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稀释涂布法纯化大肠杆菌,稀释涂布平板法,1、概念,将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。,系列稀释操作,涂布平板操作,系列稀释操作,1.将分别盛有9mL水的6支试管灭菌，并按101106的顺序编号。,2.用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第二支试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀。,系列稀释操作,菌液,系列稀释操作,3.从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入102倍稀释的试管中，重复第2步的操作。依次类推，直到完成最后一支试管的稀释。,系列稀释操作,注意： 移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管离火焰12cm处.,涂布平板操作,注意： 酒精浓度为70%。,涂布平板操作,3.将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却810s,涂布平板操作,4.用涂布器将菌液均匀地涂布 在培养基表面。涂布时可以转 动培养皿，使菌液分布均匀。,涂布平板操作,结果与评价,1：培养未接种培养基的作用是什么？若有菌落形成，说明什么？,对照,培养基灭菌不彻底,2：在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落颜色？形态？,呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐,3：培养12h和24h后的菌落大小？菌落分布位置？原因？,大小不同，位置相同,时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大；菌落的位置不动，但菌落数增多。,
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