道过敏反应 1支气管哮喘 2过敏性鼻炎 (三)消化道过敏反应(四)皮肤过敏反应,18,19,20,21,三、免疫学检验型超敏反应性疾病的诊断 详尽的病史、体内试验和体外试验。 （一）皮肤试验(skin test) 原理、部位、类型、方法及结果判定 (1)皮内试验(intracutaneous test) 注意： 设置阳性及阴性对照。 抢救准备，药物及仪器。 假性现象。,22,相同超敏原不同稀释度,速发型1530min内观察,迟发型4872h内观察,0.010.03ml/针,4mm/针,方法,结果,皮内试验,23,比皮内试验敏感性稍低，但假阳性较少； 皮试液浓度要比皮内试验高10100倍。,将试验抗原与对照液分别滴于试验部位的皮肤上,用针尖透过液滴轻挑一下以刺破皮肤而不出血为度,1min后拭（吸）去试验抗原液,点刺试验,24,25,26,第一次读：48小时打开斑试器,间隔30min待斑试器 压痕消失后判定结果。第二次读：第3天或第4天。如怀疑光过敏，在斑贴试验的基础上给予紫外线照 射，操作过程相似。,斑贴试验,27,28,（三）结果分析及注意事项,假阳性出现的常见原因： 皮试液含有非特异性刺激物； 患者患有皮肤划痕征； 操作手法较重； 注入量较大或浓度过高； 注入少量空气等。,29,询问病史,阳性对照,必备抢救药品和设施,如何避免假性结果的出现：,适应证,阴性对照,皮试液浓度,30,应用与评价,预防药物或疫苗等过敏 防治型超敏反应性疾病 结核菌素试验评估机体细胞免疫功能 预防皮肤接触过敏,31,假阳性：皮试液不纯，含有非特异性刺激物；患者皮肤反应过强，如患者皮肤划痕症阳性；操作者手法较重，注射量较大或浓度过高、注入少量空 气等。假阴性：皮试液抗原性低或失效；患者皮肤反应性差如老年人，或疾病大发作后；皮试前使用过抗组胺药物或免疫抑制剂等。,32,(2)点刺试验(prick test)：方法：注意： 设置阳性及阴性对照。 抢救准备。 假性现象。,33,2应用与评价 真实、客观，与其他检测相关性强。预防原则：寻找变应原，避免接触。 (1)寻找变应原： (2)预防药物或疫苗过敏：(二)粘膜激发试验(provocation test) 是模拟自然途径，使变应原进人体内，引起一 次轻微的发作，用以确定变应原的试验。 注意：严格的对照；抢救措施。,34,1支气管激发试验 (1)非特异性激发试验： 常用指标：第1s用力呼气量(FEV-1)和肺活量； 1520min后复查FEV-1； 阳性： 明显自觉症状，如胸部紧迫感和喘息等； 肺部闻及哮鸣音； FEV-1下降20以上。 目的： (2)变应原激发试验： (3)应用评价：特异性高，与患者的病史、症状和 过敏原吸附试验的相关性较强。,35,2其他激发试验 (1)鼻黏膜激发试验： (2)食物和药物激发试验： (3)结膜激发试验：,36,(三)血清IgE的检测1血清总IgE的测定 (1)ELISA：双抗体夹心法。 (2)放射免疫吸附试验(radioimmunosorbent test，RIST)； (3)化学发光法： 参考值：成人血清IgE水平在20200IUml (1IU=24ng)。意义：疾病。注意：总IgE高不一定是超敏反应； 而过敏者总IgE也不一定升高。,37,2特异性IgE测定 (specific IgE，sIgE) (1)放射性变应原吸附试验(radioallergosorbent test， RAST)： 1967年由Wide建立 原理：固相载体-变应原-sIgE-125I标记的抗人IgE (2)ELISA (3)CAP变应原检测系统(CAP system)： 瑞典Pharmacia公司推出 原理：荧光固相免疫检测系统。其载体为CAP。 单价变应原CAP， 多价变应原CAP。（4）免疫芯片,38,意义：专一性检测变应原。 (5)吸入物变应原过筛试验(Phadiatop)：原理： Sample CAP，变应原吸附，将空气中95 以上的气传变应原吸附到1个CAP上，患者 血清中只要有针对这些变应原其中之一的 sIgE，即可呈阳性反应。用途：过筛试验。,39,(四)嗜酸粒细胞阳离子蛋白测定 (eosinophil cationic protein，ECP) 作用： 标本：肺泡灌洗液和空腹血清ECP 测定方法：CAP system双抗体夹心法。 ELISA (五)嗜酸粒细胞涂片检查 标本：分泌物，排泄物。,40,(六)嗜碱粒细胞脱颗粒试验原理： 方法：外周血分离嗜碱粒细胞+变应原 染色判定：与对照比较，嗜碱粒细胞数减少 30以上时为阳 性。 评价；与RAST和皮肤试验的符合率较高，可用于 寻找过敏原及判断脱敏治疗的疗效。,41,第二节 型超敏反应,特点：抗体(主要为IgG或IgM类)，补体、吞噬细胞和 NK细胞，导致靶细胞损伤或破坏。 细胞溶解型或细胞毒性超敏反应。一、发生机制 (一)抗原刺激 1细胞膜固有抗原 血细胞表面同种异型抗原 异嗜性抗原 改变的自身抗原 2外来抗原和半抗原,42,(二)抗体介导靶细胞损伤机制 1激活补体裂解靶细胞 2免疫调理和免疫黏附作用 3ADCC效应 4刺激或阻断靶细胞受体功能,43,44,自身抗体的作用抗细胞表面受体抗体,重症肌无力,45,46,二、临床常见疾病 (一)输血反应 1溶血性输血反应 2非溶血性输血反应 (二)新生儿溶血症 1母胎Rh血型不符 2母胎ABO血型不符 (三)免疫性血细胞减少症 1药物过敏性血细胞减少症 2自身免疫性溶血性贫血,47,48,49,(四)抗肾小球基底膜型肾小球肾炎和风湿性心肌炎 (五)肺-肾综合征（Goodpasture综合征） (六)自身免疫性甲亢（Graves病）（七）重症肌无力（八）糖尿病 三、免疫学检验 Coombs试验检测抗血细胞抗体， 免疫组化技术检测抗基底膜抗体等。,50,