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,便于重组DNA的鉴定和选择,具有特殊的标记基因,可携带多个或多种外源基因,有一个至多个限制酶切割位点,目的基因稳定存在且数量可扩大,稳定并能复制,目的,条件,Ca2处理细胞感受态细胞重组表达载体与感受态细胞混合感受态细胞吸收DNA分子,将含有目的基因的表达载体提纯取卵(受精卵)显微注射受精卵发育获得具有新性状的动物,将目的基因插入到Ti质粒的TDNA上农杆菌导入植物细胞整合到受体细胞的染色体 DNA上表达,转化 过程,原核细胞,受精卵,体细胞,受体细胞,感受态细胞法,显微注射技术,农杆菌转化法,常用方法,微生物细胞,动物细胞,植物细胞,生物种类,定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品,定向改造或生产人类所需的蛋白质,实质,获取目的基因构建基因表达载体将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定,预期蛋白质功能设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列,过程,区 别,基因工程,蛋白质工程,项目,区 别,蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程 基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造,联系,只能生产自然界已有的蛋白质,可生产自然界没有的蛋白质,结果,基因工程,蛋白质工程,项目,过程是逆转录过程，需要逆转录酶催化,从过程cDNA中获取所需要的目的基因，根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置或基因翻译产物蛋白质等特性来获取，不需要用解旋酶，也不需要PCR,过程应用CaCl2溶液处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞,过程鉴别目的基因是否导入受体细胞可利用DNA分子杂交技术。,过程中通过逆转录法获得的目的基因，可用于基因工程，但该目的基因不存在内含子和非编码序列，因此不能用于比目鱼的基因组测序,将多个抗冻基因编码区相连形成的能表达的新基因可能不再是抗冻基因,利用农杆菌的目的是将重组质粒导入受体细胞，而不是筛选重组质粒,应用DNA探针技术，可以检测受体细胞中是否成功导入了目的基因，但不能检测目的基因是否完全表达。,
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