2019-2020年高考生物重点考点突破 生物技术实践.doc

2019-2020年高考生物重点考点突破 生物技术实践一、大肠杆菌的培养和分离1.（浙江省五校联盟xx届高三下学期第一次联考）“生物技术实践”模块（10分）下面是有关微生物的培养和分离实验，请回答：（1）培养大肠杆菌时必须进行无菌操作。实验前所需的各种器材如三角烧瓶、培养皿等需要经过 法灭菌。（2）配置培养大肠杆菌的培养基时，根据“细菌喜荤，霉菌喜素”的规律，通常在培养基中加入 作为营养物质，还需要考虑温度、渗透压和 等条件。（3）大肠杆菌培养和分离的实验中，在LB液体培养基中进行 ，培养液经 后，在LB固体培养基上进行 ，并将培养皿 放在恒温培养箱中培养，可以获得右图效果。通常对获得的纯菌种可以依据 的形状、大小等特征进行初步的鉴定。（4）微生物与人类的生活关系越来越密切，在制作果酒、果醋、泡菜的过程中，分别用到的主要微生物分别是 。 A酵母菌、乳酸菌、乳酸菌 B酵母菌、醋酸菌、乳酸菌 C乳酸菌、醋酸菌、酵母菌 D酵母菌、乳酸菌、醋酸菌2.（余杭高级中学xx届高三适应性考试）“生物技术实践”模块(10分) （1）下表为两种微生物的培养基配方：A组KH2PO4Na2HPO4MgSO4葡萄糖尿素琼脂糖1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0gB组蛋白胨酵母提取物氯化钠琼脂10.0g5.0g10.0g20.0g（两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容至1000ml）请回答下列问题：培养大肠杆菌时，常用 组培养基，对该培养基通常采取 灭菌；分离大肠杆菌常用划线分离和涂布分离，其中涂布分离的优点是 。 （2）在制备尿素固体培养基时，需加入琼脂糖而不能用琼脂配制的原因是 。在分离以尿素为唯一氮源的细菌时，培养基中加入酚红的目的是A筛选出能分解尿素的细菌 B对分离的菌落作进一步鉴定C培养基中的酚红可作为细菌的营养 D若酚红变蓝就能认定该菌能分解尿素（3）果酒和果醋的制作充分利用了不同的微生物在特定的条件下的代谢产物，在果酒制作中利用 在无氧条件下进行酒精发酵，当发酵瓶中停止 ，即表示发酵完毕；在果醋制作中利用 在有氧条件下将乙醇氧化为醋酸，发酵过程中每天用pH试纸检测流出液的pH监控发酵进行的情况，等到流出液的pH 时停止实验。3.（浙大附中xx届高三5月模拟考试）“生物技术实践”模块（10分）大肠杆菌是生活在人和高等动物体内的一种常见细菌，在饮用水的检测中常用它作为水源是否受到污染的指示菌，在遗传学上常作为实验材料，在基因工程中常用它作为受体细胞，为人类的健康和科学技术的发展做出了许多贡献。请回答下列有关大肠杆菌的问题：（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑 、 和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、 等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行 ；操作者的双手需要进行清洗和消毒；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能损伤DNA的结构，还能 。（3）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适当的时间， 。（4）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，下列对操作过程说法不妥的是 。A严格操作、多次重复 B保证待测样品稀释的浓度比较合适C倒平板培养 D计数所有菌落，取其平均值（5） 通常对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小、硬度和颜色等 对细菌进行初步的鉴定（或分类）。（6） 若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过 处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。二、分离以尿素为氮源的微生物1.（杭州市xx届高三第二次教学质量检测）“生物技术实践”模块(10分)下图是“分离以尿素为氮源的微生物”实验的基本流程，请回答下列问题：（1）A过程配制的培养基有 和 。配制过程中要用 作为培养基的凝固剂。（2）B过程，需要利用 法灭菌，尿素溶液用 使之无菌。（3）E过程用到的工具为 ，使用前需浸泡在70%酒精中 。（4）F过程发现有脲酶的细菌菌落周围会出现着色环带，是因为培养基中指示剂 变红。（5）稀释倍数适当，与实际活菌数相比，用涂布分离法测定得到的活菌数 。A.多 B.少 C.相等 D.几乎为零2.（浙江省名校新高考研究联盟xx届高三第二次联考）“生物技术实践”模块（10分）（1）下表为两种微生物的培养基配方：A组KH2PO4Na2HPO4MgSO4葡萄糖尿素琼脂糖1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0gB组蛋白胨酵母提取物氯化钠琼脂10.0g5.0g10.0g20.0g（两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容至1000ml）请回答下列问题：培养大肠杆菌时，常用 组培养基，对该培养基通常采取 灭菌；分离大肠杆菌常用划线分离和涂布分离，其中涂布分离的优点是 。 （2）在制备尿素固体培养基时，需加入琼脂糖而不能用琼脂配制的原因是 。在分离以尿素为唯一氮源的细菌时，培养基中加入酚红的目的是A筛选出能分解尿素的细菌 B对分离的菌落作进一步鉴定C培养基中的酚红可作为细菌的营养 D若酚红变蓝就能认定该菌能分解尿素（3）果酒和果醋的制作充分利用了不同的微生物在特定的条件下的代谢产物，在果酒制作中利用 在无氧条件下进行酒精发酵，当发酵瓶中停止 ，即表示发酵完毕；在果醋制作中利用 在有氧条件下将乙醇氧化为醋酸，发酵过程中每天用pH试纸检测流出液的pH监控发酵进行的情况，等到流出液的pH 时停止实验。3.（浙江省普通高等学校xx届高三招生适应性考试） “生物技术实践”模块（10分）根据下列实验操作的流程，回答相关问题：A制备培养基 倒平板 B 称土样梯度稀释菌液 培养 观察、计数、鉴别。（1）步骤A为 ，步骤B为 。然后将培养皿 放到37的恒温箱中培养（2）要判断培养基灭菌是否彻底，可设置 作为对照。（3）用土壤稀释液来分离以尿素为氮源的微生物，取土壤稀释液分别加到 和 的培养皿中，用玻璃刮刀在酒精灯火焰旁将菌液涂布到整个平面上。培养2448h。某些细菌菌落周围出现着色环带的原因是 ，使得培养基中的酚红指示剂变为红色。（4）在做分离以尿素为氮源的细菌实验时，甲同学从某个培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学在对应培养基中只筛选出大约50个菌落。出现甲同学实验现象的原因可能是 由于土样不同 由于培养基污染 由于操作失误 没有设置对照 A B C D三、果汁中的果胶和果胶酶我国水果生产发展迅速，由于收获的季节性强，易造成积压，腐烂变质，为了解决上述问题且满足不同人群的需求，可以加工制作果汁、果酒、果醋等。在果汁生产中用到果胶酶，某课题研究小组为了探究果胶酶的某些特性，进行了如下实验： (1)实验方法：如图中所示的顺序进行操作。(2)实验结果：对照组与实验组进行了相同时间的实验，结果如图所示：中自变量是温度，除此之外还可用 表示。A、酶的浓度 B、苹果泥的量 C、水的加入量 D、pH图中的纵坐标还可用 来表示。实验小组改变了实验条件后重复做实验，得到曲线乙，苹果汁的澄清度最高点对应的横坐标是同一位置的原因是 。步骤b中在果胶酶和苹果泥混合前，将两者分装在不同试管中，恒温的目的是 。四、淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测（镇海中学xx届高三年级五月份模拟考试）“生物技术实践”模块（10分）(1) 环卫部门要检测某地饮用水的大肠杆菌超标问题，通常采用 法。用此法分离时，需要将待测水样稀释若干倍，再取 mL稀释度不同的待测样品加在固体培养基上，用 涂布在培养基平面上，盖好培养皿并将培养皿倒置，在37oC恒温培养箱中培养l224小时，可以得到相互分开的菌落。计数时为了减小误差，每个水样 。（2）下图为装有固定化酶a的实验装置。其中b是反应柱，c是催化底物。若装置中的固定化酶为a淀粉酶，则通常是利用吸附法进行固定的，介质一般为 。利用该装置进行淀粉水解实验时，在漏斗中加入反应液后的操作是 ，以保证反应充分。对流出的液体用 检测，若呈现 色，说明淀粉被水解成糊精。(2)下图4支试管分别代表4种微生物在半固体培养基(琼脂含量3.5g/L)中的生长状态，最可能是大肠杆菌生长状态的是 。A.温度 B.水分 C.pH D.营养五、果酒及果醋的制作1.（xx年高考模拟冲刺（提优）测试二）“生物技术实践”模块(10分)如图简单表示了葡萄酒的酿制过程，请据图分析：（1）在上述葡萄酒的酿制过程，甲装置中酵母菌的呼吸类型主要是为 。在果酒制作过程中，一般要先用KMnO4溶液浸泡葡萄一段时间，这样做的目的是 。（2）下列叙述中不正确的是（ ）A在甲中进行搅拌是为了增加氧溶量 B在乙中，酵母菌数量将快速增长，然后维持稳定C甲与乙放出的气体主要是二氧化碳 D揭开丙容器的盖子，可能会有醋酸产生（3）在配制酵母斜面培养基时，培养基中加入一定量的凝固剂，如 。培养基配好后，置于高压蒸汽锅内在压强为0.1MPa(1kgcm2)、温度为 的条件下，维持一段时问，可达到灭菌的目的。（4）果醋是最受欢迎的饮料之一，其生产过程中利用了 的发酵作用。在传统发酵技术中，果醋制作往往在果酒的基础上进行，其相关的反应式为： 。（5）果汁在年轻人群体中有相当大的消费群体。利用葡萄等水果可以生产出各种风味的果汁。果汁生产的原料来源是水果粉碎后的果肉浆。要获得澄清的果汁需要用到 。（6）泡菜是又一广受欢迎的大众食品，在泡菜的腌制过程起作用的主要是 和乳酸菌，在无氧条件下，微生物利用菜中的糖和其他营养物质进行发酵产生 等发酵产物。2.（浙江省六校xx届高三第一次联考）“生物技术实践”模块（10分）从自然界获得纯种的酿酒酵母，基本程序是：配制培养基接种培养观察记录纯化培养。请回答下列有关的问题：（1）酵母菌的培养最好使用下列哪种培养基？（ ） A牛肉膏蛋白胨培养基 B麦芽汁琼脂培养基C无土载培培养基 DMS培养基（2）采用平板划线法接种时，开始接种时要灼烧接种环，目的是 。要把接种后的培养基和一个未接种的培养基同时放入恒温箱培养，设置“未接种的培养基”的目的是 。（3）将得到的纯种酿酒酵母接种到葡萄汁中发酵，如何获得酒精含量更高的果酒？ 。（4）把从酵母细胞中提取的淀粉酶固定在尼龙布上制成固定化酶，与传统酶应用技术相比，此技术最显著的优点是 。（5）某实验小组欲按上述方法从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，应将菌液涂布接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，30条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈 状态放置；筛选时应将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是出现透明圈，则说明此种菌能够 。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用 法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。 六、泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定1.（宁波市五校xx届高三适应性考试）“生物技术实践”模块（10分）回答下列有关发酵食品加工的问题。请在标有序号的空白处填空，并将序号及相应答案写在答题纸上：（1）在葡萄酒的自然发酵过程中，菌种的来源主要是附在葡萄皮上的 。提高果酒的品质，也可以直接在果汁中加入人工培养的菌种。要筛选得到纯净菌种，通常在固体培养基上划线分离，分离的方法有 和 。（2）为提高果酒的品质及节约生产成本，厂家已尝试选用海藻酸钠作 包埋各种酶制剂，这种技术叫做 。（3）果醋是利用 将酒精转化为醋酸，醋酸发酵时，要向发酵瓶中通入空气的原因是 ，通空气的玻璃管中要塞入脱脂棉，用以过滤空气，其目的是 。（4）制作泡菜过程中会产生 等有害物质，该物质与某些化学物质发生反应后形成紫红色产物，可以通过 法估测出其在泡菜样品中的含量。2.（浙江金华十校xx届高三模拟考试）“生物技术实践”模块（10分）微生物与人类的生活、健康有着密切的联系。请回答下列有关问题。（1）在果醋、泡菜和果酒的制作过程中，均利用相应微生物的代谢特点进行条件控制，其中需要提供氧气的是 的制作。泡菜腌制原理是 和 等主要微生物利用菜中的 和其他营养物质进行发酵，产生有机酸和醇类物质。（2）根据微生物的特点，可以利用相应的培养基进行分离或培养，例如用 培养基分离能产生脲酶的微生物，用 培养基培养苹果青霉，可提高果胶酶的产量。（3）在微生物培养或分离过程中，下列操作不恰当的是 A在超净台中进行接种时应该关闭紫外灯 B扩大培养时必需保证氧气的供应 C控制液体培养基中营养物质的浓度 D空白的培养基平板需进行无菌试验（4）利用固体培养基可以进行微生物培养和植物组织培养，两者的培养基明显不同的是 A需要添加琼脂 B需要添加有机物C需要添加激素 D需要灭菌处理七、植物的组织培养1.（台州中学xx届高三调研）题号：17“生物技术实践”模块（10分）请在标有序号的空白处填空，并将序号及相应答案写在答题纸上： (1) 植物组织培养就是取离体植物组织，在 条件下接种到三角瓶中的琼脂培养基上，给予一定的条件，使之产生 ，或进而生根发芽。经常使用 培养基，首先用 相对较多的培养基，使长出较多的 。(2)若使用自然生长的茎进行组织培养，一般先消毒，不需要用到的溶液有 （ ）A70%酒精 B5%次氯酸钠 C无菌水 D蒸馏水(3)培养微生物的培养基必须无菌，如：用于大肠杆菌的培养和分离的培养基通常用 灭菌；而用于分离以尿素为氮源的微生物的培养基添加尿素后不能用这个方法灭菌，原因是： 。接种后的培养皿 放在37的恒温箱中培养。2.（宁波市xx届高三模拟考试） “生物技术实践”模块（10分）（1）植物组织培养过程中对植物样本进行消毒，可将植物样本先放入70%酒精中浸泡l0min，再放入5% 溶液中浸泡5min，并重复一次，最后用无菌水冲洗。培养基除了含有必需的营养物质和凝固物质外，还必须加入 。消毒后的植物样本要先后培养在 培养基和 培养基中，在合适条件下可培养得到幼苗。幼苗在定植前需经过一段时间的锻炼，即逐渐降低幼苗生活环境中的 ，以使幼苗能适应自然环境。（2）分离纯化所需酵母菌可采用右图所示两种方法，图A的分离方法是 。利用获得的突变菌和葡萄汁进行酒精发酵实验，发酵过程中下列方法不能防止杂菌入侵的是（ ）A弯曲玻璃管中加水封口B发酵液中添加某种抑制物如抗菌素C发酵过程必须保证所有用具都是清洁的D人工接种发酵的葡萄需经高锰酸钾浸泡消毒（3）在酵母菌数量测定的实验中，在某一稀释倍数下，得到以下几种统计结果，与事实更加接近的是 。 A一个平板，统计的菌落数是23 B两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24 C三个平板，统计的菌落数分别是2 1、5和52，取平均值26 D四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值253.（温州中学xx届高三第三次模拟）“生物技术实践”模块(10分) 下面是有关植物组织培养和大肠杆菌的培养和分离相关的问题，请回答：（1）MS培养基是植物组织培养常用的培养基，其母液由大量元素、微量元素和有机成分组成。MS培养基含有十几多种化合物，配制不方便也难称量准确，可将培养基中的各种成分 分别称量，配成母液。用时稀释。（2）补充下面菊花组织培养步骤：制备MS固体培养基 接种 生芽 生根 定植（3）(1)大肠杆菌的培养和分离实验中，先用LB 进行扩大培养，再在LB固体平面培养基上进行 分离。（4）补充下面大肠杆菌培养和分离的步骤：培养基的配制 、超净工作台倒平板、接种液体培养、分离培养、 （5）补充下的操作流程的空白：参考答案浙江省五校联盟xx届高三下学期第一次联考“生物技术实践”(1)高压蒸汽 (2)蛋白胨和酵母提取物 PH (3)扩大培养 稀释 接种 倒置 菌落 (4)B余杭高级中学xx届高三适应性考试 “生物技术实践”模块 1. B 高压蒸汽灭菌 单菌落更易分开 2. 琼脂中含有一定量的含氮物质 B3酵母菌 出现气泡 醋杆菌 不再减小浙大附中xx届高三5月模拟考试温度 酸碱度（PH值） 生活周期短（或繁殖快）(2) 灭菌 使蛋白质变性 (3) 观察培养基上是否有菌落产生 (4) D (5) 菌落特征 (6) 灭菌杭州市xx届高三第二次教学质量检测浙江省名校新高考研究联盟xx届高三第二次联考 “生物技术实践”模块（10分） 1. B 高压蒸汽灭菌 单菌落更易分开 2. 琼脂中含有一定量的含氮物质 B3酵母菌 出现气泡 醋杆菌 不再减小浙江省普通高等学校xx届高三招生适应性考试果汁中的果胶和果胶酶答案：(2)D 苹果汁的体积 同一种酶的最适温度是一定的，不会因酶的浓度、底物量不同而改变 保证底物和酶在混合时的温度是相同的镇海中学xx届高三年级五月份模拟考试“生物技术实践”模块涂布分离 0.1 玻璃刮刀 至少要做三组平行实验，取其平均值石英砂 打开活塞1和2，并控制流速 碘碘化钾 红 Dxx年高考模拟冲刺（提优）测试二浙江省六校xx届高三第一次联考“生物技术实践”模块（10分）（除第1小题2分外其余每空1分，共10分）（1）B （2）灭菌 检验培养基（过程）是否被污染（3）往葡萄汁中加入适量的蔗糖 （4）可以重复使用（产品易纯化）（5）淀粉 倒置 分泌淀粉酶使淀粉发生水解 （平板）划线宁波市五校xx届高三适应性考试（1）野生酵母菌（酵母菌） 划线分离法 涂布分离法 （2）载体 固定化酶技术（3）醋杆菌 醋酸发酵是一个氧化过程，需要氧气（强调过程需要氧气） 防止微生物进入（4）亚硝酸 光电比色法浙江金华十校xx届高三模拟考试台州中学xx届高三调研17“生物技术实践”模块（10分）(1)无菌 愈伤组织 MS 细胞分裂素 丛状苗 D 高压蒸汽灭菌法 培养基的尿素容易受热分解 倒置（2分，其他每空1分，共10分）宁波市xx届高三模拟考试温州中学xx届高三第三次模拟题号17： 扩大一定倍数 。外植体消毒 移栽锻炼 液体 划线 灭菌 菌种保存 蘸取菌液 灼烧接种环