2019-2020年高考生物大二轮复习 第一编 专题整合突破 专题9 现代生物科技易错题训练.doc

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2019-2020年高考生物大二轮复习 第一编 专题整合突破 专题9 现代生物科技易错题训练1供体器官的短缺和排斥反应是制约器官移植的两个重要问题。而治疗性克隆能最终解决这些问题。如图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程,请据图回答。(1)过程A表示_,是目前实现体细胞克隆的关键技术,该技术的主要操作是应用患者的体细胞作为核供体,由_细胞提供细胞质,进行人工重组,由此产生的重组细胞的遗传物质主要来自图中的_。(2)过程B表示的生物技术是_,C表示定向诱导技术,其诱导的对象是_细胞。(3)“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞的_。相同的胚胎干细胞,“克隆”的结果多种多样,如有的是神经细胞,有的是血细胞,有的是肌肉细胞,究其本质原因是_。(4)中国政府对“克隆人”的观点是_。“有一男子患有白血病,经医生利用其出生时保留的脐带血进行治疗后康复”,你认为这种做法符合伦理道德吗?为什么?_。答案(1)细胞核移植(次级)卵母乙(2)动物细胞培养内细胞团(胚胎干)(3)细胞核具有全能性基因的选择性表达(4)禁止生殖性克隆人,不反对治疗性克隆符合,因为脐带血不是来自胚胎,其中的造血干细胞属于成体干细胞解析(1)过程A为核移植,是将体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞中。重组细胞的遗传物质主要来自提供细胞核的个体,即乙。(2)过程B为动物细胞培养,C诱导的对象是内细胞团,因为内细胞团将来要发育成各种组织和器官。(3)“治疗性克隆”说明高度分化的体细胞的细胞核具有全能性。“克隆的结果多种多样,是因为基因的选择性表达。(4)中国政府禁止生殖性克隆人,不反对治疗性克隆。脐带血中的造血干细胞属于成体干细胞,不是来自胚胎,故用自己的脐带血治疗白血病符合伦理道德。2科学家培育出“三亲”胚胎的方法是:先将甲的精子和乙的卵子体外受精,再将受精卵的细胞核取出,植入丙去核的卵子中,培育成胚胎。回答下列问题:(1)该“三亲”胚胎主要可避免携带亲本_(填“甲”“乙”或“丙”)的线粒体致病基因,培育过程涉及的动物细胞工程基础技术是_。(2)通过注射_激素可使乙、丙产生较多的卵子。体外受精时,_后的精子和处于_期的卵子相遇,首先发生_反应,使精子穿越放射冠和透明带,进入卵细胞膜。在该过程中,会产生_道屏障以防止多精入卵。(3)当胚胎发育至_个细胞时可进行移植。答案(1)乙动物细胞培养(2)促性腺获能减数第二次分裂中(M中)顶体两(3)816解析本题考查动物细胞工程、胚胎工程,难度中等。(1)线粒体位于细胞质中,受精卵的细胞质几乎全部来自乙的卵细胞,去掉受精卵的细胞质,目的是避免携带亲本乙的线粒体致病基因;动物细胞工程的基础技术是动物细胞培养。(2)给雌性动物注射促性腺激素,可以使雌性动物超数排卵;获能的精子和处于减数第二次分裂中期的卵子才具备受精能力,受精时先发生顶体反应;在受精过程中透明带反应和卵细胞膜反应是防止多精入卵的两道屏障。(3)当胚胎发育至816个细胞阶段可以进行移植。3加拿大科学家通过转基因山羊已经生产出重组的人类丁酰胆碱酯酶,该酶可用于对抗生化武器。下图是转基因山羊的培育过程示意图,请据图回答问题(山羊为二倍体):(1)在上述操作中,目的基因是_基因,将该基因导入受体细胞常用的方法是_法。(2)胚胎工程是指对动物的早期胚胎或_所进行的多种显微操作和处理技术。图中过程所涉及的胚胎工程技术是_。(3)从雌性山羊卵巢内获取的卵母细胞需要培养到_期才能完成受精作用,此时细胞中的染色体组数是_。为了获得更多的卵母细胞,往往需要向雌性山羊体内注入_激素。受精过程中防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和_。(4)要同时获得多只与此转基因山羊遗传物质相同的小羊,可对囊胚进行_。(5)下列不属于生物武器特点的是_。A致病力强,传染性大B污染面积大,危害时间长C有潜伏期,传染途径多D造价高,技术难度大答案(1)丁酰胆碱酯酶显微注射(2)配子胚胎移植(3)M中(或减数第二次分裂中)1促性腺卵细胞膜反应(4)胚胎分割(5)D解析本题考查转基因技术的应用及胚胎工程的知识,解答时应熟知现代生物技术的原理、方法、步骤等相关知识,并能利用所学知识分析解答有关生物学问题。(1)题中所述目的基因应为丁酰胆碱酯酶基因,该基因导入受体细胞常用显微注射技术。(2)胚胎工程是指对动物的早期胚胎或配子所进行的多种显微操作技术。图中过程表示把早期胚胎植入代孕母羊子宫内,涉及的技术是胚胎移植。(3)卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期才能完成受精作用。为了获得更多的卵母细胞,往往需要向雌性山羊体内注入促性腺激素,防止多精入卵的屏障是透明带反应和卵细胞膜反应。(4)可通过胚胎分割技术获得多只转基因小羊。(5)生物武器的特点是致病力强,传染性大,污染面积大,危害时间长,有潜伏期,传染途径多等。4以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程,ah为操作过程,据图回答有关问题:(1)“试管牛”技术的操作流程是_(填字母)。(2)图中数字标号代表的结构名称是:_,_。(3)d操作的名称是_,过程h常用的方法是_。(4)在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,应注意_。(5)将处的细胞分离进行培养,需在培养皿底部铺设一层细胞,称为饲养层,饲养层的作用是_。(6)在哺乳动物早期发育过程中,囊胚的后一个阶段是_。答案(1)abfg(2)滋养层内细胞团(3)胚胎移植显微注射法(4)要将内细胞团均等分割(5)抑制细胞分化,促进细胞生长(6)原肠胚解析(1)“试管牛”是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经移植产生后代的技术,图中“试管牛”技术的操作流程应是abfg。(2)图中是滋养层,是内细胞团。(3)d操作是胚胎移植;过程h是将外源基因导入受精卵,常用显微注射法。(4)在对囊胚期胚胎进行分割时,应注意将内细胞团均等分割,以免影响胚胎的恢复和进一步发育。(5)饲养层细胞一般为输卵管上皮细胞,在干细胞培养时,可作为干细胞分裂、增殖的营养细胞,能够维持细胞不分化的状态。(6)哺乳动物早期胚胎发育过程中,囊胚的后一阶段是原肠胚。5根据所学生物学知识回答下列问题:(1)若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞,先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_中,然后用该农杆菌感染植物细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的_上。(2)目前临床上使用的红细胞生成素(一种糖蛋白,用于治疗肾衰性贫血)主要来自基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)。检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的_细胞,可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成,在融合过程中至少需要进行_次筛选。(3)在“试管牛”的培育过程中,采用激素处理可使良种母牛一次排出多枚卵母细胞,最常用的激素是_。从良种公牛采集的精子需_后才能进行受精作用;防止多精入卵的两道屏障依次为_、_。(4)生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡,也会很快有其他物种占据它原来的生态位置,从而避免系统结构或功能失衡。这体现了生态工程的什么原理?_。A协调与平衡原理 B物种多样性原理C物质循环再生原理 D整体性原理(5)下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。下图表示某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamH或EcoR或Pst的酶切位点。现用BamH和Pst两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开),下列各种酶切位点情况中,可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是_。A1为Pst,2为EcoR,3为EcoR,4为BamHB1为EcoR,2为BamH,3为BamH,4为PstC1为BamH,2为EcoR,3为BamH,4为PstD1为EcoR,2为Pst,3为Pst,4为BamH(6)运用基因工程技术已经创造出了“蜘蛛羊”,该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白,高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域。为保证实验成功,产生蛛丝蛋白的基因需从cDNA文库中获取,并与_等调控组件重组在一起,然后与载体相连构建成为表达载体;再通过_方法,将表达载体导入羊的_,获得重组细胞。将获得的重组细胞培养成早期胚胎后,移植到经过_处理的受体母羊子宫内。因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚,所以在早期胚胎的培养中,往往还需要添加_。答案(1)TDNA染色体DNA(2)杂交瘤2(3)促性腺激素获能透明带反应卵细胞膜反应(4)B(5)C(6)羊的乳腺蛋白基因的启动子显微注射受精卵同期发情动物血清解析本题考查现代生物科技的相关知识,涉及基因工程、胚胎工程、单克隆抗体的制备及生态工程等知识,主要考查对基础知识的理解分析能力及综合运用能力。(1)目的基因先插入农杆菌Ti质粒的TDNA中,然后用该菌感染植物细胞,将目的基因整合到植物细胞的染色体DNA中。(2)用rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,以制备单克隆抗体,在此过程要进行两次筛选,第一次筛选是在特定的选择培养基上,未融合的亲本细胞(B淋巴细胞和骨髓瘤细胞)和融合的具有同种核的细胞(BB融合细胞、瘤瘤融合细胞)都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞才能生长,这种杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量繁殖,又能产生单一的特异性抗体。第二次筛选后可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。(3)用促性腺激素可促使良种母畜超数排卵;精子需获能后才能进行受精作用;防止多精入卵的两道屏障依次是透明带反应、卵细胞膜反应。(4)题中所述体现物种多样性原理。(5)由题图可知三种酶的识别序列和切割位点各不相同,因此要防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状,该DNA分子在图示的4个位置被切开后,在位置2和3处应不能产生相同的黏性末端,由题意可知,在位置2和3处不能为同一种酶,故答案选C。(6)cDNA文库是利用mRNA反转录获得的,除去了基因结构中内含子的干扰,实验容易成功,为让目的基因在羊的乳汁中表达,应在目的基因前加上羊的乳腺蛋白基因的启动子,构建成基因表达载体;基因表达载体常用显微注射法导入受精卵,获得重组细胞。胚胎移植时要对受体进行同期发情处理,这样可以为胚胎移植入受体子宫提供相同的生理环境;早期胚胎的培养中,除基本营养成分外,还需要添加动物血清。6如图是一个人工农业生态系统模式图(大棚温度、CO2浓度等可适当控制)。请据图回答:(1)该生态工程所遵循的基本原理是_(写两种)。(2)相对一般农业生态系统而言,此生态系统能提高经济效益,主要原因是充分利用了_中的能量。(3)沼气池中的微生物在该生态系统中的主要功能是_;沼气燃烧后生成的CO2通入大棚内的意义是_。(4)农作物青贮的主要操作是:甘薯藤切段填压进入青贮窖中密封一段时间,其目的在于_。(5)请用箭头和文字表示这个生态系统中能量流动的图解(各种生物的呼吸耗能不要求画出)。答案(1)物质循环再生原理、协调与平衡原理(2)粪便等废物(3)分解作用可以增加大棚中CO2浓度,增强植物的光合作用,提高作物的产量(4)通过微生物发酵,初步分解农作物秸秆中的有机物,有利于禽畜的消化吸收(5)解析(1)生态工程的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理及系统学和工程学原理。该生态工程依据的是物质循环再生、物种多样性和协调与平衡原理。(2)一般的农业生态系统中,粪便直接被分解者分解,秸秆直接燃烧,此人工农业生态系统充分利用了粪便和秸秆中的能量。(3)沼气池分解了粪便等废物,产生沼气。沼气燃烧产生的CO2进入大棚,增强了植物的光合作用。(4)青贮的作用是通过微生物发酵,初步分解农作物秸秆中的有机物,有利于禽畜的消化吸收。7已知哺乳动物的早期胚胎发育分为受精卵2细胞4细胞8细胞桑椹胚囊胚原肠胚几个阶段,请回答下列与胚胎发育及胚胎工程相关的问题。(1)从受精卵到桑椹胚阶段,细胞分裂的方式是_。透明带内有机物总量在_(填“减少”或“增加”)。最早的细胞分化发生在_期,其中_发育成胎儿的各种组织,滋养层发育成胎儿的_和_。(2)胚胎移植过程中需对供、受体母牛进行_,并进行_,用激素对供体母牛做_处理。把供体母牛子宫内的胚胎冲出来,叫作_。(3)胚胎分割是将发育良好、形态正常的_或_移入盛有操作液的培养皿中,然后用分割针或者分割刀进行分割。在进行分割时,要注意将内细胞团_分割。胚胎分割产生的个体具有_(填“相同”或“不同”)的特征。答案(1)有丝分裂减少囊胚内细胞团胎膜胎盘(2)选择同期发情处理超数排卵冲卵(3)桑椹胚囊胚均等相同解析从受精卵到桑椹胚阶段,细胞通过有丝分裂进行,透明带内的有机物总量在减少。囊胚期开始细胞分化,其中内细胞团发育成胎儿的各种组织。滋养层发育成胎儿的胎盘和胎膜。(2)胚胎移植时对供体母牛进行同期发情处理,用促性腺激素对母牛作超数排卵。把供体母牛内的胚胎冲出来叫冲卵。(3)胚胎分割时选桑椹胚或囊胚,且将内细胞团均等分割,使产生的个体具有相同的特征。8第三十届奥运会在英国伦敦举行,其中的马术比赛被称为贵族的运动,英国纯血马是世界顶级马术比赛的常用马种,其数量少,生育力低。现代生物技术能有效提高优质马的生育效率。请据此回答有关问题。(1)用_激素处理适龄纯血母马,可使其一次性排出比自然情况下多几倍到几十倍的卵子。将采集的卵母细胞人工培育至减数第二次分裂的中期,在显微镜下可观察到次级卵母细胞和_。(2)体外受精前要对精子进行一定的处理,使其_。(3)为获得同卵双胎或多胎,可以在胚胎发育的_期用机械方法将胚胎分割。(4)随着动物克隆技术的发展,人们可以将纯血马的_移入其他马的_细胞中,将其激活并发育成胚胎,植入代孕母马体内。为保证胚胎移植的成功,胚胎的供体和受体应保持_。(5)克隆技术在带来巨大社会效益和经济效益的同时,也对人们的传统观念造成了极大冲击,我国政府的态度是禁止_性克隆人。(6)把含有某外源基因的受体细胞培育成为一匹优质马还需要用到的技术有_(至少写出两种)。答案(1)促性腺第一极体(2)获能(3)桑椹胚或囊胚(4)细胞核去核卵母相同的生理环境(5)生殖(6)核移植技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术解析本题综合考查胚胎工程的相关知识。使动物多排卵通常用促性腺激素处理。对采集到的精子要先进行获能处理,然后才能进行受精作用。将卵母细胞培养到减数第二次分裂中期,在显微镜下可看到次级卵母细胞和第一极体。胚胎发育过程中要获得更多的个体,通常对桑椹胚期或囊胚期的胚胎进行胚胎分割移植。动物克隆技术是将动物体细胞核移植到去核的卵母细胞中,胚胎移植时要对供体和受体动物作同期发情处理,使其具有相同的生理环境。转基因动物的培育过程中需要用到基因工程技术、核移植技术、早期胚胎培养(即动物细胞培养)技术、胚胎移植技术等。9因为猪的基因和人类的基因存在一定相似度。据报道经过特殊处理的猪皮可在人身上存活3周左右,起到保护创面免受感染的作用。为了使移植的猪皮存活时间更长,有人设法导入人的相关基因(用P表示),获得转基因小白猪。其简单流程如图所示:(1)过程中形成重组DNA常用的酶有_;将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是_。(2)过程中,常用_酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养成纤维细胞时需要满足的条件是无菌、无毒的环境、_、温度和pH、_。(3)过程中所用的胚胎工程技术是_,然后将早期胚胎移入另一头与供体_但未经配种的代孕母猪的相应部位。(4)图中的卵母细胞应在体外培养到_期。答案(1)限制性核酸内切酶、DNA连接酶显微注射法(2)胰蛋白(或胶原蛋白)营养气体环境(或通气环境)(3)早期胚胎培养同期发情(或同时发情)(4)减数第二次分裂中解析实际上,基因工程仅仅创造出工程细胞,若要转化为产品,需要实施细胞工程或胚胎工程。过程是将重组细胞培育为可移植的早期胚胎的过程,为确保移植成功,需保证代孕母猪的子宫内生理状态与供卵母体的生理状态一致。10第41个世界地球日的主题为“珍惜地球资源,转变发展方式,倡导低碳生活”,实质就是实现经济与生态环境的可持续发展,如图是我国南方开始尝试的农业生态系统的结构模式图,它利用雏鸭旺盛的杂食性,吃掉稻田里的杂草和害虫,利用鸭不间断的活动产生中耕浑水效果,刺激水稻生长,用作物养猪、养鸭,用稻秆培育蘑菇、生产沼气,猪鸭粪、沼渣肥田,生产出无公害的大米与蛋肉类。请据图回答下列问题:(1)沼气池发酵产生的沼气能成为人类的能源物质,提高了该生态系统的能量利用率,这主要遵循了生态工程的_原理。(2)从生态学角度分析,人们建立图示的农业生态系统的主要目的是_。(3)“低碳生活”正在成为全社会的共识,成为人们所期待的最为主导的生存和发展方式,“低碳”指_。指出图中体现“低碳”的一个做法:_。(4)若此图为碳循环的部分示意图,与碳循环有直接关系的细胞器是_;在农业生产上,若将蘑菇房与蔬菜大棚相通,可提高蔬菜产量,试分析其增产的原因:_。答案(1)物质循环再生(2)实现生态系统内能量和物质的多级利用,提高农产品的产量,减少环境污染(合理地调整生态系统中的能量流动关系,提高能量利用率,减少环境污染)(3)较低(更低)的温室气体(二氧化碳为主)排放秸秆不作燃料,用于培育蘑菇、生产沼气(4)叶绿体和线粒体蘑菇呼吸产生的二氧化碳可以供蔬菜进行光合作用,使其光合作用增强解析(1)沼气池发酵产生沼气,提高了生态系统的能量利用率,主要遵循物质循环再生原理。(2)建立生态农业的目的是实现生态系统内能量和物质的多级利用,提高农产品产量,减少环境污染。(3)低碳是指较低的温室气体排放。体现“低碳”的作法:如秸秆不作燃料,用于培育蘑菇和生产沼气。(4)光合作用与呼吸作用参与碳循环,参与的细胞器有叶绿体和线粒体。蘑菇为真菌,只能进行呼吸作用,产生的CO2可供蔬菜光合作用所利用。11随着人们生活水平的提高,对乳制品的需求越来越大,为了扩大生产,提高产崽率,要进行良种牛的培育。如图为胚胎移植的基本程序及早期胚胎发育过程,请据图回答:(1)用_激素处理使供体母牛超数排卵。(2)冲卵实质上是用特定装置将供体母牛子宫内的_冲洗出来。通过_和早期胚胎培养也可以获得胚胎移植所需胚胎,但使用该方法需要对精子进行获能处理,通常采用的方法有培养法和_两种。卵子也需要有准备阶段,当达到_期时,才具备与精子受精的能力。(3)从A到E中,适宜牛的胚胎移植的时期有_。(4)图E中标号1所指为_,它将来发育成_。(5)胚胎早期培养所用的培养液成分一般比较复杂,除含有一些无机盐和有机盐类外,还需要维生素、_、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及_等物质。答案(1)促性腺(2)早期胚胎体外受精化学诱导法减数第二次分裂中(3)D、E(4)内细胞团胎儿的各种组织(5)激素血清解析常用促性腺激素处理,使供体母牛超数排卵,冲卵实质上是用特定装置将供体母牛子宫内的早期胚胎冲洗出来。通过体外受精和早期胚胎培养也可以获得早期胚胎。精子获能处理的方法有化学诱导法和培养法。卵子通常到减数第二次分裂中期才具备与精子受精的能力。胚胎移植常用囊胚或桑椹胚进行。图E中标号1所指为内细胞团,将来发育成胎儿的各种组织。胚胎早期培养所用的培养液成分一般比较复杂,除含有一些无机盐和有机盐类外,还需要维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及血清等物质。12请回答有关下图的问题:(1)图甲中所示的生物工程为蛋白质工程。该工程是指以_作为基础,通过对蛋白质的修饰或合成,对现有的蛋白质进行改造,或制造出一种新的蛋白质,以满足人类生产生活的需求。(2)图甲中序号所示过程叫做_,该过程遵循的碱基互补配对原则不同于翻译过程的是_(请将模板碱基写在前)。(3)如图乙,一个基因表达载体的组成,除了目的基因外,在基因尾端还必须有2_;图中3_的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。(4)若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产,则构建基因表达载体时,图乙中序号1代表的是乳腺蛋白基因的_;且在图甲中过程之前,要对精子进行筛选,保留含性染色体_的精子。(5)为获得较多的受精卵进行研究,图甲中过程一般用激素对供体做_处理;为提高培育成功率,进行过程之前,要对供、受体动物做_处理。若图甲中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢,则其在之前需进行体外培养到_期方能受精。(6)用_技术处理发育到_期或囊胚期的早期胚胎,可获得同卵双胎或多胎。若是对囊胚进行处理,要注意将_均等分割。答案(1)蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系(2)反转录AT(3)终止子标记基因(4)启动子X(5)超数排卵同期发情M中(6)胚胎分割桑椹胚内细胞团解析本题考查蛋白质工程及生物反应器的知识,意在考查识图析图能力和综合运用能力。(1)以蛋白质分子的结构及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,属于蛋白质工程的范畴。(2)图甲中序号是由RNA到DNA的过程,是反转录,遵循的碱基互补配对原则是AT、GC、UA。翻译过程碱基互补配对是AU、GC。(3)基因表达载体的结构包括目的基因、启动子、终止子及标记基因等,标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。(4)图乙中序号1代表启动子。对精子进行筛选,保留含性染色体X的精子,以便受精后得到雌性个体,利用乳腺反应器生产。(5)对雌性个体注射促性腺激素,可达到超数排卵的目的。在受精前,精子必须经过特殊的处理,以获取受精作用的能力,称为获能反应,卵子要培养至减数第二次分裂中期。(6)欲得到同卵双胎或多胎,可采用胚胎分割技术对桑椹胚或囊胚期的胚胎予以分割,但对囊胚分割时,需将内细胞团均等分割。13大肠杆菌pUC18质粒是基因工程中常用的运载体。某限制酶在此质粒上的唯一酶切位点位于LacZ基因中,如果没有插入外源基因,LacZ基因便可表达出半乳糖苷酶。当培养基中含有IPTG和Xgal时,Xgal便会被半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之,则形成白色菌落。下图表示利用此质粒实施基因工程的主要流程。请分析并回答问题。(1)对已获得的目的基因可利用_技术进行扩增。(2)目的基因插入质粒构建重组质粒的过程中,需要DNA连接酶恢复_键。(3)将试管I中的物质和大肠杆菌共同置于试管的目的是_;大肠杆菌需事先用Ca2进行处理,目的是_。(4)将试管中的菌液接种于选择培养基上,培养基中加入氨苄青霉素的作用是筛选出_。(5)若观察到培养基上出现_色菌落,则说明大肠杆菌中已成功导入了重组质粒。如果作为受体细胞的大肠杆菌也含有LacZ基因,则不利于重组质粒的筛选,原因是_。答案(1)PCR (2)磷酸二酯 (3)进行转化 使大肠杆菌细胞处于感受态 (4)导入pUC18质粒的大肠杆菌(5)白 无论大肠杆菌中是否导入重组质粒,均会出现蓝色菌落解析(1) PCR技术能在短时间内大量扩增目的基因,所以已获得的目的基因可利用PCR技术进行扩增。(2) DNA连接酶连接形成的是磷酸二酯键。(3)将试管I中的物质和大肠杆菌共同置于试管的目的是使目的基因进入受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和表达,即进行转化;大肠杆菌需事先用Ca2进行处理,增大细胞壁的通透性,使之处于易吸收周围环境中DNA分子的感受态。(4)由于质粒上含有氨苄青霉素抗性基因,因此导入质粒的大肠杆菌能抗氨苄青霉素,所以培养基中加入氨苄青霉素的作用是筛选出导入pUC18质粒的大肠杆菌。(5)重组质粒上的LacZ基因被破坏,不能产生半乳糖苷酶,若大肠杆菌中已成功导入了重组质粒,则其在含有IPTG和Xgal的培养基中形成白色菌落。如果作为受体细胞的大肠杆菌也含有LacZ基因,则无论大肠杆菌是否导入重组质粒,均会呈现蓝色菌落,这样不利于重组质粒的筛选。14重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板,通过多次PCR扩增,从而获得目的基因的方法。该技术在扩增较长片段的DNA、不同来源的DNA片段拼接、基因的定点诱变等方面具有广泛的应用前景。如图是利用重叠延伸PCR技术扩增某目的基因的过程。其主要设计思路是用具有互补配对片段的引物(图中引物2、引物3),分别PCR,获得有重叠链的两种DNA片段,再在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸获得目的基因。结合所学知识,分析下列问题。(1)引物中GC的含量影响着引物与模板DNA结合的稳定性,引物中GC的含量越高,结合稳定性_。(2)在第一阶段获得两种具有重叠片段DNA的过程中,必须将引物1、2和引物3、4置于不同反应系统中,这是因为_。(3)引物1、引物2组成的反应系统和引物3、引物4组成的反应系统中均进行一次复制,共产生_种双链DNA分子。(4)在引物1、引物2组成的反应系统中,经第一阶段形成图示双链DNA至少要经过_次复制。(5)若利用微生物扩增该目的基因,其基本步骤包括:_、_、微生物的筛选和培养、从菌群中获取目的基因。答案(1)越高(2)引物2和引物3存在互补配对片段,置于同一反应系统中它们会发生结合而失去作用(3)3(4)2(5)目的基因与载体结合(基因表达载体的构建)将目的基因导入受体细胞解析本题考查基因工程的相关知识,意在考查理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。(1)G与C配对需要形成三个氢键,所以引物中GC的含量越高,结合的稳定性越高。(2)引物2和引物3存在互补配对片段,置于同一反应系统中它们会发生结合而失去作用,所以必须将引物1、2和引物3、4置于不同反应系统中。(3)由图分析可知,共产生3种双链DNA分子。(4)在引物1、引物2组成的反应系统中,经第一阶段形成图示双链DNA至少要经过两次复制。(5)扩增目的基因的基本步骤包括基因与载体结合(基因表达载体的构建)、将目的基因导入受体细胞、微生物的筛选和培养,从菌群中获取目的基因。15抗冻蛋白是一类抑制冰晶生长的蛋白质,能降低水溶液的冰点,从而导致水溶液的熔点和冰点出现差值,这个温度差称为热滞值。昆虫抗冻蛋白的热滞值最高为36 ,鱼的热滞值为0.71.5 ,因此,昆虫抗冻蛋白在实际应用上具有更大的潜力。为了扩展一些植物的生存范围,科学家利用昆虫抗冻蛋白(AFPS)的异源表达,现已成功地提高了烟草的抗冻能力。请分析回答相关问题:(1)基因工程的核心步骤是_,这一过程需要的酶是_。将AFPS基因导入烟草细胞中,常用_法,这是因为烟草属于_(填“单”或“双”)子叶植物,当植物体受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的_,此操作过程中使用的运载体是_。(2)若检测AFPS基因是否整合到烟草的染色体上,一般采用_技术,若检测是否产生抗冻蛋白,一般采用_方法检测杂交带;还可以从_生物学水平进行抗冻鉴定。(3)生产上可将上述转基因烟草大范围种植,提高了农民的经济收入,从生态工程角度分析,主要体现了_原理。答案(1)基因表达载体的构建限制酶和DNA连接酶农杆菌转化双酚类化合物Ti质粒(2)DNA分子杂交抗原抗体杂交个体(3)整体性解析本题考查基因工程和生态工程,难度中等。(1)构建基因表达载体是基因工程的核心步骤,这一过程需要限制酶和DNA连接酶;将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法;农杆菌能感染双子叶植物;当植物体受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物,吸引农杆菌移向这些细胞;这一操作过程中使用的运载体是农杆菌的Ti质粒。(2)可以采用DNA分子杂交技术检测目的基因是否整合到受体细胞的染色体上;检测目的基因是否翻译形成蛋白质采用抗原抗体杂交技术。(3)在追求生态效益时考虑到社会效益、经济效益,这体现了生态工程的整体性原理。16.人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如下图1所示,请据图作答:(1)卵母细胞除从活体输卵管中采集外,还可从已处死的雌鼠的_中获取。(2)图1中的高血压相关基因作为_,质粒作为_,两者需用_切割后连接成重组载体,该过程与质粒上含有_有关。(3)子代大鼠如果_和_,即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达,然后可用其建立高血压转基因动物模型。.上图2是某科学家利用小鼠纤维母细胞等获得单克隆抗体的实验研究过程。请据图回答:(1)过程类似于植物组织培养技术中的_过程。过程的实质是_。(2)过程中需用到的生物诱导方法是_。(3)处需要筛选,其目的是_。答案.(1)卵巢(2)目的基因运载体同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶)限制酶切割位点(3)检测到体内有相关蛋白出现高血压.(1)脱分化基因的选择性表达(2)用灭活的病毒诱导(3)筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞解析本题考查基因工程和胚胎工程的相关知识,难度中等。.(1)对于实验动物大鼠,如果是从活体输卵管中采集的卵母细胞,可以直接与获能的精子在体外受精,如果是从已处死的雌鼠卵巢中采集的卵母细胞,需要在体外经人工培养到减数第二次分裂中期,才能与获能的精子受精。(2)图1中的高血压相关基因作为目的基因,质粒作为载体,两者需用同种限制性核酸内切酶切割,并形成相同的黏性末端后才能连接成重组载体,该过程与质粒上有限制酶切割位点有关。(3)若在子代大鼠的体内检测出与高血压相关的蛋白质,则从分子水平上说明高血压相关基因已成功表达;若子代大鼠的血压升高,则从个体水平上说明高血压相关基因已成功表达。.(1)过程可以将细胞诱导为干细胞,类似于植物组织培养技术中的脱分化;过程形成了不同的细胞,为分化过程,实质是基因的选择性表达。(2)过程是诱导动物细胞融合,可以用物理方法、化学方法或生物方法,其中生物方法可以用灭活的病毒诱导。(3)处需要筛选,其目的主要是筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。17如图所示为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养)。请据图回答:(1)OA段的培养称为_培养,AB段可能发生了_现象,需要用_酶处理使组织细胞分散开来。(2)G点之后的细胞能克服_,并朝着_的方向发展。(3)为使进行同体细胞或组织移植时细胞的核型不变,实际使用或冷冻保存的细胞应为图中_的细胞。(4)动物细胞培养和植物组织培养过程中,就细胞增殖、分化来说,动植物细胞都要进行_,不同的是植物细胞还要进行_。(5)为制备单克隆抗体,需将_注射到小鼠体内,以此获取_细胞,同时可选取图中_点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞,所选取的细胞,其细胞膜上的_比正常细胞显著减少。为筛选能够产生单克隆抗体的杂交细胞,可用_培养基达到目的。答案(1)原代细胞接触性抑制(接触性抑制)胰蛋白(2)细胞寿命的自然极限,获得不死性(含义对即可)等同于癌细胞(癌细胞)(3)BC(4)细胞增殖(细胞分裂)脱分化和再分化(5)抗原反复(抗原)浆(效应B)G糖蛋白选择解析(1)由图可知:OA段称为原代培养,AB段增殖代数不变,说明发生了接触性抑制。需用胰蛋白酶处理。(2)G点后的细胞可无限增殖,说明其细胞克服了细胞寿命的自然极限,获得不死性。朝着癌细胞的方向发展。(3)冷冻保存的细胞为BC段的细胞。(4)动物细胞培养和植物组织培养过程中,细胞均要进行细胞增殖、脱分化和再分化。(5)为制备单克隆抗体,需将抗原反复注射到小鼠体内,以获得浆细胞,同时选用G点的细胞(无限增殖)与该细胞融合成杂交细胞,因为G点细胞可无限增殖,故其细胞膜上糖蛋白减少。用选择培养基培养,以筛选能够产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。18下图表示应用现代生物技术制备H7N9病毒单克隆抗体的流程,请回答下列问题。(1)过程表示_,过程用到的工具酶是_。(2)构建基因表达载体时,目的基因的首端必须含有_,过程常用的方法是_,目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是_。(3)从分子水平上鉴定目的基因是否转录可采用_技术,对于转基因成功的细胞还要进行克隆化培养和_检测,经多次筛选获得足够数量的该类细胞。(4)细胞是_,细胞的特点是_。(5)若要预防H7N9禽流感,可用图中的_作为疫苗。答案(1)逆转录限制性核酸内切酶(限制酶)(2)启动子显微注射法转基因生物的DNA上是否插入了目的基因(3)分子杂交抗体(4)浆细胞既能无限增殖,又能产生抗体(5)抗原蛋白解析本题考查基因工程及单克隆抗体制备的知识,意在考查能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容。能运用所学知识的观点,通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理的判断或得出正确的结论的能力。(1)据图分析可知,过程表示逆转录过程,为从DNA上获取目的基因的过程,需要的工具酶是限制性核酸内切酶。(2)基因表达载体主要由目的基因、标记基因、启动子、终止子组成。过程为重组DNA导入受体细胞,常用显微注射法,目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是转基因生物的DNA上是否插入了目的基因。(3)可采用分子杂交技术鉴定目的基因是否转录,转基因成功的细胞要进行抗体检测。(4)小鼠受抗原刺激后,可由B细胞增殖分化形成浆细胞,即细胞,浆细胞可产生抗体。细胞为杂交瘤细胞,既能无限增殖,又能产生抗体。(5)图中抗原蛋白是H7N9病毒基因表达的产物,可作为疫苗预防H7N9禽流感。
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