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专题2细胞工程,2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体,掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。2.简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。3.了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说出其应用实例。,通过复习植物体细胞杂交导入新课；首先直接阐明动物细胞融合的概念，再提出动物细胞融合的原理和诱导因素是什么？进入相关知识点的学习；接着由出动物细胞融合的意义引出单克隆抗体的制备，通过让学生阅读资料，找出单克隆抗体的概念，再通观看视频让学生对单克隆抗体的制备过程有一个初步的印象，然后结合教材上的图片，对该过程进行归纳和整理；接着讲述单克隆抗体的有点和应用；最后通过课堂总结及课堂检测，完善内化课堂知识。通过视频展示单克隆抗体的制备过程，并结合形象的图片对单克隆抗体的制备过程进行分解和整理，加深学生对两次筛选的目的以及单克隆抗体和杂交瘤细胞的特点进行区分，以此来突破单克隆抗体的制备这一重点和难点。,杂种植株,融合的原生质体AB,再生出细胞壁,脱分化,愈伤组织,再分化,植物细胞的融合,植物组织培养,植物细胞A,原生质体B,原生质体A,杂种细胞AB,去壁,去壁,人工诱导,融合完成的标志,植物细胞B,一、动物细胞融合,1.概念：,动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。,2.原理：,细胞膜的流动性,细胞融合是正常的生命活动,两个细胞正在融合,受精作用,动物细胞融合过程示意图,不同DNA的两个细胞,灭活的病毒,有丝分裂,两个完整的杂交细胞,3.诱导方法：,物理法：,化学法：,生物法：,灭活的病毒,电激等,聚乙二醇（PEG),灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏这些病原体的抗原结构。,4.意义：,突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。,5.应用：,最重要的用途是制备单克隆抗体,主要用于制备,单克隆抗体,获得杂种植株,主要用途,物理、化学方法,（同左）,灭活的病毒,物理（离心、振动、电刺激）,化学（聚乙二醇）,诱导方法,使细胞分散后诱,导细胞融合,去除细胞壁后诱,导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性、,植物细胞全能性,细胞融合的原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较,读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念。,人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。,用单个效应B细胞进行克隆，得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体就叫做单克隆抗体。,提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？,提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？,如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计一个方案。,提示3：有什么方法能使一个细胞同时具备产生抗体的能力和无限增殖能力呢？,一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖,杂交瘤细胞,动物细胞培养技术,设计方案：,动物细胞融合技术,单克隆抗体,既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞,1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验,单克隆抗体的制备过程,二、单克隆抗体的制备,1.单克隆抗体的制备过程,3.为何要进行两次筛选？,4.如何进行第2次筛选？,培养在多孔培养板上，每孔只有一个杂交瘤细胞。,第1次筛选得到杂交瘤细胞（多种）。第2次筛选得到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞群。,1.本过程利用了哪些原理？,免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理,2.为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？,这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体。,2.单克隆抗体的优点：,3.单克隆抗体的应用,特异性强，灵敏度高，可大量制备,（1）作为诊断试剂最广泛应用具有准确、高效、简易、快速,（2）用于治疗疾病和运载药物,“生物导弹”单克隆抗体药物单抗导向，药物为弹头,主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。,两个“过程”,动物细胞培养过程,单克隆抗体制备过程,三个“一”,一个诱导细胞融合的新方法灭活病毒,一个新细胞杂交瘤细胞,一个优势单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势,重点,1.动物细胞工程技术的基础是：（）A动物细胞融合B胚胎移植C动物细胞培养D核移植,在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）A结果是相同的B杂种细胞的形成过程基本相同C操作过程中酶的作用相同D诱导融合的手段相同,.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞ABCD,C,4.下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌单克隆抗体的实验方案：,（2）该方案能达到预期效果吗？为什么？,（4）图中B为过程，常用_作为诱导剂，该细胞继承的遗传特性，既能，又能。,（1）该实验方案的目的是.,（3）A是从小鼠的脾脏中取得_,该细胞能够产生_。,制备单克隆抗体,B细胞,抗体,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞,产生特异性抗体,无限增殖,
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