食品添加剂 冰结构蛋白

中华人民共和国国家标准 201-发布 201-实施 食品安全国家标准 食品添加剂 冰结构蛋白 （征求意见稿） 中 华 人 民 共 和 国 国家卫生和计划生育委员 会 发布 中华人民共和国卫生 1 食品安全国家标准 食品添加剂 冰结构蛋白 1 范围 本标准主要适用于 以大豆为原料，经 酵母 （ 发酵培养 ， 再经分离、浓缩、精制得到 的 食品添加剂 冰结构蛋白 （ 2 技术要求 官要求 感官要求 应符合表 1的规定。 表 1 感官要求 项 目 要 求 检验方法 色泽 浅棕色 将 适量 试样 置于清洁、干燥的 白瓷点滴板 中 ， 在自然光线下，观察其色泽和状态 状态 液体 化指标 理化指标 应符合表 2的规定。 表 2 理化指标 项 目 指 标 检验方法 冰结构蛋白（ 含量 ， g/ L 5 附录 A 中 分， w/% 2 009.4 录 A 中 （ B ： 测定各指标前，试样应 于 4C 下解冻约 20 h， 并 搅拌均匀 。 生物 指标 微生物指标 应符合表 3的规定。 表 3 微生物 指标 项 目 指 标 检验方法 菌落总数， 3000 大肠菌群， 10 霉菌和酵母菌， 100 沙门氏菌， /25得检出 单核细胞增生李斯特氏菌 ， /25得检出 样芽孢杆 菌 ， 100 注： 测定各指标前，试样应 于 4C 下解冻约 20 h， 并 搅拌均匀 。 2 3 储存条件 产品应在 下 储存 。 3 附 录 A 检验方法 般规定 本标准所用试剂和水在未注明其他要求时，均指分 析纯试剂和 6682规定的 三 级水。试验中所用标准溶液、杂质测定用标准溶液、制剂和制品在未注明其他要求时，均按 601、 602、 603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。 别试验 相色谱法 在冰结构蛋白（ 量测定试验中，试样溶液色谱图的主峰保留时间应和 标准 溶液色谱图的主峰保留时间相一致，参见附录 谱法 分别配制 10 的试样溶液和 标准 溶液， 在附录 两者 分子结构 应 一致，参见附录 . 2。 结 构蛋白（ 量 的 测定 剂 和材料 腈：色谱纯。 氟乙酸：纯度 98 %。 结构蛋白 对照 品：纯度 10 %。 器 和设备 效液相色谱仪：带二极管阵列检测器 。 量进样器： L。 考 色谱 条件 谱柱 ： 4.6 5 ，填料直径 m；或其他等效的色谱柱。 测波长： 214 温： 室温 。 速： 1.0 mL/ 样量： L。 动相 A： 氟乙酸水溶液（体积分数） ；流动相 B： 积分数） 。 动相梯度洗脱参数见 表 表 动相梯度洗脱程序表 时间 / 4 分析步骤 准溶液系列的制备 称取适量 冰结构蛋白 对照 品溶解于水，分别配制浓度为 500 、 1000 、 1500 、 2000 和 2500 的标准溶液 系列 。 样溶液 的制备 移 取 搅拌 均匀 试样 0.5 水定容至 25 用 m 水相滤膜过滤。 定 在 考 色谱条件下 ，分别对 标准溶液系列和 试样溶液 进行测定 ， 得到 冰结构蛋白标准溶液浓度和响应值（峰高或峰面积）的曲线，在曲线上对应 试样溶液 色谱 图 的响应值（峰高或峰面积），得到试样溶液 中冰结构蛋白的浓度。 同时做空白试验。 果计算 冰结构蛋白 （ 含 量 的质量分数 单位为 克每升（ g/L），按 式 （ 计算： 2011 1000 )( （ 式中： 试样溶液的 体积， 单位为毫升（ ； 原始 试样的 体积 ， 单位为毫升（ ； 由标准曲线获得的空白 溶 液中冰结构蛋白的浓度， ； c 由标准曲线获得的试样 溶 液中冰结构蛋白 的 浓度， 。 试验 结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的 绝对 差值不大于 算术平均值 的 10 %。 A.4 适量搅拌均匀 试样 ， 用校正好的 在 室温下 直接测定。 5 附 录 B 照 品参考谱图 i n u t e 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 图 参考 液相 色谱图 图 参考 质谱图 T: B 6 附 录 C 参考质谱条件 考质谱条件 a) 毛细管电压 ： 3000 V b) 锥孔 电压： 30 V c) 提取 电压： 1 V d) 透镜电压： e) 源温： 100 f) 脱溶剂温度： 300 g) 脱溶剂 气流速度： 350 L/h h) 锥孔 气流速度： 20 L/h i) 低频分辨率 ： 14.0 j) 高 频分辨率 ： 14.0 k) 离子能量： 1.0 l) 检测器倍数 ： 650 m) 低质量区： 500 n) 高质量区 ： 2000