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专题24微生物的利用挖命题【考情探究】考点考向要求5年考情预测热度考题示例素养要素难度1微生物的实验室培养培养基与微生物的纯化实验与探究2018课标全国 ,37,15分科学思维、社会责任中2微生物的分离与计数微生物的分离与计数2018课标全国 ,37,15分中分析解读本专题内容一直是高考的命题热点,考查内容集中在微生物的实验室培养、特定微生物数量的测定方法、培养基对微生物的选择作用等;题目情境贴近生活或科技进展,但试题答案落脚于教材主干知识。预计2020年高考中这种命题趋势还将继续存在。复习时应注意对各种技术的系统理解和横向对比,可将果酒、果醋与泡菜的制作、特定微生物的分离纯化等实践操作构建过程模型,以加深对相关技术的记忆和理解。【真题典例】破考点考点一微生物的实验室培养【考点集训】考向培养基与微生物的纯化 1.(2019届吉林实验中学第三次月考,41,15分)下表是某同学列出的分离土壤中微生物的培养基配方,据此回答下列问题:KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O尿素葡萄糖琼脂14 g2.1 g0.2 g10 g10.0 g15.0 g将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL。(1)从作用上看,该培养基属于培养基,提供氮源的物质是,细菌能利用该氮源是由于体内能合成酶。(2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时,还需在培养基中加入指示剂,若指示剂变,说明有目的菌株存在。(3)为了测定微生物的数量,接种时应采用法,某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为106 的土壤样液0.1 mL,培养后菌落数分别为180、155、176、129个,则每升原土壤样液中上述微生物的数量为个,测定的活菌数比实际活菌数(填“低”“高”或“基本一致”)。答案(1)选择(1分)尿素脲(2)酚红红(3)稀释涂布平板1.61012低2.(2019届宁夏育才中学第二次月考,37,15分)为了调查银川市自来水水源地的水质情况,某研究小组对该地自来水水样中的大肠杆菌进行了测定,请回答下列问题:(1)该小组采用平板划线法分离提纯水样中的细菌,划线时在培养基上共画了4个区域,则需要次灼烧接种环。在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是。(2)在纯化菌种时,所用的培养基都需要在接种前用法进行灭菌。将1 mL水样稀释1 000倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液,经适宜条件下培养后,3个平板上的菌落数分别为51、50和49。据此可得出每升水样中的活菌数为。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种作为对照进行实验。(3)菌种需临时保藏时,要先将菌种接种到试管的培养基上,在合适的温度下培养。当菌落长成后,将试管放入冰箱中保藏。但此方法存在的缺点是。 (4)在培养时,需将培养皿倒置并放在中。实验结束时,使用过的培养基应该进行处理后才能丢弃。答案(1)5(1分)将聚集的菌种逐步稀释以便获得单个菌种的表面(2)高压蒸汽灭菌5.0108等量的无菌水(3)固体斜面(1分)4 (1分)保存的时间不长,菌种容易被污染或产生变异(4)恒温培养箱(1分) 灭菌(1分)考点二微生物的分离与计数【考点集训】考向微生物的分离与计数 1.(2019届湖北华中师大附中高三上学期期中,37,15分)为更好地解决冬季污水处理厂氨氮去除率低的问题,某研究小组尝试从海水中筛选在低温下能高效去除氨氮的硝化细菌。将采集到的海水样本加入液体培养基A(其氮源为氨态氮),放在24 的培养箱中培养5天,然后取少量培养液在固体培养基上涂布,得到三种形态、颜色均不相同的单菌落。回答下列问题:(1)液体培养基A应选用的灭菌方法是(填“高压蒸汽灭菌法”或“干热灭菌法”),不选另外一种的原因是 。(2)在配制培养基A时,对碳源的要求是(填“提供有机碳源”或“不提供碳源”),理由是。(3)最后分离得到的单菌落有三种,其形态、颜色各不相同,表明硝化细菌。(4)该研究小组在上述实验的基础上,已经获得了高效去除氨氮的硝化细胞,则需要经过处理,才能筛选出符合要求的能高效去除氨氮的硝化细菌。答案(1)高压蒸汽灭菌法(2分)干热灭菌法针对耐高温需要保持干燥的物品,若选干热灭菌法会使培养基中的水分蒸发(3分)(2)不提供碳源(2分)硝化细菌能进行化能合成作用,为自养生物(3分) (3)存在不同的种类(3分)(4)低温(2分)2.(2019届四川南充一诊,37,15分)有机磷农药是用于防治植物害虫的含磷有机化合物,广泛应用于农业生产中,有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标,不少品种对人、畜的毒性很强,人误食后如不及时医治就会危及生命。某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物。请回答下列问题:(1)为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种,可在被有机磷农药污染的土壤中取样,并在含有碳源、氮源及等的选择培养基上添加适量的进行选择培养。(2)在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是。若培养基需要调节pH,则应在灭菌之(填“前”或“后”)调节。(3)该小组在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间,这样做的目的是。(4)若要测定培养液中选定菌种的菌体数,既可在显微镜下用直接计数,也可选用法统计活菌数目。(5)将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1 L含20 mg有机磷农药的相同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、条件适宜),观察从实验开始到微生物停止生长所用的时间,甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时,则应选择微生物(填“甲”“乙”或“丙”)作为菌种进行后续培养,理由是。答案(1)水和无机盐有机磷农药(2)琼脂前(3)检测培养基平板灭菌是否合格(4)血细胞计数板稀释涂布平板(5)丙微生物丙分解有机磷农药的能力比甲、乙强过专题【五年高考】A组统一命题课标卷题组1.(2018课标全国,37,15分)将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。回答下列问题:(1)M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素以抑制的生长,加入了链霉素的培养基属于培养基。(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有(答出两点即可)。氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有(答出两点即可)。(3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是 。(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是。答案(1)细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、核酸(3)碘液淀粉遇碘液显蓝色,产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解,形成透明圈(4)乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,结果的重复性差2.(2018课标全国,37,15分)在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题:(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是。(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能。在照射前,适量喷洒,可强化消毒效果。(4)水厂供应的自来水通常是经过(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是。答案(1)可以(2)在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少(3)破坏DNA结构消毒液(4)氯气(5)未将锅内冷空气排尽 3.(2018课标全国,37,15分)回答下列与酵母菌有关的问题:(1)分离培养酵母菌通常使用(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培养基,该培养基应采用灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后可观察到菌落,菌落的含义是。(2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,可促进(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培养,可促进(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)。(3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的原因是。答案(1)麦芽汁琼脂高压蒸汽由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体(2)菌体快速增殖乙醇产生(3)酵母菌分解葡萄糖会产生CO2,CO2使面包松软4.(2017课标全国,37,15分)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列问题:(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是。但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是(答出两点即可)。(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是。(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有(答出两点即可)。答案(1)脲酶分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原料(2)尿素其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用(3)为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定5.(2016课标全国,39,15分,0.24)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题:(1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是。(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有和。分离纯化时应挑选出的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在-20 长期保存时,菌液中常需要加入一定量的(填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”)。答案(1)无菌水(2分)泡菜滤液中菌的浓度高,直接培养很难分离得到单菌落(3分)(2)鉴别乳酸菌中和产生的乳酸(或酸)(每空3分,共6分)具有透明圈(2分)(3)甘油(2分)6.(2015课标全国,39,15分,0.6127)已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题:(1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用染色。微生物A产生的油脂不易挥发,可选用(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以为碳源的固体培养基进行培养。(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用直接计数;若要测定其活菌数量,可选用法进行计数。(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35 、40 、45 温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg,则上述三个温度中,条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕设计后续实验。答案(1)苏丹(或苏丹)萃取法(每空2分,共4分)(2)油脂(3分)(3)血细胞计数板稀释涂布平板(每空2分,共4分)(4)4540(每空2分,共4分)7.(2014课标全国,39,15分,0.5106)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将分解成。(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的。(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲+-+培养基乙+-+注:“+”表示有,“-”表示无。据表判断,培养基甲(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是;培养基乙(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 。答案(1)纤维二糖葡萄糖(2)红透明圈(3)不能液体培养基不能用于分离单菌落不能培养基中没有纤维素,不会形成CR纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌8.(2014课标全国,39,15分,0.5527)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题:(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是;然后,将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是 。(3)示意图A和B中,表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高的利用率。答案(15分)(1)检测培养基平板灭菌是否合格3.8107(每空2分,共4分)(2)灼烧(2分)将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3分)(3)B(2分)(4)溶解氧营养物质(每空2分,共4分)教师用书专用(911)9.(2013课标全国,39,15分,0.5633)临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题:(1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用法或法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释,用法接种于固体培养基表面,在37 培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板。(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的。(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素。答案(15分)(1)划线稀释涂布(或涂布)(每空2分,共4分)(2)涂布(1分)(3)敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A的弱耐药菌(每空2分,共8分)(4)A(2分)10.(2011课标,39,15分)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲,该培养基属于培养基。(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即和。(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力。(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求实验操作应在酒精灯附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。答案(1)原油选择(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰11.(2009全国,33,10分)利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆,具有广阔的应用前景。但现有野生菌株对淀粉的转化效率低,某同学尝试对其进行改造,以获得高效菌株。(1)实验步骤:配制(固体、半固体、液体)培养基,该培养基的碳源应为。将接入已灭菌的培养基平板上。立即用适当剂量的紫外照射,其目的是。菌落形成后,加入碘液,观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小,周围出现现象的菌落即为初选菌落。经分离、纯化后即可达到实验目的。(2)若已得到二株变异菌株和,其淀粉转化率较高。经测定菌株淀粉酶的催化活性高,菌株的淀粉酶蛋白含量高。经进一步研究发现,突变发生在淀粉酶基因的编码区或非编码区,可推测出菌株的突变发生在区,菌株的突变发生在区。答案(1)固体玉米淀粉野生菌株对野生菌株进行诱变浅色范围大(2)编码非编码B组自主命题省(区、市)卷题组1.(2018江苏单科,31,8分)酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。下图所示为操作流程,请回答下列问题:(1)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的,及时对培养基进行分装,并进行灭菌。(2)取步骤中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤中将温度约(在25 、50 或80 中选择)的培养基倒入培养皿混匀,冷凝后倒置培养。(3)挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤所示进行划线。下列叙述合理的有。a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株(4)步骤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和供应。为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1 000 倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用2516型血细胞计数板计数5 个中格中的细胞数,理论上色细胞的个数应不少于,才能达到每毫升3109个活细胞的预期密度。答案(8分)(1)pH高压蒸汽(湿热)(2)50 (3)a、b、d(4)氧气无302.(2017江苏单科,31,7分)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有。(2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐,以达到富集酚降解菌的目的。若如图平板中菌落过于密集,应进一步,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加。(3)如图为连续划线法示意图,在图中(填图中序号)区域更易获得单菌落。(4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中15号比色管的苯酚浓度应分别为。管号123456苯酚浓度(mg/L)1如果废水为50 mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释(填序号:51020)倍后,再进行比色。答案(7分)(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀释涂布凝固剂(3)(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8【三年模拟】非选择题(共90分)1.(2019届湖南长郡中学第二次月考,35)日前微博传言手机细菌比马桶多。如图,央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题。(15分)(1)该实验需制备培养基,培养基一般都含有水、碳源、氮源、,培养基一般放入中进行灭菌。(2)据图,两电视台均采用法接种,该方法需要 。(多选)A.接种环B.酒精灯C.移液管D.涂布器E.无菌水(3)通过观察菌落的,可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致,但报道结果截然不同,你认为原因是。(4)按图操作取样面积,实验员测定某手机屏幕的细菌数量,将10 mL菌悬液进行梯度稀释,分别取0.1 mL稀释倍数为102的样品液接种到三个培养基上,培养一段时间后,统计菌落数分别为48、50、52,则该手机屏幕的细菌数为个/平方厘米。该实验对照组该如何设置?。答案(1)无机盐(1分,“琼脂”不作为扣分或给分的标准)高压蒸汽灭菌锅(2)稀释涂布平板BCDE(全对2分,答对23个得1分)(3)形态、大小(答出一点即给2分,也可填“颜色”或其他合理答案) 手机的取样和马桶的取样都不相同 (答出“取样不同”即得2分)(4)2104取培养基涂布0.1 mL无菌水进行培养2.(2019届山东青岛期初调研,36)蛋白酶在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值。某同学为筛选产蛋白酶的高产菌株,做了如下实验步骤(配制了下列培养基,在适宜条件下培养):(15分)步骤取样培养基培养结果土壤样品葡萄糖,(NH4)2SO2,K2HPO43H2O,KH2PO4,NaCl,CaCl2,MgSO47H2O,加水定容培养液a1 mL培养液a同上菌落挑取单菌落细菌培养基培养液b(1)为实现筛选目的,步骤所使用的培养基配方中,应去除并加入高浓度的。该培养基从功能上看属于培养基。(2)灭菌是否彻底或是否被污染需要检测,检测方法是 。(3)为实现目的菌的分离和计数,步骤所使用的培养基中还常加入制成平板,采用的接种方法是。(4)步骤的目的是。答案(1)葡萄糖蛋白质选择(2)未接种的培养基在适宜条件下放置一段时间后,观察培养基上是否有菌落产生(3)琼脂稀释涂布平板法(4)快速增加目的菌的种群数量(扩大培养)3.(2019届黑龙江大庆实验中学第一次月考,44)酸雨主要是由大气中所含的SO2造成的。研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌,进行了相关实验。回答下列问题:(15分)(1)采集菌种:在某热电厂烟囱周围区域采集土样,取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要。将采集的土样进行稀释处理后,接种到培养基上进行培养。(2)分离目的菌:将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中,边搅拌边持续通入SO2,驯化几分钟后接种到固体培养基上,待长出菌落后再重复上述步骤,并逐步延长通SO2的时间,与此同时逐步降低培养基的pH。由此分离得到的目的菌具有较强的的能力。(3)活菌计数:为获得大量目的菌用于生产,在培养过程中需连续取样进行计数,法常用来统计样品中的活菌数目。通常情况下,用此方法得到的活菌数目往往比实际数目(填“高”或“低”)。 (4)检测目的菌对抗生素的敏感性:取该单菌落适当稀释后的液体2滴,接种于固体培养基表面,并用使菌液均匀分布。在37 培养箱中培养24小时后,将大小相同且分别含有不同抗生素的圆纸片均匀置于该平板的不同位置,再培养一段时间,结果如图所示(圆纸片周围的白色区域表示没有菌落分布),据此实验结果推测,五种抗生素中对该菌抑制作用最强的是(答序号和名称)。(5)菌种保存:采用平板划线法分离纯化得到了脱硫细菌,可以采用的方法,对菌种长期保存。答案(1)灭菌(2)利用SO2和耐酸(3)稀释涂布平板低(4)涂布器青霉素(5)甘油管藏4.(2019届安徽合肥高三调研,25)如图是纯化纤维素分解菌并生产乙醇的基本工作流程,请回答下列问题:(15分)(1)图中过程选取富含纤维素的土壤,在鉴定和筛选所需微生物时需用对纤维素进行染色并制成选择培养基。最后还要在平板培养基上分离纯化目的菌。为避免杂菌污染培养物和环境,接种时要在操作。(2)图中环节获得的酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,分别为C1酶、CX酶和。前两种酶使纤维素分解成,第三种酶将其进一步分解成葡萄糖。环节常用的菌种是。(3)用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中纤维素分解菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,取0.2 mL稀释液涂布,得到以下统计结果:涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和246;请计算每毫升原液中的菌体数是。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量。答案(1)刚果红酒精灯火焰旁(2)葡萄糖苷酶纤维二糖酵母菌(3)1.16109少5.(2019届河南信阳高中一模,37)土壤中的细菌数量多、分布广,人类能根据需要从土壤中分离提纯各种细菌,因此可以从土壤的枯枝败叶层分离出纤维素分解菌。回答下列问题:(15分)(1)培养细菌的培养基除含有碳源外,还必须含有的基本成分是。(2)为避免培养皿污染,需将倒平板后的培养皿呈状态放置。为了排除培养基被污染,需设置接种等量的培养基作为空白对照。(3)若要鉴别所分离的细菌是否为纤维素分解菌,则应该在培养基中加入,观察培养基中是否出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,从而可以鉴定是否筛选出纤维素分解菌。(4)为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行处理。为了测定培养液中的菌体数量,一般采用法将一定量的菌液接种到固体培养基上,统计菌落的数量来代表菌体数,这种检测方法测得的结果一般偏小,原因是 。答案(1)氮源、水、无机盐(2)倒置无菌水(3)刚果红染料(4)梯度稀释(或系列稀释)稀释涂布平板有些菌落是由两个或多个活菌共同形成的(且有活菌在培养过程中死亡)6.(2019届江西新余四中第一次月考,34)为了调查某学校附近河流的水质状况,该学校生物兴趣小组测定了河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:(15分)(1)如图,该小组采用的是分离水样中的细菌。操作时,接种环通过灭菌,在第二次及以后的操作时,总是从上一次的末端开始,这样做的目的是。(2)该实验组将接种好的培养皿在恒温箱中培养时倒置,其目的是。(3)菌落是。单个菌落在生态学中可以被称为。根据培养皿上菌落的平均数可以计算河水中该细菌的密度,但计算的数据要比实际活菌的数目少,原因是。除了上述的活菌计数法外,也是测定微生物数量的常用方法。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是。答案(1)平板划线法灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(2)防止凝结在皿盖上水滴落在培养基上产生杂菌污染(3)由一个细胞在固体培养基上繁殖而来的肉眼可见的子细胞群种群(1分)当两个或者多个细胞连在一起时平板上观察到的是一个菌落显微镜直接计数(4)振荡培养能提高培养液的溶解氧的含量(1分),同时可以使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率(1分)
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