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抗虫害的玉米,转基因 鲑鱼,转黄瓜抗青枯病基因的甜椒,乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷),基础理论和技术的发展催生了基因工程,DNA是遗传物质的证明 DNA双螺旋结构和中心法则的确立 遗传密码的破译 基因转移载体的发现 工具酶的发明 DNA合成和测序技术的发明 DNA体外重组的实现 重组DNA表达实验的成功 第一例转基因动物问世 PCR技术的发明,DNA重组技术的基本 工具,基因工程的概念,基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。,DNA重组技术的基本工具,限制性核酸内切酶“分子手术刀” DNA连接酶“分子缝合针” 基因进入受体细胞的载体“分子运输车”,限制性核酸内切酶“分子手术刀”,分布：主要是从原核生物中分离纯化出来的 作用特点：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 切点：磷酸二酯键 举例：EcoRI限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开,重播,限制性内切酶,限制酶,黏性末端和平末端,限制酶所识别的序列有什么特点,限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。（即中心对称）,限制酶在原核生物中的作用,原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，但是，生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，以保证自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的。 含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。,back,DNA连接酶“分子缝合针”,连接酶有两种：一种是从大肠杆菌中分离得到的，称之为Ecoli连接酶。另一种是从T4噬菌体中分离得到，称为T4连接酶。 这两种连接酶催化反应基本相同，都是连接双链DNA的缺口，而不能连接单链DNA。 Ecoli连接酶只能连接黏性末端； T4连接酶既可“缝合”黏性末端，又可“缝合”平末端。,DNA连接酶“分子缝合针”,DNA连接酶与DNA聚合酶一样吗？为什么？,back,基因的载体“分子运输车”,载体必须具备的条件： 1、能自我复制 2、有一个和多个限制酶切割位点 3、有特定标记基因 4、对受体细胞无害、易分离,载体的作用： 1、将外源基因转移到受体细胞中去。 2、利用运载体在受体细胞内，对外源基因进行大量复制。,常用的载体有： 质粒，噬菌体的衍生物，动植物病毒等,质粒,质粒是基因工程最常用的运载体。 质粒是一种裸露的、结构简单独立于细菌拟核之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。,要对天然质粒进行人工改造,back,DNA重组技术的基本工具,限制性核酸内切酶“分子手术刀” DNA连接酶“分子缝合针” 基因进入受体细胞的载体“分子运输车”,1.质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是 能自主复制 不能自主复制 结构很小 蛋白质 环状RNA 环状DNA 能“友好”地“借居” A B C D C,2.下列属于基因运载体所必须具有的条件是 （ ） A、具有某些标志基因 B、具有环状的DNA分子 C、能够在宿主细胞内复制 D、具有多种限制性内切酶 AC,3.在基因工程中通常所使用的质粒是( ) A、细菌的染色体DNA B、细菌染色体外的DNA C、病毒染色体DNA D、噬菌体DNA B,
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