答案--生物制品复习题.doc

一、填空1、目前基因工程抗体有以下几种类型，包括 嵌合抗体 、 重构抗体、 单链抗体 、 Ig相关分子 、 噬菌体抗体 。2、按微生物学控制程度由松到严，将实验动物分为普通级动物、 清洁级动物， 无特定病原体动物、 无菌动物 、悉生动物。7、按遗传质量控制可将实验动物分为四类，即 近交系动物、 杂交群动物 、 突变系动物 、封闭群动物等。3、一般生物制品制备流程是： 培养增殖、 分离纯化、浓缩、制剂、检验。4、诊断用生物制品的最基本要求是 特异性强 和 敏感度高。包括 诊断用抗原、诊断用抗体和 标记抗体 三类。5、细胞因子是一组由机体免疫细胞和非免疫细胞合成和分泌的小分子或中等分子量的可溶性蛋白质与糖蛋白。根据的细胞因子的生理功能将其为以下种类：、干扰素、集落刺激因子、 白细胞介素 、 肿瘤坏死因子 、趋化因子 、生长因子 、 促红细胞生长素。6、基因工程疫苗包括以下几种，即 基因工程亚单位疫苗 、 基因工程载体疫苗、 核酸疫苗 、基因缺失活疫苗 、 蛋白质工程疫苗 、 转基因植物疫苗。8、对生物组织与细胞破碎的方法有 高压匀浆法 、 高速珠磨法 、 超声振荡破碎法 、 压力法 、 反复冻融法、化学渗透法、酶溶破碎法 等。9、动物生物制品的质量检验主要包括 、 、 、 、 等。10、抗体具有特异性结合相关抗原 、激活补体 、结合细胞 、介导细胞毒 、促进吞噬和通过胎盘等功能。发挥其抗肿瘤 、抗感染 、免疫调节与监视、解毒 等作用。11、实验动物通过注射方法给药的方式包有：皮内注射、皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、静脉注射 。12、生物制品成品的质量检验主要内容包括 物理性状检验、无菌检或纯粹检、安全检验、 效力检验 、其他检验 等。13、对实验动物小白鼠采血的方法有 尾静脉 、 眼眶动脉和静脉（摘眼球法）、眼眶静脉丛、心脏、大血管、断头等。 二、选择题 1、下列物质中抗原性最好的是：A、蔗糖B、多肽C、丁酸D、赖氨酸12、下列物质中抗原性最好的是：A、葡萄糖B、蛋氨酸C、乙酸D、多肽2、临产前动物进行计划性疫苗接种，是为了使新生动物获得。A、天然被动免疫B、天然主动免疫C、人工被动免疫D、人工主动免疫11、出生后动物进行计划性疫苗接种，是为了获得。A、天然被动免疫B、天然主动免疫C、人工被动免疫D、人工主动免疫3、在动物生物制品中最早和最普及使用的佐剂是A、蜂胶B、白油C、铝胶D、明矾4、半抗原是A、有抗原性缺反应原性B、有免疫原性缺反应原性C、有反应原性缺免疫原性D、有反应原性缺抗原性5、三联疫苗是指：A、由三种血清型制成的一种疫苗B、由三种病原体制成的一种疫苗C、由同一种类的三个毒株制成的一种疫苗D、由三种方法制成的一种疫苗15、三价疫苗是指：A、由三种血清型制成的一种疫苗B、由三种病原体制成的一种疫苗C、由同一种类的三个毒株制成的一种疫苗D、由三种方法制成的一种疫苗6、常规畜禽疫苗细菌灭活的温度是：A、56B、40C、37D、2516、常规畜禽疫苗病毒灭活的温度是：A、56B、40C、37D、257、动物疫苗中强毒灭活疫苗占比例较大，其最主要原因是：A、抗原性好制造简单B、抗原性好成本低C、安全性好成本低D、制造简单用量少19、动物疫苗中弱毒疫苗占较大比例，其最主要原因是：A、安全性好制造简单B、抗原性好成本低C、安全性好成本低D、研发简单用量少8、效果相对不好的免疫接种途径是：A、喷雾B、滴眼C、涂肛D、饮水9、一次接种，终身免疫的疾病是：A、疯牛病B、禽流感C、大肠杆菌病D、痘病10、来源于腔上囊的免疫细胞是：A、B细胞B、T细胞C、K细胞D、A细胞14、当前用于防治禽流感的禽用疫苗使用了以下物质：A、蜂胶B、白油C、铝胶D、明矾16、加佐剂的灭活疫苗最常用免疫途径是：A、口服B、喷雾C、肌肉注射D、腹腔注射18、免疫效果最差的疾病是：A、疯牛病B、禽流感C、大肠杆菌病D、痘病20、被称为巨球蛋白的免疫球蛋白是：A、IgGB、IgM C、IgA D、IgD 三、判断题1、同源疫苗是指来源于相同培养物培养的疫苗。 F2、异源疫苗是指来源于不同培养物培养的疫苗。 T3、多价疫苗是指两种以上疫病的病原体制备成的一种疫苗。 F4、多联疫苗是指两种以上疫病的病原体制备成的一种疫苗。 T5、在生物制品中，只有活疫苗才需要冷冻干燥程序。 F6、所有生物制品制备过程都需要冷冻干燥程序。 F7、病毒的保护性抗原是保护病毒不被机体的免疫系统认识的。 F8、细菌的保护性抗原是指能刺激机体产生免疫作用的抗原成分。 T9、经消化道会受到消化酶的作用，所以弱毒疫苗只能用注射途径免疫。 F10、微生态制剂肌肉注射的效果比口服的效果好。 F11、细菌和病毒均可以在体外的人工培养基上生长。 F12、细菌和病毒均不可以在体外的人工培养基上生长。 F13、类毒素具有与细菌外毒素相似的免疫原性。 T14、类毒素具有与细菌外毒素相似的毒性作用。 F15、食用疫苗就是通过口服途径接种的弱毒疫苗。 T16、食用疫苗就是传统的疫苗通过口服途径接种。 F17、因为芽胞菌抵抗性好，故用作饲料添加的微生态制剂都使用芽胞菌。 F18、因为芽胞菌抵抗性好，故微生态制剂常使用芽胞菌。 T 19、细菌疫苗菌液的制备至少要经过三代培养。 T20、常规疫苗只能用注射途径免疫。 F四、名词解释：名词解释：治疗性疫苗：指在已感染病原生物或患某些疾病的机体中，通过诱生机体的特异性或非特异性免疫应答，以达到治疗或防止疾病恶化的天然、人工修饰合成或用基因重组技术表达的产品或生物制品。保护剂：又称稳定剂，是指一类能防止生物活性物质在冷冻真空干燥时受到破坏的物质。单克隆抗体：把产生抗体的B淋巴细胞与多发性骨髓瘤细胞进行融合，形成兼有两个亲代细胞特征的杂交瘤细胞，这种杂交瘤细胞在细胞培养中产生的大量单一类型的高纯度抗体就叫单克隆抗体。佐剂：凡是可以增加抗原特异性免疫应答的物质均称为佐剂。无菌动物：用现有技术手段从动物体内外检查不到任何活的微生物和寄生虫的动物。冻干（冷冻干燥）：将含有大量水分的物料先冻结至冰点以下，形成固体，然后在高真空条件下加热，使水蒸气直接从固体中升华出来进行干燥的方法。催化抗体：也叫抗体酶，是具有催化活性的免疫球蛋白，兼具有抗体的高度选择性和酶的高效催化性。灭活：是指破坏微生物的生物学活性、繁殖能力和致病性，但尽可能不影响其免疫原性。SPF动物（无特定病原体动物）：指动物体内外不带有特定的微生物和寄生虫。高免血清：为含有高效价特异性抗体的动物血清制剂，能用于治疗或紧急预防相应病原体所致的疾病。人血液代用品：是指能够携带氧、维持血液渗透压和酸碱平衡及扩充血容量的人工制剂。原代细胞：是指由新鲜组织经剪碎和胰酶消化制备的细胞，如鸡胚成纤维细胞。血液制品：是以人血浆为原材料，采用蛋白质分离技术经深加工制备而成的，在临床抢救和治疗过程中被广泛应用，包括白蛋白、免疫球蛋白、各种凝血因子等救死扶伤的重要药品。生物制品学：研究各类生物制品的学科。疫苗：凡接种动物后能产生自动免疫和预防疾病的一类生物制剂。治疗性疫苗保护剂单克隆抗体佐剂无菌动物冻干催化抗体灭活SPF动物高免血清人血液代用品 原代细胞 血液制品生物制品学、动物生物制品、疫苗、活疫苗与灭活疫苗、病毒抗体复合物疫苗、重组活疫苗、基因工程活载体疫苗、亚单位疫苗、基因工程亚单位疫苗、抗独特型疫苗、单价疫苗、多价疫苗与混合疫苗、同源疫苗与异源疫苗、益生素、副免疫制品五、问答题1、分析迄今无公认的寄生虫疫苗的原因。 （1）多数寄生虫为多细胞生物，寄生虫抗原成分非常复杂，很难找准特定保护性抗原，保护性免疫应答机制不清。（2）寄生虫抗原免疫所诱导的大都为部分保护性免疫力（一般为30%70%）。（3）寄生虫形成种种逃避宿主免疫应答的办法，其机制尚待阐明。（4）寄生虫一般引起慢性长期感染，病期因寄生虫生活史中形态上不同，常存在数阶段（期）。2、GMP的基本内容、作用和特点？ （1）基本内容：a.人员；b.硬件，即药品生产企业的厂房设施、设备、原材料等；c.软件，即组织、制度、工艺、操作、卫生标准、记录、教育等管理规定。（2）作用和特点：a.GMP的实施涉及两个方面：政府药政管理部门从管理角度出发，把GMP看成是政府对制药厂（包括生物制品生产单位）提出的最低要求，并作为药品质量监督员检查药厂和药品质量的依据；对制药单位来说，应把GMP视为本厂所必须具备的技术水平，即生产管理、质量管理和质量监测应达到的必须水平。b. GMP是根据通用的原则性规定，针对本国所有的药厂而制定的。各药厂应按GMP要求，制定更具体的实施条例。c、GMP是为了防患未然。GMP强调药品质量是设计和生产出来的，而不是检验出来的。应该把管理的重点放在生产过程中，通过对生产过程来控制来保证生产出来安全有效地药品。d、GMP强调有效性的证实。既对一个工序或一件用具、设备在用于生产之前，要经过验证，证明是符合要求的、有效的，以确保产品质量。e、在管理系统上，GMP要求有生产管理部门和质量管理部门两权分立的特点，在组织上两者的地位是平行的，在人事上两个部门的负责人不能互相兼任。有人把生产管理部门和质量管理部门称为GMP的两大要素。f、GMP强调人员素质、卫生要求、无菌要求、核对制度以及质量监督检查制度。3、概述基因工程生物制品的特点（1）它是利用活细胞作为表达系统制备的产品，因此，所获得的蛋白质产品往往相对分子质量较大，并具有复杂的分子结构。（2）许多基因工程生物制品都是人体生理功能精密调节所必需的蛋白质，它们在极微量的情况下就可产生显著的效果，在性质或剂量上的任何偏差，都可能贻误病情甚至造成严重的危害。（3）宿主细胞中表达的外源基因，在转录或翻译、工艺放大等过程中，都有可能发生变化。（4）分泌量极低而生理、药理活性极高。（5）具有细胞和组织特异性。（6）要求进行理化鉴定，包括产品的特性、纯度（一般纯度应在95%以上）及与天然产品的一致性。（7）要求进行外源核酸和抗原检测，规定每剂量DNA含量不超过100pg，细胞培养产品中小牛血清含量必须合格。成品中不应含有纯化过程中使用的试剂，包括层析柱试剂和亲和层析用的鼠IgG等。（8）生物活性或效力实验结果应与天然产品进行比较。4、概述生物制品的质量检测与控制（1）质量检测：产品的鉴定：a.蛋白质类、b.氨基酸成分分析、c.肽图与氨基酸序列分析、d.重组蛋白质的浓度测定和相对分子质量测定、蛋白质二硫键分析；纯度分析：a.目的蛋白质含量测定、产物杂质检测；生物活性（效价）测定；安全性评价；稳定性考察。（2）质量控制：原材料的质量控制：a.表达载体和宿主细胞、b.克隆基因的序列；培养过程的质量控制：a.原始细胞库、b.有限代次的生产、c.连续培养生产；纯化工艺过程的质量控制；最终产品的质量控制。5、影响灭活剂灭活作用的因素a.温度、b.pH、c.灭活剂的浓度、d.毒素种类6、治疗性疫苗是什么？比较治疗性疫苗与预防性疫苗的主要区别。区别：a.使用对象不同：治疗性疫苗的使用对象为已病者，而预防性疫苗的使用对象为未病者。b.使用目的不同：治疗性疫苗的目的是治疗疾病，预防性疫苗的目的是预防疾病。 c.监测手段不同：预防性疫苗接种后产生保护性抗体，可通过实验室进行监测，结果准确，可靠。而治疗性疫苗接种后疾病是否改善，则需要结合临床症状、体征、疾病相关的实验指标进行综合测试，较为复杂，且其准确性尚有争议。 d.期望激发的免疫应答类型不同：预防性疫苗接种后，期望产生的是保护性抗体，即激发体液免疫反应；而治疗性疫苗主要用于病毒感染和肿瘤疾病，病毒一旦进入宿主细胞内，抗体即失去作用，肿瘤细胞的杀灭也主要依赖细胞免疫效应，因此，治疗性疫苗应以激发细胞免疫反应为主要目的，这是与预防性疫苗最大的区别。7、制备生物制品用的强、弱菌(毒)种应具备哪些基本标准？a.毒力在规定范围内、b. 反应原性与免疫原性优良、c. 遗传学上相对纯一与稳定、d.生物学特性明显，历史清楚。9、简述鸡胚成纤维细胞制备的主要操作步骤。a.细胞培养用品的清洗与消毒；b.取胚及剪碎：取出胚胎，用灭菌剪刀剪去头部、翅爪及内脏后，尽量剪碎余下组织，用Hanks液洗至不浑浊为止；c.消化：加预热的0.06%胰酶于组织块中，37oc水浴静止消化1015min；d.洗涤、吹打：用Hanks液将组织块轻轻地冲洗两次后，加入含10%20%犊牛血清的MEM培养液（血清能终止残存胰酶的作用），反复吹打小块，尽量使细胞分散；e.转瓶：将组织块转入细胞培养瓶，置37oc培养箱（烛缸）培养，；f.换液：生长成单层细胞后，即可倒去细胞瓶中的液体，加入37 oc预热的Hanks液洗两次，再加入含10%20%犊牛血清的MEM培养液继续培养。g.接种病毒：24h后，生长好的细胞即可接种病毒。倒掉培养液，加入预热的Hanks液洗两次，加病毒液1ml，室温或37 oc孵育（吸附）15min30min后，不需吸弃病毒液，再加入含10%20%犊牛血清的MEM，继续37 oc烛缸培养。10、动物病毒培养有哪些基本技术？1.静置培养、2.转动培养、3.悬浮培养、4.微载体培养11、生物制品企业应具备哪些废弃物处理设施？污水处理：臭氧法利用臭氧中氧的强氧化作用，使污水中的致病菌、病毒以及细菌芽孢迅速杀灭带毒粪便、残渣与垫草的处理：生物发酵利用废物中的微生物，使他们进行发酵，分解有毒物质成为无毒物质，发酵完毕，清出其腐烂物动物尸体与脏器处理：焚尸炉应用喷柴油的方法，在引风条件下进行焚烧附：仪器设备名称：灭菌与净化设备：高压蒸汽灭菌器、干热灭菌器、电离辐射灭菌、无菌室、净化工作台微生物培养装置：温室、细胞培养转瓶机、发酵培养罐、生物反应器、微生物浓缩装置-超滤膜、孵化器乳化器：胶体磨、高压匀浆泵冻干机分装与包装设备：理瓶旋转工作台、多头自动分装机、胶塞定位机、自动灌装半加塞联动机冷藏设备：冷库、冷藏运输设备、液氮罐12、叙述大肠杆菌灭活蜂胶疫苗的制备流程要点。a.细菌培养基的配制：麦康凯琼脂用于分离大肠杆菌，肉汤培养基用于培养大肠杆菌以及无菌检。b.蜂胶佐剂配制：用95%酒精研磨、溶解并稀释蜂胶至30mg/ml。c.致病性大肠杆菌的分离培养：将菌种划板于麦康凯培养基，37oc培养24h，挑单克隆少许于少量肉汤中复壮68h，再转入大量肉汤中增殖培养。d.制苗大肠杆菌灭活、计数与鉴定：留样1ml，其余加0.3%甲醛灭活，培养24h后经肉汤无菌检（37oc摇床培养24h），若为阴性，则可作为灭活菌苗的抗原。取100ul留样菌液作倍比稀释，铺板于麦康凯培养基，培养24h后数菌落，算出菌液浓度。将留样菌液分别接种至各种生化培养基中，作生化鉴定。e.蜂胶灭活疫苗配制及质量检验：将蜂胶加到灭活菌液中，使蜂胶终浓度为10mg/ml，混匀使用。取0.5ml肌肉注射于雏鸡，作安全检。13、详述基因工程干扰素的制备流程。将干扰素基因导入大肠杆菌内，通过培养大肠杆菌来生产。14、设计用兔制备禽流感H9亚型高免血清的基本流程。15、概述禽流感H9亚型灭活油乳剂疫苗的制备流程。16、设计用兔制备大肠杆菌高免血清的基本流程。17、详述粗制猪白细胞干扰素的制备方法。19、生物制品有什么作用？有哪些种类？（1）作用：生物制品可用于人类疾病的预防、治疗和诊断。（2）a.疫苗、b.抗血清和抗毒素、c.诊断制品、d.血液生物制品、e.微生态制剂、f.细胞因子及重组DNA产品、g.其他制品。20、简述生物制品的命名原则。21、概述我国近代动物生物制品主要成就。22、结合我国动物生物制品现状，试述我国动物生物制品学的发展趋势。23、请分别举例子说明预防、诊断、治疗生物制品a.预防类：乙肝疫苗、破伤风联合疫苗等；b.治疗类：免疫血清、凝血因子等；c.诊断制品： HIV抗原、常用的抗体等。24、动物生物制品的现状多联疫苗的使用；试剂盒的诊断作用；抗血清的治疗应用；工程菌的研究等。25、动物生物制品研究存在的难题生物制品的研制赶不上病毒的变异快；毒力基因的转移导致新的病原微生物的出现；肿瘤不出现，难以观察，难以治疗等。26、举例新型佐剂、新型灭活剂、新型保护剂的应用及其特点。a.佐剂（卡介苗），特点：具有很强的免疫调节效应，可通过刺激机体产生干扰素而增强疫苗的免疫效果；b.灭活剂（-丙内酯），特点：直接作用于病原体DNA或RNA，改变其核酸结构达到灭活目的，而不直接作用于蛋白。极易水解，无残留，并且水解产物无毒无害；c.保护剂（脱脂牛奶），特点：可促使因冻干而受损的细胞修复。27、生物制品生产原料主要来源是什么？来源于生物材料（包括器官、组织、细胞、微生物、工程菌构建与表达）的增殖或培养。28、一般生物制品生产的主要流程a.材料的选择与增殖；b.目的产物的分离纯化；c.生物制品的商品化生产，半成品配制；d.分装，成品质量鉴定；e.生物制品的包装、保存与运输。29、生物制品生产中的分离与纯化手段过滤、离心、层析、透析、盐析、电泳、沉淀法、水解法、蒸馏法等。30、体外培养细胞的三种类型，以及主要污染原（1）a.原代细胞（23代）、b.二倍体细胞株（有限性，1050代）、c.传代细胞（恶性转化细胞系、转化细胞系）。（2）主要污染源：细菌污染、真菌污染、支原体污染、病毒污染、来源血清的原虫污染。31、鸡胚增殖病毒的接种方式有哪些a.绒毛尿囊膜接种法；b.尿囊腔接种法；c.羊膜腔接种法；d.卵黄囊接种法；e.脑内接种法；f.胚体接种法；g.静脉接种法32、动物干扰素的制备流程(1)无菌采集禽的新鲜抗凝血、分离收集白细胞悬液；(2)禽白细胞悬液中加入启动用粗纯制禽白细胞干扰素进行短时启动超诱导培养；(3)加入诱导剂鸡新城疫病毒(NDV)及含有禽血清或血浆的营养液进行诱生培养18-24小时；(4)收集上清液，灭活鸡新城疫病毒等，过滤除菌；(5)分装好的禽白细胞干扰素粗制品，冷冻保存。经检定合格后即可使用。33、禽流感H5N1特异性转移因子的制备方法（1）免疫：用禽流感病毒H5N1血清亚型灭活疫苗肌肉注射免疫10日龄实验鸡，在15日龄再以同批疫苗0.3mL肌肉注射做为加强免疫。（2）抗体效价检测：每隔一定时间翅静脉采血，分离血清，进行HA和HI试验，检测疫苗免疫抗体效价。（3）禽流感病毒H5N1血清亚型特异性TF的制备：密切监测疫苗免疫抗体水平，在抗体水平达到高峰值时，翅静脉无菌采取抗凝血，分离获得白细胞。加入细胞培养液、小牛血清、双抗，烛缸培养白细胞。培养结束收集细胞液，超声波破碎细胞，再经过透析获得禽流感病毒H5N1血清亚型特异性转移因子。过滤除菌后，分装，置20保存。34、白细胞介素2的制备流程先提取RNA，再以RT-PCR扩增白细胞介素-2基因，与原核表达载体pBAD构建表达质粒pBAD/IL-2，转化大肠杆菌LMG194后诱导表达。大肠杆菌诱导后经超声波裂解、离心去沉淀即为IL-2蛋白粗制品。用Ni-NTAArgarose蛋白纯化系统可以较快的得到IL-2纯品。粗制品或纯品加入甘氨酸等稳定剂和助溶剂，无菌过滤、分装和冻干后制成成品，-20保存。35、猪发生猪流感时能用鸡干扰素治疗吗？