实验课小鼠饲养ppt课件

小鼠饲养,1,小鼠（Mouse. Mus. musculus）属哺乳纲、啮齿目、鼠科、小鼠属。 小鼠来源：野生鼷鼠。 什么时候开始人工饲养小鼠？ 从17世纪开始用于解剖学研究及动物实验，经长期人工饲养选择培育，已育成多达千余个独立的远交群和近交系，分布遍及世界各地。 近交系动物：也称为纯系动物。是采用兄妹连续交配繁殖20代以上而培育出来的纯品系动物。 远交系动物：是指一个动物种群在五年以上不从外部引进其他任何品种的新血缘，由同一血缘品种的动物进行随意交配。,2,为什么广泛的使用小鼠？ 由于小鼠繁殖快，饲养管理费用低，所以成为生物医学研究中广泛使用的实验动物，也是当今世界上研究最详尽的哺乳类实验动物。小鼠共有20对染色体（2n=40），已培育成许多近交系。,3,一、行为和习性 1. 小鼠胆小，易于受惊，对外界环境的改变反应敏感。受惊时,尾巴挺直并猛力甩动，如强光或噪声刺激可导致哺乳母鼠神经紊乱，发生食仔现象。 2. 小鼠在人工驯养条件下,性情温顺易于捕捉，一旦逃出笼外过夜则恢复野性，行动敏捷难以捕捉。 3. 小鼠喜欢阴暗，固定一处睡眠营巢。傍晚活动加强，夜间更加活跃， 其进食、交配、分娩多发生在夜间。 4. 小鼠是典型的啮齿动物，门齿终生生长。因此小鼠有啃咬习惯， 以此来磨损门齿并保持其长短的恒定。 5. 小鼠为群居动物，当群饲时，其饲料消耗量比单个饲养时多，生长发育也快。,4,6. 雄鼠放在一起易发生互斗。 源于一窝的雄鼠或断奶后同笼饲养的雄鼠间则较少攻击。 外来雄鼠常招致几只雄鼠的集体攻击。 群居优势在雄性很明显，表现为群体中处于优势者保留胡须,被称为“理发师”,而处于劣势者胡须被拔光。 雄鼠具有分泌醋酸胺臭气的特性，是小鼠饲养室内特异臭气的主要原因。 7. 小鼠对低温非常敏感，由于运输、 环境改变而致低温可很快引起小鼠死亡。,5,二、解剖学特点 1. 外观 嘴尖，头呈锥体形，嘴脸前部两侧有触须，耳耸立呈半圆形。 小鼠体形小，90日龄的昆明小鼠体长为911厘米，体重为3555g 。 一般雄鼠大于雌鼠。 尾长约与体长相等，成年鼠尾长约15厘米。 尾功能主要有：平衡、散热和自卫等。 尾血管分布情况：有四条血管,尾巴的背腹面各有一条静脉，两侧各有一条动脉。,6,被毛颜色有白色、野生色、黑色、肉桂色、褐色、白斑等。小鼠的毛色基因已研究得比较清楚， 因此，毛色常作为小鼠遗传学分析中的遗传标记和品系鉴定的依据之一。小鼠毛色由五个主要的基因位点所决定即Aa、Bb、Cc、Dd、Ss。 健康小鼠被毛光滑紧贴体表，四肢匀称，眼睛亮而有神。,7,2. 骨骼系统 小鼠上下颌各有两个门齿和六个臼齿，16颗牙。门齿终生不断生长。 尾椎2730个。 肋骨有1214对，其中7对与胸骨接连，其它57对呈游离状态 。 小鼠骨髓为红髓，终身造血。,8,3. 内部脏器 小鼠为杂食动物。食道细长约2cm,胃分前胃和腺胃，有嵴分隔，前胃为食管的延伸膨大部分。胃容量小（1.01.5ml），胃功能较差，不耐饥饿。 肝脏是腹腔内最大的脏器，分左、右、中、尾四叶组成，具有分泌胆汁，调节血糖，贮存肝糖和血液，形成尿素，中和有毒物质等功能。,9,4. 淋巴系统 淋巴系统很发达，性成熟时胸腺最大。 小鼠没有扁桃体。外来刺激可使淋巴系统增生。 5. 生殖系统 雌性子宫呈 “Y”型，分为子宫角、子宫体、子宫颈。 卵巢为系膜包绕，不与腹腔相通，故无宫外孕。 阴道在出生时关闭，从断奶后至性成熟才慢慢张开。 乳腺发达，共有5对，3对位于胸部，腹部有2对。,10,雄性为双睾丸，幼年时藏存于腹腔内，性成熟后则下降到阴囊， 其表面为纤维结缔组织， 内部有许多曲细精管和间质组织所组成。 精子在通过附睾期间成熟，并与副性腺分泌物一同在交配时射入雌鼠阴道内。 （副性腺分泌物有营养精子、形成阴道栓等作用。）,11,三、生理学特性 1. 生长发育 小鼠受精卵在输卵管壶腹部受精后开始分裂发育, 约3天进入子宫，约第5 天开始着床，妊娠期为1921天。 胎儿产出后母鼠撕破羊膜，咬断脐带，吃掉胎盘。新生小鼠赤裸无毛,皮肤肉红色,不开眼，双耳与皮肤粘连。 初生小鼠即可发声，嗅觉和味觉敏感。3日龄仔鼠脐带脱落,皮肤由红转为白色，开始长毛并出现胡须，,12,46日龄双耳张开耸立。 78日龄四肢发育开始爬动游走，被毛逐渐浓密，下门齿长出。 910 日龄有听觉，被毛长齐。 1214日龄睁眼，长出上门齿，开始采食及饮水。 3 周龄可离乳独立生活。 4周龄，雌鼠阴腔张开。 5周龄，雄鼠睾丸降落至阴囊，开始生成精子。 60日龄体成熟。 健康小鼠寿命可达1824个月，最长可达3年。,13,2. 体温的调节 新生小鼠在40日龄前其体温是被动调节，在被毛长齐以前，主要依靠母鼠维持体温。40日龄后,体温自动调节,正常情况下保持恒定。,14,水的调节 小鼠体表面积相对较大，环境温度的波动常可引起小鼠发生明显的生理学反应。 小鼠对寒冷的应答反应为不发抖产热作用。寒冷静态下小鼠产生的热量相当于基础代谢率的3倍，比任何其它动物的变化都大。 小鼠汗腺不发达，不能加大喘气，唾液分泌能力有限。主要通过代谢率下降以及耳血管扩张来加快散热。,15,外界温度变化太大,可很快使小鼠丧失体温的恒定性。 低温能造成小鼠繁殖力下降,抗病力下降，短时间内可导致小鼠死亡。 持续高温（32以上）也常常引起小鼠死亡。 研究发现小鼠在2125环境温度区内生长较快，产仔多，活力强。,16,小鼠可通过呼出的气体在鼻腔内冷却以及尿液的高度浓缩来保持水分。 与大多数哺乳动物相比小鼠对饮水量不足更为敏感，因为小鼠水分代谢的半衰期仅为1.1天,比大的哺乳动物要快得多， 因此，对小鼠需要供给充足的饮水。小鼠饮水量为47ml天。,17,3. 正常生理生化常数 （1）一般生理值 体重：昆明成年小鼠3555g 寿命：23年 妊娠期：1921天 性周期：45天 心率：600（328780）次分 呼吸量：0.090.23ml次 饮水要求量：47ml只天 排尿量：13ml天 体成熟：6090天 哺乳期：1823天 体温：37.538.8 呼吸数：163（84230）次分 饲料要求量：37g只天 排便量：1.42.8g天,18,（2）血液指数 血压：951256790mmHg 总血量：7.78（4.912.1）ml100g体重 红细胞：9.3（7.712.5）106mm3血 红细胞压积：41.5mldl血,19,四、生殖生理 1. 性成熟 小鼠性成熟早， 雄鼠35日龄睾丸出现精子，4560日龄性发育成熟。 雌鼠20 日龄后阴道皮肤逐渐变薄，阴道开口，其阴道开口与卵巢机能活动相一致。一般雌鼠3650日龄，具有生殖能力。,20,2. 发情 雌鼠性成熟后，象其它哺乳动物一样，卵巢间断而周期性的产生卵细胞并分泌雌性激素，黄体细胞分泌孕激素。在激素的作用下雌鼠出现明显的动情周期称为性周期。雌鼠全年多次发情，性周期45天。,21,性周期可分为动情前期,发情期,动情后期,动情间期（休情期）4个阶段。 每个阶段的阴道粘膜可发生典型变化。 根据阴道涂片所观察到的阴道上皮细胞变化，可进一步推测卵巢、子宫功能的周期性变化及激素变化和所处的发情阶段。,22,3. 交配 小鼠体成熟一般多为6090天,是适宜的配种日龄。一般发情后23小时即可排卵,排卵期34天，但在排卵期仅数小时内才允许公鼠交配。 雌鼠交配后，在阴道口形成一个白色的阴道栓，是公鼠的精液、母鼠的阴道分泌物和阴道上皮混合遇空气后变硬的结果，可防止精子倒流，提高受孕率。阴道栓常视为交配成功的标志。阴道栓在交配后1224小时自动脱落。,23,雌鼠产后1224小时可发情，此时交配可造成产后妊娠（边哺乳边怀孕）。 4. 妊娠 妊娠期1921天，妊娠期的长短与小鼠品系及个体、环境因素、排卵数量、受精卵种植率、胎次等有关。,24,5. 分娩 小鼠的分娩多在夜间进行。产前不安，不停地整理产窝，约4分钟产仔一只，1分钟后胎盘产出，母鼠将胎盘嚼食。整个过程约经1小时。有时可出现因受精卵种植延迟导致的产后35天又产仔的现象。 小鼠每胎产仔615只。第26胎产仔数较多，一般7胎后产仔数逐渐下降。,25,6. 哺乳 哺乳期1823天，小鼠带仔数一般为810只，因母鼠营养状况、体质状况、 生产能力等因素的不同而变化。母鼠哺乳仔数太多可导致仔鼠发育不均。如带仔数不足时可将其它多余的同龄仔鼠放入寄奶代乳，但放入前应使其感染新窝的气味，以免被代乳母鼠咬死。留种仔鼠可适当延长哺乳期到23天。,26,7. 繁殖时限 小鼠性活动可维持1年左右，作为种鼠使用时间一般为68个月,之后其繁殖能力下降,仔鼠质量越来越差，因此应予淘汰。近交系小鼠一般连续生产56胎,即可淘汰。,27,第二节 小鼠的主要用途 小鼠在科学研究中的使用数量是首屈一指的。 小鼠在生物学、医学、农业、化工、畜牧兽医等学科的科学研究中都有非常重要的作用。 尤其在生命科学研究中其应用范围遍及各个领域如：生殖生理、肿瘤、毒理、药理、免疫和微生物的研究工作以及药品、生物制品的制造和检定工作。,28,具有遗传性疾病的突变系为研究人类遗传性疾病的病因、发病机理和治疗，提供了自然的模型动物。 如：家族性肥胖、白化病、全身性红斑狼疮、侏儒症等都有相应的突变系小鼠可供研究使用。 转基因小鼠可用于研究基因的功能、表达和调节，探索疾病的分子遗传学基础和基因治疗的可能性和方法。,29,二、肿瘤学研究 由于小鼠有许多近交系，部分近交系有其特定的自发性肿瘤，可利用其自发肿瘤与人体肿瘤的相似之处做为动物模型进行肿瘤发生、发展和治疗的研究。成为活的癌瘤细胞“试管”，是研究人类肿瘤生长发育、转移和治疗的绝佳动物。,30,三、传染性疾病的研究 小鼠对多种微生物易感,如：沙门氏菌、日本血吸虫病、脊髓灰质炎和钩端螺旋体等,所以，常用小鼠感染诱发出类似于本体动物发生的传染性疾病，而制造出相应的动物模型，从而对病原体的致病力，宿主抵抗的机理、病理和治疗进行研究。,31,四、药物研究 小鼠常用于药物安全性评价、治疗效果评价、效价测定及生物制品检定。 小鼠特别适合于药物急性毒性实验，测定药物或化学制剂的半数致死量（LD50）和药物致癌性试验。 小鼠广泛用于血清、疫苗等生物制品的检定。,32,五、免疫学研究 使用BALBc小鼠免疫后的脾细胞与骨髓瘤细胞融合， 进行单克隆抗体的制备和研究。单克隆抗体广泛用于疾病诊断、治疗和分子生物学研究。,33,六、内分泌疾病的研究 小鼠自发或诱发的内分泌腺结构的缺陷常引起类似人类的内分泌疾病，是内分泌研究领域的很好的动物模型。如胰岛发育不全造成的肥胖症； 七、老年学研究 由于小鼠寿命短，常用于研究衰老的起因和机理。,34,第三节 常用品种及品系 1. 昆明小鼠：白色。 1926年美国Rockfeller 研究所从瑞士引入白化小鼠培育成瑞士种小鼠。 1946年我国从印度Haffkine 研究所将瑞士种小鼠引入云南昆明, 1952年由昆明引入北京生物制品所， 1954年推广到全国各地。 该小鼠特点是高产,抗病力强，适应性强，常见的自发肿瘤为乳腺癌，发病率约25。国内各地昆明小鼠遗传背景不一致。目前由KM小鼠已培育成C1（中国1号）、615、TA2、AMMS1等近交系。,35,第四节 饲养管理 一、饲养环境 小鼠对环境的适应性的自体调节能力和疾病抗御能力较其他实验动物差，因此必须根据实际情况给予一个清洁舒适的生活环境。 小鼠临界温度为低温10，高温37，温度中性范围3033。饲养环境控制应达到如下要求：温度1829；相对湿度4070；最好控制在1822,湿度5060。一般小鼠饲养盒内温度比环境高12，湿度高510。,36,要保持温度、湿度相对稳定，日温差不超过3,否则会直接影响小鼠的生长发育、生产繁殖、甚至导致小鼠发生疾病，从而影响实验结果。温湿度的相对稳定对于建筑条件较差的地方可用空气调节器、加湿器、在北方用暖气进行调节。为了保持室内空气新鲜，换气次数应达到1020次小时。,37,现在我国普遍采用无毒塑料鼠盒，不锈钢丝笼盖，金属笼架。笼架一般可移动，并可经受多种方法消毒灭菌。 笼盒既要保证小鼠有活动的空间，又要阻止其啃咬磨牙咬破鼠盒逃逸，便于清洗消毒。 饮水器可使用玻璃瓶、塑料瓶，瓶塞上装有金属或玻璃饮水管，容量一般为250ml或500ml。,38,垫料是小鼠生活环境中直接接触的铺垫物，起吸湿（尿）、保暖、做窝的作用。因此垫料应有强吸湿性、无毒、无刺激气味、无粉尘、不可食，并使动物感到舒适。垫料必需经消毒灭菌处理，除去潜在的病原体和有害物质。一般垫料以阔叶林木的刨花或锯末为宜，也可用玉米芯加工粉碎除尘后使用。 在实验中切忌用针叶木（如：松）刨花做垫料，这类刨花发出具有芳香味的挥发性物质，可对肝细胞产生损害，使药理和毒理方面的实验受到极大干扰。,39,国外有专门的垫料生产企业，进行垫料的生产，而我国的垫料产业尚需开发。目前我国实验动物部门大部分采用木材加工副产品如锯末、刨花等，其来源、树木种类很难控制，给实验动物质量控制带来很多不利影响。,40,二、饲料和饮水 1. 饲料（feed） 小鼠应饲喂全价营养颗粒饲料，饲料中应含一定比例的粗纤维，使成型饲料具一定的硬度，以便小鼠磨牙。同时应维持营养成分相对稳定。 不同种类的小鼠有不同的营养标准，如纯系小鼠和种鼠的饲料所含蛋白质成分高于一般小鼠。,41,2. 饮水（drinking water） 小鼠的水代谢相当快，应保证足够的饮水。一级动物饮水标准应不低于城市生活饮水的卫生标准。二级动物的饮水须经灭菌处理。也可用盐酸将水酸化（PH2.53.0），使小鼠饮用酸化水，酸化水在一定程度上可抑制细菌的生长并杀死它们，其灭菌效果可达到要求。三、四级动物饮水用高压高温方法灭菌。,42,三、一般饲养管理 1. 饲喂 小鼠胃容量小，随时采食，是多餐习性的动物。成年鼠采食量一般为37克天，幼鼠一般为13克天。在鼠笼的料斗内应经常有足够量的新鲜干燥饲料， 种母鼠的负担重，能量消耗大，因此除供给足够的块料外，还要定时饲喂少量葵花籽。葵花籽供应量为0.51克天只成年鼠。或颗粒料的全价营养料，即用维生素合剂代替。,43,2. 给水 用饮水瓶给水，每周换水2-3次，成年鼠饮水量一般为47ml天，要保证饮水的连续不断，应常检查瓶塞，防止瓶塞漏水造成动物溺死或饮水管堵塞使小鼠脱水死亡。 小鼠在吸水过程中，口内食物颗粒和唾液可倒流入水瓶。为避免微生物污染水瓶，换水时应清洗水瓶和吸水管。严禁未经消毒的水瓶继续使用。,44,3. 清洁卫生和消毒 每周应至少更换两次垫料。换垫料时将饲养盒一起移去，在专门的房间倒垫料，可以防止室内的灰尘和污染。动物的垫料在使用前应经高压消毒灭菌。 要保持饲养室内外整洁，门窗、墙壁、地面等无尘土。 坚持每月小消毒和每季度大消毒一次的制度。即每月用0.1 新洁尔灭喷雾空气消毒一次,室外用3来苏尔消毒,每季度用过氧乙酸（0.2）喷雾消毒鼠舍一次。笼具、食具至少每月彻底消毒一次，鼠舍内其它用具也应随用随消毒。可高压消毒,45,4. 动物健康的外观检查 这是检查动物健康状况的一项常规工作。外观判断小鼠健康的标准是：食欲旺盛；眼睛有神，反应敏捷；体毛光滑，肌肉丰满，活动有力；身无伤痕，尾不弯曲，天然孔腔无分泌物，无畸形；粪便黑色呈麦粒状。,46,5. 性别鉴别 成年鼠性别很易区分，雄鼠的阴囊明显；雌鼠可见阴道开口和五对乳头。 幼鼠或仔鼠则主要从外生殖器与肛门的距离判定，近者为雌，远者为雄。另外，雌鼠肛门和生殖器之间有一无毛小沟，而雄鼠则在肛门和生殖器之间长毛。再者，雌鼠有比雄鼠明显很多的乳头。,47,第五节 繁殖生产 一、种鼠 初选时按健康标准一般选留25胎的仔鼠，适当延长哺乳期到23天，然后雌雄分开。同时做好记录。在育成期中出现异常者应立即淘汰，同时应适当控制营养，以防种鼠过度肥胖，影响配种。 小鼠初配的适龄期为6090天。应选择体质强壮、活泼、被毛紧披而有光泽、尾肥嫩粉红血管明显、眼鼻无异物、无外伤肿胀溃烂、外生殖器发育良好、生长发育正常的小鼠作为种鼠。,48,要及时进行怀孕检查，通过观察阴道栓可知其准确怀孕日期。同时小鼠怀孕10天左右时，腹部隆起。当倒提小鼠时这种隆起可非常容易的观察到。 对于封闭群小鼠，种鼠置同一笼中配种后20天或仔鼠离乳后20天仍未受孕，可调换公鼠，20天后仍未受孕可将其淘汰。 及时淘汰体质差，与原品系特征不同的种鼠，繁殖种鼠月龄超过911 月也要及时淘汰。 雌鼠分娩时其周围环境尽量不要变动，否则可使雌鼠受惊，导致食仔。,49,3. 育种鼠群的管理 核心种群来的育种幼鼠要雌雄分开饲养，同窝雄鼠可置于同一笼中，注意不同窝离乳的雄鼠不应同笼饲养,否则可引起打斗而致伤。注意营养适中防止过肥,而影响配种。其它饲养管理同生产种鼠一样，要保证充足的饲料饮水，及时更换垫料。如有可疑病鼠立即全盒小鼠淘汰。,50,二、繁殖方法 1. 长期同居法：又称频密繁殖法，此法在管理上较简单， 可减少疾病传染机会。采用将1只雄鼠与1只雌鼠同居。在雌鼠分娩后几小时内可再行交配受孕。一般情况下每只雌鼠每月可产1胎。这样可充分利用小鼠的繁殖能力（特别是利用雌鼠产后发情）。由于雌鼠边怀孕边哺乳负担过重，应注意加强营养。,51,2. 定期同居法：又称非频密繁殖法。将1只雄鼠与6只雌鼠编为一繁殖单元。 每周向雄鼠笼放入1只雌鼠，即依周次使雄鼠与1只雌鼠同居，同时将受孕雌鼠提出，置单笼分娩、哺乳、离乳，以此类推。每只雌鼠生产周期为42天，比长期同居法要长。但便于有计划供应和生产，而哺乳仔鼠又得到充分的营养，仔鼠发育好，离乳时平均体重较前法重12g。这时，要经常检查种鼠的生殖能力，及时淘汰受孕能力低的种鼠并增补新种。,52,53,