牡蛎提取物的生物活性研究.ppt

牡蛎提取物的生物活性研究,胡国栋2011.10.18,前言,牡蛎,俗称生蚝、蛎黄、海蛎子等,全世界已知有100多种,我国沿海有20多种,现已人工养殖的主要有近江牡蛎Ostrearivularis、长牡蛎Ostreagigas、褶牡蛎Ostreaplicatula和太平洋牡蛎Crassostreagigas等（陈惠源等，2005）。牡蛎肉味鲜美,营养丰富,素有“海底牛奶”之美称,是沿海一种重要的海洋经济贝类。,牡蛎提取物(JCOE)是以全牡蛎为原料,采用特殊方法分离提取的一种混合物的简称。目前,常用的有牡蛎醇提取物和牡蛎水提取物。经越来越多的研究发现，牡蛎提取物(JCOE)具有多种生物学活性，如防治肝脏疾病、提高免疫力、抗肿瘤作用等。这些生物学活性无不与人类的生活息息相关，已引起了众多研究者的关注。,研究现状,1、防治肝脏疾病2、增强免疫功能3、抗肿瘤作用4、抗氧化作用5、对骨代谢紊乱的防治6、对心血管的保护作用7、对动物高血糖形成的保护作用8、体外放射增敏作用,防治肝脏疾病,范建高等报道，JOCE在适当减轻造模大鼠体重的同时，还会显著降低血脂和肝组织脂肪含量，并显著改善肝组织病理学变化。何冬宁等研究了牡蛎对大剂量四氯化碳(CCL4)致小鼠急性肝损伤作用。结果表明，牡蛎可明显抑制CCL4引起的小鼠血清谷丙转氨酶(SGPT)、谷草转氨酶(SGOT)升高、肝糖元含量降低、肝脂质过氧化物(LPO)的,过量产生，并能使组织形态学上的肝细胞变性、坏死得到明显的减少和改善，肝细胞再生活跃。表明JCOE对肝脏有较好的保护作用。杨勇进等采用给予酒精灌胃制造酒精性肝损伤模型的方法对75只Wistar大鼠进行了实验研究。结果表明，JOCE可以有效地降低由酒精引起的IL-17、TNF-及转氨酶的升高，有明显的保肝降酶的作用。,增强免疫功能,1997年，AAchour等通过JCOE对外周血单核细胞（PBMCs）激活的影响这一实验研究发现，在含有牡蛎提取物而缺乏白介素-2(IL2)的血清中培养PBMCs,免疫细胞不能被激活。然而,在经JCOE和IL-2处理1周的正常受试对象的PBMCs培养物中,T细胞增殖明显高于仅用IL-2而无JCOE处理的控制组,并且在有JCOE存在的条件下,PBMCs培养37d就能达到最大活性,提示JCOE对IL-2活性发挥具有积极的促进作用,其机制可能与其诱导IL-2活化与IL-2受体(CD25)的增加有关。,蔡冰娜等以牡蛎肽为蛋白源，研制获得牡蛎肽肠内营养制剂，检测血液生化指标和脏器系数进行营养评定，采用小鼠脾淋巴细胞转化试验、碳粒廓清试验、乳酸脱氢酶测定法研究了其对免疫功能的影响发现，牡蛎肽肠内营养制剂可以维持小鼠正常生理生化功能，能明显增强小鼠的细胞免疫和NK细胞活性，低剂量组能增强小鼠的巨噬细胞吞噬功能。表明牡蛎肽肠内营养制剂对小鼠具有提高机体免疫的作用。,张冬青等以牡蛎提取物连续胃饲小鼠15d(1030mgd)，小鼠外周血杀伤细胞（NK）活性显著增加。对环磷酰胺所诱发的免疫低反应，牡蛎提取物有回复和缓解作用，使已降低的总T细胞(T)、T辅助细胞(Th）、ThT抑制细胞（Ts）及琳巴细胞增殖完全同复到正常对照水平，NK活性虽未达正常值，但也有明显回升(pH0.01)。表明牡蛎提取液有正向免疫调节功能。,抗肿瘤作用,胡雪琼等报道，其采用四氮唑蓝还原法(MTT法)研究粗提物SG1对人宫颈癌细胞(Hela细胞)的体外抗肿瘤活性，结果显示：500g/mL剂量组与g/mL剂量组48h时的抑制率分别为43.1(P0.05)，55.8(P0.05)，近江牡蛎糖胺聚糖粗提物SG1具有较明显的抗肿瘤活性，存在一定的量效关系。,王颖等报道,JCOE具有增强宿主免疫功能、抑制肿瘤细胞的生长。试验以每天0.2ml（20mg）剂量的JCOE连续10d胃饲HAC，(接种小鼠肝癌细胞株）的Balb/c小鼠，发现宿主因荷瘤而下降的免疫指标，包括总T细胞数，T辅助细胞（Th）和T抑制细胞（Ts）百分比，丝裂原诱发的淋巴细胞转化强度和NK细胞的杀伤活性均明显回升。瘤重亦较对照组明显减轻(P0.01)，宿主成活期延长。用相同剂量的杜蛎提取液胃饲长有人结肠癌的裸鼠共l5d，发现肿瘤体积明显减少为对照的44.6%(P0.01)。结果提示杜蛎提取物可能通过增强宿主免疫功能，特别是其中天然杀伤细胞活性而抑制肿瘤生长。,李鹏等采用酸抽提、凝胶柱层析等方法，从牡蛎体内分离提取到牡蛎天然活性多肽组分BPO-1，以姜黄素和六亚甲基双乙酰胺（HMBA）处理组为平行对照，流式细胞仪检测细胞周期变化及以免疫细胞化学方法检测相关癌基因、抑癌基因表达变化。结果发现BPO-1能有效抑制BGC一823细胞增殖活动，出现亚G1-期细胞，细胞进入凋亡现象。这表明BPO-l对胃癌细胞具有显著的诱导凋亡作用。,抗氧化作用,吴海涛等研究了低温条件下制备牡蛎水提液体外抗氧化特性，及牡蛎水提液清除二苯代苦味酰自由基(DPPH)、Feton体系产生的羟基自由基(OH)、邻苯三酚自氧化体系产生的超氧阴离子自由基(O2-)的能力，以Fe2+诱发脂蛋白PUFA过氧化体系研究牡蛎水提液的抗氧化活性。结果表明，牡蛎水提液具有较强的清除自由基能力，并有一定的抗脂质过氧化作用。,对骨代谢紊乱的防治,苏开鑫等将40只3月龄Sprague-Dawley（SD）大鼠,随机分成年龄对照组(A组)、泼尼松组(B组)、低剂量牡蛎组(C组)、高剂量牡蛎组(D组)。A组灌生理盐水4mgkg-1d-1，B组予4mgkg-1d-1泼尼松灌胃，C组灌胃给予牡蛎肉提取物5mgkg-1d-1+醋酸泼尼松4mgkg-1d-1，D组给予牡蛎肉提取物10mgkg-1d-1+醋酸泼尼松4mgkg-1d-1，共90d。实验结束后，处死全部大鼠，取尺骨和血清做生化指标测定。,结果发现泼尼松可致大鼠尺骨羟脯氨酸的含量减少，骨钙、骨磷、骨锌、骨铁的含量显著降低；血钙显著升高，碱性磷酸酶含量降低。牡蛎提取物可提高大鼠骨钙、骨磷、骨锌、骨铁含量；使血钙降低恢复正常，碱性磷酸酶浓度升高，各项指标均接近正常对照组水平，且高剂量组比低剂量组效果更明显。表明牡蛎肉提取物可以有效防治泼尼松引起的骨代谢紊乱。,对心血管的保护作用,刘赛等为研究牡蛎提取物对动脉粥样硬化的抑制作用及其可能的作用机制，通过建立高脂食铒性鹌鹑动脉粥样硬化模型，观察了牡蛎提取物预防用药对血清脂质(酶法)、载脂蛋白(免疫比浊法)、血浆超氧化物歧化酶和脂过氧化物丙二醛(微量快速法)的影响，并对主动脉、冠状动脉和肝脏进行肉眼和光镜组织学检查。结果发现，牡蛎提取物10g/kg胃内连续给药8周后，鹌鹑主动脉、冠状动脉内膜动脉粥样硬化斑块形成的程度明显减轻，于动脉粥样硬化造型4周时测定血浆总胆固醇、甘油三酯、低,密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白B分别为17.470.78、1.160.35、10.943.17mmol/L和2.470.78g/L，均较模型组明显减少(P0.05，P0.01)。于动脉粥样硬化造型8周后血浆总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白B水平仍明显低于模型组(P0.05，P0.01)，心肌及主动脉壁中的总胆固醇和甘油三酯含量显著降低,血清中超氧化物歧化酶升高。结果表明，牡蛎提取物具有调血脂、抗动脉粥样硬化作用，其作用机制与抑制脂质过氧化损伤有关。,对动物高血糖形成的保护作用,王世华等预先给小鼠牡蛎提取物灌胃，连续4周，然后腹腔注射四氧嘧啶，观察牡蛎提取物对小鼠血糖、体重、胸腺、脾脏重量的影响。结果发现牡蛎提取物可显著减低由四氧嘧啶所致的小鼠血糖升高的幅度(P0.01)，增加小鼠免疫器官的重量(P0.05)；对正常小鼠血糖无明显影响。这表明牡蛎提取物对四氧嘧啶所致小鼠血糖升高有显著的保护作用。,体外放射增敏作用,放射增敏剂指的是药物单独使用时对癌细胞无毒性，而与放射线合并使用时可促进射线的杀伤力。任何药物在鉴定其是否有放射增敏能力时，先应排除自身的细胞毒作用。曹弃元等将鲜活牡蛎肉提取物和牡蛎肉干粉水溶液以1/1001/800比例加到人鼻咽癌细胞株培养液内培养1516h。细胞接受2Gy射线照射，继续培养5672h，观察细胞克隆形成率。,结果发现，在排除了药物细胞素作用后(1/1001/200)，2种牡蛎制剂均有明显的强化射线杀灭癌细胞的效应，放射增敏率达34.5%52.6%，而放射前给药基本无增敏作用。结果表明JCOE的增敏机制可能是阻断癌细胞被放射线损伤后DNA自身的修复功能,使射线造成的DNA损伤不可逆转。,谢谢,