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专题九 生物技术实践,第18讲 微生物的应用和生物技术 在食品加工中的应用,-3-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,命题点一微生物的培养与应用 1.基本技术 (1)制备培养基:计算称量溶化灭菌倒平板。 (2)无菌技术:主要指消毒和灭菌。 消毒方法:常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。 常用灭菌方法: 灼烧灭菌接种环、接种针等金属器具; 干热灭菌主要针对玻璃器皿等; 高压蒸汽灭菌主要针对培养基等。 (3)倒平板操作:待培养基冷却至50 左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。 (4)平板划线操作:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。,-4-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,(5)稀释涂布平板法:先将菌液进行一系列梯度稀释后涂布平板,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散到培养基的表面,从而在培养基表面形成单个菌落。如下图所示:,-5-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,2.微生物的分离与计数,-6-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,-7-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,-8-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,思维拓展 (1)平板划线法适用于微生物的纯化,但不能用于微生物的计数。 (2)土壤中纤维素分解菌的筛选流程中的“选择培养”是否需要,应根据样品中目的菌株数量的多少来确定。,-9-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,运用不同培养基的原理解答有关微生物分离和鉴定的题 (2015甘肃河西三校一联)回答下列关于微生物培养的问题。高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了能高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示。,-10-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,(1)从用途上来说,号培养基属于 培养基;从物理状态上来说,号培养基属于固体培养基,配制时一般要加入 。 (2)进行过程的目的是 ,过程是为了 ;过程所使用的接种方法是 。 (3)、号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是 。 (4)一般对配制的培养基采用 法灭菌,对接种环采用 灭菌,其中“灭菌”是指 。 (5)在高温淀粉酶运用到工业生产前,需对该酶的 和 进行测定。,答案,-11-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,方法规律 选择培养基及鉴别培养基的运用技巧 (1)分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基,再用鉴别培养基。选择培养基为液体培养基,以纤维素作为唯一碳源,以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长,而其他绝大多数微生物不能正常生长;利用液体培养基能使营养成分被充分利用,以增加纤维素分解菌的浓度。 (2)鉴别培养基含琼脂,为固体培养基,因为要在培养基上形成我们肉眼可见的菌落。刚果红染色法就是应用的此培养基。,-12-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,(2015山东烟台诊断测试)尿素是一种重要的农业肥料,但是不经过细菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌),培养基成分如下表所示,实验步骤如图所示,请回答下列问题。,-13-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,(1)此培养基能否用于植物组织培养? ,理由是 。 (2)培养基中的氮源是 ,这种培养基在功能上属于 培养基,目的是只允许能合成 的微生物生长,其他微生物均不能生长。 (3)欲从土壤中分离获取上述特定微生物,可采用 法进行接种。 (4)在以尿素为唯一碳源的培养基中加入 ,使指示剂变红色,而筛选纤维素分解菌的方法是 法。,答案,-14-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,命题点二传统发酵技术的应用 1.制作果酒、果醋、腐乳、泡菜所需菌种的比较,-15-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,2.果酒、果醋、腐乳及泡菜的制作原理及过程,-16-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,-17-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,掌握微生物发酵原理,解答有关果醋、果酒、腐乳、泡菜制作的题 微生物在人们的生活生产中无处不在,为人们生活增添了诸多乐趣。 (1)很多家庭都会酿酒,请完成下列相关问题。 酿酒时先将米煮熟的目的是 。 冷却到30 后才能加酒药的原因是 。 如果时常开坛盖舀酒,不久酒就会变酸,其原因是 。,-18-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,(2)中国的臭豆腐驰名中外,历史悠久。臭豆腐外观青色,“闻着臭,吃着香”。在臭豆腐的制备过程中,常用的微生物主要是 ,在此过程中,豆腐相当于微生物生长的 。 (3)在腌制泡菜的过程中,起主要作用的微生物是 ,用水封坛的作用是 ;欲检测泡菜在腌制过程中产生的亚硝酸盐含量,使用检测试剂后颜色的变化是 。,答案,-19-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,方法规律 微生物发酵过程中的灭菌措施 应该从原料、装置和实验过程三个层次进行无菌操作。 (1)果酒与果醋制作中原料的消毒 榨汁前葡萄应先冲洗再去枝梗,因为若先去梗,则会使一些微生物侵入果实内部,影响果酒的制作;体积分数为70%的酒精杀菌效果最强,若酒精浓度过低,则杀菌效果差,而浓度过高,又会使菌体表面蛋白质凝固形成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中,从而使杀菌效果受到影响。 (2)腐乳制作过程中的杀菌消毒 制作腐乳的玻璃瓶洗刷干净后用沸水消毒;酒、盐、香辛料都有杀菌作用;接种、封瓶时都要进行无菌操作。,-20-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,(2015江苏扬州质检)苹果除鲜食外,还可深加工为果酒、果醋、果汁、果酱等,使产品附加值成倍提高。下图是某厂进行苹果酒和苹果醋生产的基本工艺流程。请回答下列问题。,-21-,命题点一,命题点二,整合提升,题型突破,题组训练,(1)苹果的出汁率是果酒、果醋产量的保证。在制备苹果酒的过程中,为了提高苹果的出汁率,在压榨前可加入一定浓度的 酶和果胶酶,理由是这两种酶能 ,从而提高苹果的出汁率。 (2)发酵一定时间后,观察到甲罐内液面不再有 ,说明发酵基本完毕。 (3)在制备苹果醋的过程中,乙罐内先填充经灭菌处理后的木材刨花,然后加入含 菌的培养液,使该菌附着在刨花上,再让甲罐中发酵完毕的苹果酒流入乙罐,并在A处通入 。苹果醋发酵时控制的适宜温度一般比制苹果酒时的适宜温度 (填“高”“相等”或“低”)。,答案,-22-,失分误区,对选择培养基的选择方法辨析不清 防范策略 (1)在培养基中加入某种化学物质。例如,加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌;加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在主要营养成分完整的基础上加入。 (2)改变培养基中的营养成分。例如,缺乏氮源时可以分离出固氮微生物;石油作为唯一碳源时,可以分离出能消除石油污染的微生物。 (3)改变微生物的培养条件。例如,将培养基放在高温环境下培养,可以得到耐高温的微生物。,-23-,失分误区,防范演练 (2015河北保定模拟)某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌,设计实验步骤如下,请给予合理的补充。 (1)采样与培养:将采集的土样混匀后称取1 g,置于经过 法灭菌处理的 (填“固体”或“液体”)培养基中,28 振荡培养。 (2)接种与选择:为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行 处理。之后,将菌液涂布接种于以 为唯一碳源的固体培养基上,30 条件下培养。为避免污染,需将培养皿呈 状态放置。此外,为排除其他因素的影响,提高实验可信度,本步骤需设计 作为空白对照。,-24-,失分误区,(3)筛选与纯化:将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围,如果菌落周围的现象是 ,则说明此种菌能够 。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株,采用 法接种于新的培养基平板,可对菌株进行进一步的纯化。 我的失分点:,答案,
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