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免疫技术在诱导性多能干细胞基础研究中的应用,1,背景 结果 讨论,2,背景,近年来,诱导性多能干细胞的研究十分热门,此细胞系是利用病毒转染四个全能性的因子(Oct4、Sox2、Klf4、C-Myc)来使羊水细胞进行重编程,建立了我们需要的干细胞系,在成功建立后,我们需要利用免疫技术来鉴定所建的细胞系,主要是使用免疫荧光技术和免疫组化,来完成我们的建立和鉴定工作。,3,预备做诱导性多能干细胞的细胞系: 人成纤维细胞(自建) 羊水细胞(医院给予),4,背景 结果 讨论,5,建立来源于人皮肤的成纤维细胞,用DAPI进行核定位,染人成纤维细胞特异性的抗体Vimentin,在荧光显微镜中观察。,6,AKP染色,初步鉴定用羊水细胞建立的诱导性多能干细胞成克隆生长。,7,建立的四株诱导性多能干细胞免疫荧光染色,利用干细胞的全能性抗体进行鉴定。,8,诱导性多能干细胞注射免疫缺陷小鼠,取得畸胎瘤,进行石蜡切片并HE染色来鉴定三胚层( a是低倍镜的大体图 b是神经上皮 c是软骨 d是主要是平滑肌 e是肠上皮 f是肺上皮 软骨肌肉是中胚层 神经上皮是外胚层 小肠上皮和肺(呼吸)上皮是内胚层,9,结果,1.成功建立了诱导性多能干细胞系 2.利用免疫技术鉴定所建立的细胞系,10,背景 结果 讨论,11,讨论,1.在基础研究中,利用更多的免疫技术 2.诱导性多能干细胞在临床上的应用 3.疾病诱导性多能干细胞的应用前景,12,Thank you for every teacher!,13,
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