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2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体,一、动物细胞融合 1.概念： 是指_结合形成一个细胞的过程，也称 _。 2.诱导原理和结果： (1)诱导原理：_。 (2)诱导结果：形成_细胞。,两个或多个动物细胞,细胞杂交,细胞膜的流动性,杂交,3.诱导因素： 常用的诱导因素有_、_、_等。 4.意义：突破了_方法的局限，使_成为可能。,聚乙二醇(PEG),灭活的病毒,电激,有性杂交,远缘杂交,二、单克隆抗体 1.制备原理： (1)B淋巴细胞特点：一种B淋巴细胞分泌一种特异性抗体。 (2)骨髓瘤细胞特点：能在体外大量_。 (3)杂交瘤细胞特点：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂 交瘤细胞，既能_又能产生大量_。,增殖,无限增殖,特定抗体,2.单克隆抗体的制备： 3.单克隆抗体的优点：_、_、可大量制备。 4.单克隆抗体的应用： (1)作为_，具有准确、高效、简易、快速的优点。 (2)用于_和_。,骨髓瘤,杂交瘤,特异性强,灵敏度高,诊断试剂,治疗疾病,运载药物,杂交瘤,单克隆,抗体,【微点拨】 1.诱导动物细胞融合与植物细胞杂交融合的方法有什么不同？ 提示：动物细胞融合能用灭活的病毒进行诱导。 2.经促融处理后的细胞就是符合要求的杂交细胞吗？哪种融合细胞才是符合要求的？ 提示：不是。促融后可能会出现3种融合细胞：B-B融合细胞、瘤-瘤融合细胞、B-瘤融合细胞。其中B-瘤融合细胞(杂交瘤细胞)才是符合要求的细胞。,3.动物细胞完成融合的标志是什么？ 提示：动物细胞融合时，先是细胞膜发生融合，然后是细胞核的融合。当两个细胞核融合后形成具有单核的杂交细胞时，则标志着动物细胞融合的完成。 4.在制备单克隆抗体时，为什么不直接用经过免疫的B淋巴细胞(浆细胞)来获得单克隆抗体，而需要与骨髓瘤细胞杂交后来获取？ 提示：用于获得杂交瘤细胞的B淋巴细胞为浆细胞，是高度分化的动物细胞，培养时很难恢复分裂能力，不能进行无限增殖，获得大量单克隆抗体。,1.动物细胞融合和植物原生质体融合决定于( ) A.细胞膜的流动性 B.细胞膜的选择透过性 C.细胞质的流动性 D.细胞质中酶的活性 【解析】选A。动物细胞融合和植物原生质体融合决定于细胞膜的流动性。,2.基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞，用灭活的病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞( ) A.AAaa B.AaBb C.Aabb D.BBbb 【解析】选C。诱导融合处理后可能会出现3种融合细胞，即同种细胞相互融合，基因型为AAaa和BBbb，不同种细胞相互融合，融合后的杂交细胞基因型为AaBb，C项基因型细胞不可能出现。,3.要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖，形成细胞群。其原因是( ) A.在体外培养条件下，B淋巴细胞可以无限增殖 B.在动物体内B淋巴细胞可以产生多达百万种以上的抗体 C.每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应 D.每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 【解析】选D。B淋巴细胞的免疫具有特异性，即每一个B淋巴细胞只能产生一种与特定抗原结合的抗体。,4.科学家们用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是 ( ) A.经过免疫的T淋巴细胞 B.未经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的B淋巴细胞 D.未经过免疫的B淋巴细胞 【解析】选C。B淋巴细胞接受抗原刺激后，形成浆细胞，才能产生抗体，所以只有经过免疫的B淋巴细胞才会产生专一性的抗体。,5.灭活的病毒的抗原性和感染能力是( ) A.失去抗原性，具有感染能力 B.具有抗原性，也具有感染能力 C.失去抗原性，也失去感染能力 D.具有抗原性，失去感染能力 【解析】选D。灭活的病毒不具有生物活性，不具有侵染细胞的能力，但具有抗原性，能够促进动物细胞融合。,6.生物导弹是指( ) A.单克隆抗体 B.带有特定药物的单克隆抗体 C.杂交细胞 D.B淋巴细胞 【解析】选B。生物导弹用于定位杀死癌细胞，原理是利用抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素结合后注入体内，借助单克隆抗体的导向作用进行定位。,一、动物细胞融合 1.过程：,(1)融合过程：细胞膜融合细胞质融合细胞核融合。 (2)细胞膜融合的过程体现出细胞膜具有一定的流动性。 (3)融合后重组细胞的特点：融合形成的杂种细胞具有两种细胞的遗传信息，通过动物细胞培养，杂种细胞表现出两个亲本细胞的特点。,2.植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：,【易错提醒】 (1)灭活是指利用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。 (2)病毒在不同过程或操作中的“身份不同”。在免疫调节中病毒属于抗原，在基因工程中可作为载体，在细胞工程中可作为诱导剂。 (3)动物细胞融合与植物体细胞杂交相似，形成的杂交细胞包含两个亲本的遗传物质，其染色体数、基因组成、染色体组都是两个细胞之和，将表现出两个亲本的遗传特征。,1.(2014湛江高二检测)下列关于动物细胞融合的说法，错误的是( ) A.动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 B.动物细胞融合需要用纤维素酶处理 C.动物细胞融合时需人工诱导 D.常用的诱导动物细胞融合的因素有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激等,【解题关键】解答本题需关注以下两点： (1)诱导动物细胞融合可以用灭活的病毒。 (2)植物体细胞杂交诱导融合前需要去除细胞壁，而动物细胞无细胞壁。,【解析】选B。动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。动物细胞无细胞壁，所以诱导融合前不需要用纤维素酶处理。动物细胞融合需要人工诱导融合，诱导因素包括聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。,2.下图所示为细胞融合技术的一些过程：,(1)从A细胞和B细胞到C细胞的过程中，采用的方法中与诱导植物原生质体融合不同的是 处理。 (2)若A、B细胞为单倍体烟草植物的体细胞，那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了 。这种酶可能是 、 ，由此形成的细胞经培养形成的细胞团称为 。 (3)若将基因型为AaBB的番茄细胞与基因型为AAbb的番茄细胞融合，所形成细胞的基因型是 。 (4)若将染色体组成为2A+XX的人细胞与染色体组成为2B+XX的鼠细胞融合，培育成的人-鼠细胞的染色体组成是 。,【解题关键】解答本题要注意以下两点： (1)理解植物细胞融合和动物细胞融合过程的异同点。 (2)杂种植物细胞中染色体来自两个融合的亲本细胞。,【解析】(1)动物细胞融合特有的方法是用灭活的病毒诱导融合。 (2)植物细胞有细胞壁，若A、B细胞为单倍体烟草植物的体细胞，那么这样的细胞已经用纤维素酶和果胶酶脱掉了细胞壁；植物体细胞杂交获得的杂种细胞，经脱分化形成愈伤组织。 (3)(4)细胞融合后的染色体或基因分别是两种细胞的染色体或基因累加。,答案：(1)灭活的病毒 (2)细胞壁 纤维素酶 果胶酶 愈伤组织 (3)AAAaBBbb (4)2A+2B+2X+2X,【方法规律】生物工程技术产生后代个体的遗传物质或基因来源 (1)转基因生物：目的基因来自外源生物，绝大多数基因来自两个亲本。 (2)杂种植株：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。 (3)经细胞培养获得的动物细胞：遗传物质只来自一个亲本。 (4)动物细胞融合形成的杂交细胞：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。 (5)克隆动物：细胞核中的遗传物质来自供体动物，细胞质中的遗传物质来自提供卵母细胞的动物个体。,二、单克隆抗体 1.技术手段：动物细胞培养、动物细胞融合。 2.制备过程：,3.比较制备单克隆抗体中的几种细胞：,4.制备单克隆抗体的两次筛选： 第一次筛选：由于细胞融合是随机的，因此细胞混合物中融合细胞将以多种形式出现，因此必须从中筛选出既能分泌抗体同时又能大量增殖的杂交瘤细胞。 第二次筛选：从杂交瘤细胞群中选出能产生专一抗体的特异性杂交瘤细胞。,【易错提醒】 诱导融合的B淋巴细胞是经免疫产生的B淋巴细胞，未经免疫的B淋巴细胞不能产生抗体。,1.关于单克隆抗体制备过程的叙述，正确的是( ) A.可直接从动物体内获取B淋巴细胞进行培养 B.杂交瘤细胞具有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的双重特点 C.用灭活病毒诱导融合后形成的融合细胞即可产生单克隆抗体 D.经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产,【解题关键】明确制作单克隆抗体的步骤，诱导融合可能会产生多种融合细胞，但只有不同种细胞融合形成的杂交细胞才是符合要求的细胞。,【解析】选B。将骨髓瘤细胞与免疫后的B淋巴细胞融合，经过选择性培养基的筛选得到杂交瘤细胞，并经专一抗体检测后，培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞，即可得到单克隆抗体。杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞无限增殖的特点和B淋巴细胞产生特异性抗体的特点。诱导融合后可能会形成三种融合细胞，即同种细胞融合(B-B融合细胞、瘤-瘤融合细胞)、不同种细胞融合(B-瘤融合细胞)，故需要进一步筛选。,2.(2014徐州模拟)如图表示用生物工程制备人抗A抗体的过程。回答下列问题。,(1)人的红细胞膜表面有具有识别作用的凝集原，其化学本质是 ；从免疫学角度看，这种凝集原是 。 (2)图中细胞1是小鼠体内注入人A型血红细胞后获得的 细胞，这种细胞具有产生 的特点，但难以在体外培养。甲培养皿中培养的细胞2，是从患骨髓瘤的小鼠体内获取的骨髓瘤细胞，这种细胞在体外培养时能 ，但不会产生抗体。,(3)为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点，经特殊处理，在促细胞融合因子的作用下，使两种细胞发生融合，形成图中的细胞3，这种细胞称为 。把它放在乙培养皿中进行培养，则能产生大量的细胞群，这种方法称为 。 (4)过程的主要目的是 。通过过程或的培养方法能产生大量 抗体。,【解题关键】解答本题需注意两点： (1)单克隆抗体的制备所用两种细胞的特点。 (2)诱导动物细胞融合后需要经过两次筛选。,【解析】(1)人红细胞膜表面的凝集原具有特异性，化学本质是糖蛋白，从免疫学角度看，它是抗原。 (2)(3)免疫后的B淋巴细胞能产生特异性抗体，小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖，在选择培养基中，只有免疫后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞(细胞3)才同时具备分泌抗体的功能和保持细胞无限增殖两种特征。 (4)过程的主要目的是筛选出能产生单一抗A抗体的杂交瘤细胞，过程或分别是体内培养和体外培养，以产生大量抗A单克隆抗体。,答案：(1)糖蛋白 抗原 (2)B淋巴 单一的抗A抗体(或单一的特异性抗体) 大量增殖 (3)杂交瘤细胞 克隆 (4)筛选出能产生单一抗A抗体的杂交瘤细胞 抗A单克隆,
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