资源描述
一、动物细胞融合 1概念： 动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称, 。 2原理：与植物原生质体融合的原理相似，即膜的 。 3结果：形成 ，具有原来两个或多个细胞的遗传 信息。 4诱导方法：聚乙二醇、 、电激等。 5意义 (1)突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 (2)是研究细胞遗传、免疫、肿瘤和新品种培育的重要手段。 (3)利用 技术制备单克隆抗体。,两个或多个,细胞杂交,流动性,单核杂交细胞,灭活的病毒,杂交瘤,二、单克隆抗体 1传统抗体的制备 (2)缺点：产量低、 低、 差。 2单克隆抗体的制备过程,纯度,特异性,(2)解决思路：将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合为 。 (3)制备过程,杂交瘤细胞,3单克隆抗体的特点和应用 (1)优点： 、 、产量大。 (2)应用 作为 ，具有准确、高效、简易、快速的优点。 用于 和 。,特异性强,灵敏度高,诊断试剂,治疗疾病,运载药物,一、动物细胞融合 阅读教材P52，仔细观察图223，探讨下列问题： 1比较植物体细胞杂交与动物细胞融合的区别。,提示：细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性 原生质体 植物组织培养 灭活的病毒 2诱导动物细胞融合特有的诱导手段是什么？ 提示：灭活的病毒。 二、单克隆抗体的制备 阅读教材P5254，仔细观察图224，探讨下列问题： 1单克隆抗体制备时为什么用免疫小鼠？ 提示：免疫小鼠能产生相应的B淋巴细胞，从而产生抗体。 2为什么用多个B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合？ 提示：(1)细胞融合成功率太低，仅用两个细胞融合，不一定能得到融合细胞。 (2)用大量免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合，并从融合细胞中筛选才能得到分泌所需抗体的杂交瘤细胞。,3细胞融合后会得到哪些杂交细胞？我们需要的是哪种杂交细胞？ 提示：得到的细胞有：未融合的亲本细胞、融合的具有同种核的细胞(融有2个B淋巴细胞核或是2个骨髓瘤细胞核)、融合的杂种细胞(即杂交瘤细胞)。需要的是杂交瘤细胞。 4对得到的杂交瘤细胞还需做哪些处理？为什么？ 提示：筛选、克隆化培养、抗体检测。因为培养的目的是获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 5在单克隆抗体制备过程中经过了几次筛选？作用分别是什么？ 提示：两次。第一次：从多种杂交细胞中筛选出杂交瘤细胞。第二次：利用专一抗体检测阳性，筛选出能够产生所需特异性抗体的杂交瘤细胞群。,7请写出单克隆抗体的制备流程。 提示：,6获取单克隆抗体的场所在哪里？ 提示：(1)若在培养基中进行杂交瘤细胞培养，则从培养液中提取。(2)若在小鼠或其他动物腹腔中培养，则从腹水中提取。,下列对植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较，描述正确的是( ) A动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法也完全相同 B只有植物体细胞杂交可跨越种属间的生殖隔离，突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能 C利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为生产单克隆抗体开辟了新途径 D目前科学家终于实现了两个植物物种间的体细胞杂交，得到了同时具有两个物种遗传物质的超级植物，并使它们的 性状全部得以体现,解析 动物细胞融合的诱导方法有生物方法，如用灭活的病毒，而植物原生质体融合没有生物方法；两个植物物种间的体细胞杂交，得到了同时具有两个物种遗传物质的超级植物，并不一定使它们的性状都能得以体现，这是基因选择性表达的结果。 答案 C 动物细胞融合中的诱导剂 (1)常用的病毒诱导剂有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒 等，其中仙台病毒最常用。 (2)用作诱导剂的病毒必须事先灭活，使病毒的感染活性、增殖能力丧失但不破坏病毒的抗原结构。,人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答问题：,(1)制备单克隆抗体过程中要用到_和_技术。 (2)制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于_，使小鼠产生分泌相应_的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的_免疫。 (3)在细胞内DNA的合成一般有两条途径，主途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径；另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化作用合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。,利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的_成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。 最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_。 (4)此过程生产的单克隆抗体可以与_特异性结合，从而诊断早孕。,【研析】 本题主要考查单克隆抗体制备的原理和过程及识图分析问题的能力。具体解题过程如下：,审提取信息,信息a：图示中对B淋巴细胞和骨髓瘤细胞加“促融剂”及“培养”。 信息b：题干信息制备的单克隆抗体的用途是“抗HCG”。 信息c：氨基嘌呤可以阻断DNA合成的主途径，且骨髓瘤细胞的DNA合成无辅助途径。,析解读信息,解读信息a：在给定的两类细胞中加促融剂的目的就是为了实现细胞融合，在HAT培养基上培养、克隆化培养及大规模培养的均为细胞即涉及的细胞工程技术为动物细胞培养。 解读信息b：制备的单克隆抗体对抗的是“HCG”，即HCG应为抗原。 解读信息c：骨髓瘤细胞的DNA合成只有主途径，若在HAT培养基中加入氨基嘌呤，则其主途径被阻断，最终导致其无法增殖。,联联系基础,设问(1)可联系：动物细胞工程的技术手段即动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合及生产单克隆抗体等。其中动物细胞培养是其他技术的基础。 设问(2)可联系：单克隆抗体制备的原理；B淋巴细胞、杂交瘤细胞的独有特点；体液免疫过程中有抗体产生。 设问(3)可联系：选择培养基的作用，如通过在培养基中加入特定的物质如氨基嘌呤可使未融合的骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞融合体无法生存而死亡，选择出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。,答解题规范,设问(3)：只能答“氨基嘌呤”，答“次黄嘌呤、胸腺嘧啶核苷或糖和氨基酸”等都不能达到筛选的目的，均不得分。 设问(3)：应把单克隆抗体自身具备的特点“能无限增殖并分泌特异性抗体”与应用上的优点“特异性强、灵敏度高，并可能大量制备”区分开来，答题时不能混答，否则不得分。 设问(4)：题目中制备的单克隆抗体用来诊断早孕，是与特定的抗原“HCG”相结合，答“抗原”不得分。,解答单克隆抗体的有关题目时应特别注意的几点 (1)所用B淋巴细胞是否为经过免疫的B淋巴细胞。 (2)细胞融合之后需要两次筛选，方可获得能产生单一抗体的杂交瘤细胞。 (3)利用单克隆抗体制成的“生物导弹”，其选择性是由抗体决定的，与药物无关。,答案 (1)动物细胞培养 动物细胞融合 (2)抗原 抗体 体液 (3)氨基嘌呤 能无限增殖并分泌特异性抗体 (4)人绒毛膜促性腺激素(或HCG),网络构建 填充：细胞膜的流动性 PEG、灭活的病毒、电激 杂种细胞 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 单克隆抗体,课堂归纳,关键语句 1动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合 形成一个细胞的过程。 2动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病 毒、电激等。 3动物细胞融合的主要用途是制备单克隆抗体。 4杂交瘤细胞是由经免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而成 的，具有既能无限增殖又能产生特定抗体的能力。 5单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高，并能大量 制备。 6单克隆抗体的主要用途有：作为诊断试剂、用于治疗疾病和 运载药物。,1关于动物细胞融合的说法，不正确的是( ) A动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合 形成一个细胞的过程 B动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信 息的单核细胞称为杂交细胞 C常用的诱导动物细胞融合的因素有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射 D细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能 解析：紫外线照射常用于人工诱变，可诱发基因突变，而不是诱导细胞融合的因素。,答案：C,2动物细胞融合主要的用途是( ) A克服远缘杂交不亲和 B制备单克隆抗体 C培育新物种 D生产杂交细胞 解析：植物体细胞杂交技术主要是为了克服远缘杂交不亲和，以培育新物种。另外，动物细胞作为整体，它的全能性受到限制，目前只见到高度分化的细胞核在去核卵母细胞中表现全能性，还未见到融合细胞表现出全能性的例子，因此动物细胞融合不能用来培育新物种。生产杂交细胞，不是细胞融合的主要目的，杂交细胞只是细胞融合完成后所形成的结构的名称。,答案：B,3单克隆抗体与血清抗体相比，其优越之处在于( ) A单克隆抗体可作为某些药物的载体 B单克隆抗体可以在体外制备 C单克隆抗体特异性强、灵敏度高，并可大量制备 D单克隆抗体的制备过程简单，操作方便 解析：普通的抗体其实也可作为药物的载体，并可在体外通过细胞培养制备，但因其纯度低、特异性差，在“生物导弹”应用上没有价值。单克隆抗体的制备过程比普通抗体的制备过程要复杂得多。,答案：C,4用单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是杀伤性“弹头”，下列对此描述不正确的是( ) A“瞄准装置”是由识别肿瘤的单克隆抗体构成的 B“弹头”是由放射性同位素、化学药物和细胞毒素等 物质构成的 C“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能 D“生物导弹”是利用细胞工程制备出来的,解析：“弹头”中的药物既能杀伤肿瘤细胞，也能杀死正常细胞，不具有选择性。“生物导弹”中的“瞄准装置”是由专一识别特定肿瘤细胞的单克隆抗体构成的；“弹头”是由杀死肿瘤细胞的放射性同位素、化学药物和细胞毒素等物质构成的；“生物导弹”是利用动物细胞融合、动物细胞培养等细胞工程技术制备出来的。,答案：C,5科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的细胞是( ) A经过特定抗原免疫的B淋巴细胞 B不经过免疫的B淋巴细胞 C经过特定抗原免疫的T淋巴细胞 D不经过免疫的T淋巴细胞 解析：骨髓瘤细胞必须与经过特定抗原免疫的B淋巴细胞融合，形成杂交瘤细胞，才能大量增殖并产生能够与相应的抗原特异性结合的单克隆抗体。,答案：A,6如图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请据图回答下列问题：,(1)请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。 (2)过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有_、_的特性。 (3)由图中可以看出，单克隆抗体制备过程运用了_和_的动物细胞工程技术手段。 答案：(1)B CFADHIGE (2)可在体外大量繁殖 产生特异性抗体 (3)动物细胞融合 动物细胞培养,
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