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大肠杆菌病(Colibacillosis),大肠杆菌是正常肠道菌群的组成部分,是非致病菌,一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性,尤其对婴儿和幼畜(禽),常引起严重腹泻和败血症。随着大型集约化养畜 (禽)业的发展,病原性大肠杆菌对畜牧业所造成的损失已日益明显。,病原:大肠杆菌,血清型:菌体 (0)抗原171种,表面 (K)抗原近80种,鞭毛抗原56种,因而构成许多血清型。血清型用O:K:H O:K O:H表示,最近,菌毛 (F)抗原被用于血清学鉴定。在引起人畜肠道疾病的血清型中,有肠致病性大肠杆菌 (EPEC)、肠产毒素性大肠杆菌 (ETEC)、肠侵袭性大肠杆(EIEC) 和肠出血性大肠杆菌(EHEC O157:H7 )。多数ETEC都带有F抗原。,肠产毒型大肠埃希菌(enterotoxigenic E.coli, ETEC),婴幼儿和旅游者腹泻致病物质肠毒素enterotoxinheat labile enterotoxin(LT)heat stable enterotoxin(ST)定植因子(菌毛),肠侵袭型大肠埃希菌(enteroinvasive E.coli, EIEC),似菌痢样,有脓血便,有里急后重致病机理侵袭结肠粘膜上皮并繁殖细菌死亡后释放内毒素,引起炎症,婴幼儿腹泻致病机理粘附和破坏肠粘膜微绒毛上皮细胞排列紊乱,功能受损,导致腹泻,肠致病型大肠埃希菌(enteropathogenic E.coli, EPEC),肠出血型大肠埃希菌(enterohemorrhagic E.coli, EHEC),亦称为Vero毒素大肠埃希菌血清型为 O157:H7临床表现轻重不一10%小于十岁患儿,有严重并发症,死亡率高致病因子菌毛毒素 Vero毒素内毒素与溶血素,肠集聚型大肠埃希菌(enteroaggregative E.coli, EAggEC),婴儿持续性腹泻致病因子肠集聚耐热毒素(EAST)菌毛溶血素,引起腹泻的大肠埃希菌,EPEC,小肠上的E.coil,分离培养与鉴定,1肠外感染。(1)涂片染色检查:除血液标本外,均需作涂片染色检查。脓、痰、分泌物可直接涂片,革兰染色后镜检。尿液和其它液体先低速离心,再取沉淀物作涂片。(2)分离培养:血液接种肉汤增菌,待生长后再移种血琼脂平板。体液标本的离心沉淀物和其它标本直接划线分离于血琼脂平板。35-37孵育18-24小时后观察菌落形态。(3)鉴定:初步鉴定根据IMViC(+-)试验,最后鉴定靠系列生化反应。尿路感染尚需记数菌落量,每毫升10万才有诊断价值。,分离培养与鉴定,2肠内感染 将粪便标本接种于鉴别培养基,挑选可疑菌落并鉴定为大肠杆菌后,再分别检测不同类型致腹泻大肠杆菌的肠毒素、毒力因子和血清型等特征。,(1)ETEC:过去用动物或细胞培养测定LT或ST,较为复杂;现可用ELISA法或基因探针检测这些肠毒素。(2)EIEC:与志贺菌相似,多数EIEC无动力,乳糖不发酵或迟缓发酵。毒力试验可将被检菌液接种于豚鼠眼结膜囊内,可产生典型的角膜结膜炎症状,并在角膜上皮细胞内有大量细菌,是为Senery试验阳性。,(3)EPEC:用特异O、H抗血清测定特异血清型,亦可以ELISA和细胞培养法来检测(4)EHEC:O157:H7血清型多数对山梨醇不发酵或缓慢发酵。VT毒素可用ELISA法测定,灵敏度达60pg/ml,亦可用PCR法结合基因探针检测VT基因。(5)EAEC:用液体培养-集聚试验检测受检菌的粘附性,或用探针技术测定EAST基因。,流 行 病 学,病原性大肠杆菌的许多血清型可引起各种家畜和家禽发病。08、0138、0141多见于猪常带有K88抗原,01、O2、O36、O7多见于鸡。一个畜 (禽)群如不由外地引进同种家畜 (禽),其病原性菌株常为一定的1一2种血清型。,流 行 病 学,易感动物:幼龄畜禽对本病最易感。猪:自出生至断乳期均可发病,仔猪黄痢常发于生后1周下,以1一3日龄者居多,仔猪白痢多发于生后10一20天,猪水肿病主要见于断乳仔猪。牛,生后10天以内多发。羊:生后6天至6周多发,鸡:常发生于3一6周龄。兔:主要侵害20日龄及断奶前后的仔兔和幼兔。传染源:病畜 (禽)和带菌者是本病的主要传染源,通过粪便排出病菌,散布于外界,污染水、料,以及母畜的乳头和皮肤。传播途径:当仔畜吮乳、抵舔或饮食时,经消化道而感染。此外,鸡也可经呼吸道感染,或病菌经入孵种蛋裂隙使胚胎发生感染。,本病一年四季均可发生,但犊牛和羔羊多发于冬春舍饲时期。仔猪发生黄痢时,常波及一窝仔猪的90%以上,病死率很高,有的达100%;发生白痢时,一窝仔猪发病数可达30%一80%,发生水肿病时,多呈地方流行性,发病率10一35%,发病者常为生长快的健壮猪。牛、羊发病时呈地方流行性或散发性。发病诱因:仔畜未及时吸吮初乳,饥饿或过饱,饲料不良、配比不当或突然改变,气候剧变,易诱发本病。大型集约化养畜 (禽)场畜 (禽)群密度过大、通风换气不良、消毒不彻底,是加速本病流行的不容忽视的因素。,发 病 机 理,病原性大肠杆菌具有多种毒力因子,引起不同的病理过程。 1. 定植因子:又称菌毛、粘附素或F抗原,可与粘膜表面细的特异性受体相结合而定植于粘膜,这是大肠杆菌引起的大多数疾病的先决条件。2. 内毒素:类脂A成份3. 外毒素:大肠杆菌可产LT,ST。,4侵袭性:某些ETEC,象各种志贺氏菌一样,具有直接侵入并破坏肠粘膜细胞的能力。 5.大肠杆菌素:具有产生大肠杆菌素V(ColV)的质粒。据认为,此质粒与细菌引起败血症的能力有关。 6.过敏反应:用仔猪所作的研究表明,仔猪在产前由母猪子宫,产后由初奶或接触外界大肠杆菌,获得或产生特异抗体,使组织致敏;已被致敏的仔猪如摄入相应的病原性大肠 杆菌,在肠内繁殖,释出多量抗原作用于致敏的组织,可引起过敏反应,发生腹泻、水肿及其他症状。,症 状,仔猪:因仔猪的生长期和病原菌血清型不同,本病在仔猪的临诊表现也有不同。黄痢型 又称仔猪黄痢 潜伏期短,生后12小 时以内即可发病,长的也仅1一3日,较以更长者少见。一窝仔猪出生时体况正常,经一定 时日,突然有1一2头表现全身衰弱,迅速死亡,以后其他仔猪相继发病,排出黄色浆状稀粪,内含凝乳小片,很快消瘦、昏迷而死。,大肠埃希氏杆菌引起的仔猪黄痢、消瘦,病 理 变 化,脱水严重,皮下常有水肿,肠道膨胀,有多量黄色液状内容物和气体,肠粘膜呈急性卡他性炎症变化,以十二指肠最严重,肠系膜淋巴结有弥漫性小点出血,肝、肾有凝固性小坏死灶。,大肠杆菌引起的肠道肿胀、充血,大体病变无特异性,症 状 及 病 变,2白痢型 又称仔猪白痢 病猪突然发生腹泻,排出乳白色或灰白色的浆状、糊状粪便,具腥臭,性粘腻。腹泻次数不等。病程2一3天,长的1周左有,能自行康复,死亡的很少。剖检 尸体外表苍白、消瘦、肠粘膜有卡他性炎症变化,肠系膜淋巴结轻度肿胀。,症 状 与 病 变,3.水肿型 又称猪水肿病 是小猪的一种肠毒血症,其特征为胃壁和其他某些部位发生水肿。发病率虽不很高,但病死率很高,给小猪的培育造成损失。与饲料及饲养方法改变、气候变化等有关。初生时发过黄痢的仔猪一般不发生本病。,水 肿 型,猪突然发病,精神沉郁,食欲减少或口流白沫病猪静卧,肌肉震颤,不时抽搐,四肢划动作游泳状,发呻吟声或作嘶哑的叫鸣。步态摇摆不稳,盲目前进或作圆圈运动。水肿是本病的特殊症状,常见于脸部、眼险、结膜、齿龈,有时波及颈部和腹部的皮下。有些病猪没有水肿的变化。病程短的仅数小时,一般为1一2天,也有长达7天以上的。病死率约90%。,剖 检 病 变,主要为水肿,大肠杆菌引起肠系膜水肿、血管充血,大肠杆菌引起肠系膜水肿液形成,犊牛大肠杆菌病,潜伏期很短,仅几个小时。根据症状和病理发生可分为三型。1败血型 病犊表现发热,精神不振,间有腹泻,常于症状出现后数小时至一天内急性死亡。有时病犊未见腹泻即归于死亡。从血液和内脏易于分离到致病性血清型的大肠杆菌。,2肠毒血型 较少见,常突然死亡。如病程稍长,则可见到典型的中毒性神经症状,先是不安、兴奋,后来沉郁、昏迷,以至于死。死前多有腹泻症状。3肠型 病初体温升高达40C,数小时后开始下痢,体温降至正常。粪便初如粥样、黄色,后呈水样、灰白色,混有未消化的凝乳块、凝血及泡沫,有酸败气味。,病 理 变 化,败血症或肠毒血症死亡的病犊,常无明显的病理变化。腹泻的病犊,真胃有大量的凝乳块,粘膜充血、水肿,肠内容物常混有血液和气泡,恶臭。小肠粘膜充血,出血,部分粘膜肠系膜淋巴结肿大。肝脏和肾脏苍白,有时有出血点,胆囊内充满粘稠暗绿色胆汁。心内膜有出血点。病程长的病例在关节和肺也有病变。,诊 断,根据流行病学、临床症状和病理变化可做出初步诊断,确诊需进行细菌学检查。,诊 断,病料:败血型为血液、内脏组织,肠毒血症为小肠前部肠粘膜,肠型为发炎的肠粘膜。对分离出的大肠杆菌应进行血清型鉴定及致病性鉴定。近年来,国内外已研制出猪、牛大肠杆菌病的单克隆抗体诊断制剂。本病应与下列类似疾病相区别。猪:仔猪红痢(魏氏梭菌性下痢)、猪传染性胃肠炎以及由轮状病毒、冠状病毒等引起的仔猪腹泻,犊牛副伤寒。,防 制,治疗:本病的急性经过往往不及救治,可使用经药敏试验对分离的大肠杆菌血清型有效的抗生素如氟本尼考、氯霉素、磺胺类,使用活菌制剂,如促菌生、调痢生等治疗畜禽下痢,有良好功效。,预 防,怀孕母畜应加强产前产后的饲养和护理,仔畜应及时吮吸初乳,饲料配比适当,勿使饥饿或过饱,断乳期饲料不要突然改变。对密闭关养的畜 (禽)群,尤其要防止各种应激因素的不良影响。,预 防,用针对本地 (场)流行的大肠杆菌血 清型制备的活苗或灭活苗接种妊娠 母畜或种禽,可使仔畜或雏禽获得 被动免疫。在ETEC的免疫预防研究中,发现其菌毛抗原在自然感染和人工主动免疫中是关键抗原之一。在家畜中,用菌毛疫苗防治新生畜崽腹泻已获得成功。例如在孕牛产前6个月接种大肠杆菌K99株的菌毛抗原,则新生牛犊吮乳后可被动获得特异菌毛抗体而受到同型菌毛型大肠杆菌感染的免疫保护,近年来使用一些对病原性大肠杆菌有竞争抑制作用的非病原性大肠杆菌(如NY-l0菌株、SY-30菌株等)预防仔猪黄痢,收到了较好的效果。用重组DNA技术研制成功的仔猪大肠杆菌病K88基因工程苗也已投放市场,
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