专题二检测试题非选择题.docx

专题二 微生物的培养与应用检测试题1发酵法生产酒精后的废液（pH4.3）含有大量有机物，可用于培养、获得白地霉菌体，生产高蛋白饲料。培养、制取白地霉菌体的实验过程示意图如下：请据图分析回答问题。（1）实验过程中培养白地霉的培养基是_。培养基定量分装前，先调节_，分装后用棉塞封瓶口，最后_处理。（2）图中过程称为_，从甲到丁的培养过程是为了_。白地霉的代谢类型为_。（3）为确定菌体产量，图中操作之前，应先称量_的质量。过滤后需反复烘干称量，直至_。所得菌体干重等于_。2从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从_环境采集。（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_的培养基，并在_条件下培养。（3）下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是_，获得图B效果的接种方法是_。（4）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行_，接种前要进行_，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_条件下进行。3根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微镜检，以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、圆褐固氮菌分离开来。下面是分离筛选的方法、步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容。首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行高温灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养。（1）用无氮培养基可筛选出_。（2）用不含有机碳源的选择培养基可筛选出_。（3）酵母菌的筛选需要在常规培养基中另外加入_。（4）利用_培养基培养混合菌，菌落呈深紫色并带有金属光泽的是大肠杆菌，挑取该菌落单独培养，结合显微镜检和鉴别培养来确定。（5）在无氧环境下培养混合菌，_可以生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制_的生长，利用菌落特征，结合显微镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出_。4如图为分离微生物的流程示意图，请据图回答问题：(1)绝大多数细菌分布在距地表约38 cm的土壤层，因此，土壤取样时，一定要铲去_；要分离土壤中分解纤维素的细菌，可以选择_的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土。(2)微生物培养时，不同的微生物需要不同的培养温度和时间，细菌一般在_的温度下培养_天。(3)若要对分离的细菌做进一步的鉴定，还需借助物理化学的方法：若要鉴定是否有分解尿素的细菌，可以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_指示剂，若指示剂变红，说明培养基的PH_，这样可以鉴定这种细菌可以分解尿素；若要鉴定是否有分解纤维素的细菌，在长出菌落的培养基上，覆盖_染液，1015 min后，倒去该染液，再加入1 mol/L的NaCl溶液，15 min后，也倒去该溶液，若菌落的周围出现_，说明此细菌能分解纤维素。(4)在105稀释度下求出3个平板上菌落数的平均值为63，那么，每克样品中的菌落数为_。5莠去津是一种含氮的有机化合物，它是广泛使用的除草剂之一。莠去津在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，按下面程序选育能降解莠去津的细菌（目的菌）。已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明。请据图回答下面的问题。（1）莠去津的作用机理之一是阻断光反应中的电子传递过程，影响NADP+形成，进而影响在中进行光合作用的暗反应过程，最终抑制杂草生长。（2）由于莠去津的_作用，在长期使用莠去津的土壤中可能含有目的菌。（3）对配制的液体培养基等需采取_灭菌。（4）下图是AC瓶中三类细菌的最大密度柱形图，由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的目的是_；甲类细菌密度迅速降低的主要原因是_。（5）在固体培养基中，无透明带菌落利用的氮源主要是_；有透明带菌落利用的氮源主要是_，据此可筛选出目的菌。6急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌的含量和病毒的含量是有效监控疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水有关的问题：(1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用“涂布器”分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为_。下图所示的四种菌落分布图中，不可能由该方法得到的是_。(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要对照组？_。为什么？_。(3)有三种材料或用具需要消毒或灭菌：培养细菌用的培养基与培养皿；玻棒、试管、烧瓶和吸管；实验操作者的双手。其中需要消毒的是_，需要灭菌的是_。(4)已知大肠杆菌能利用乳糖发酵并产酸产气，现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？_。7.下表所示为某微生物培养基的配方，请回答：成分含量成分含量NaNO33 gFeSO40.01 gK2HPO41 gC6H12O630 gKCl0.5 gH2O1000 mLMgSO47H2O0.5 g青霉素0.1万单位(1)依物理性质，该培养基属于_培养基；依用途划分，则属于_培养基。(2)根据培养基原料，所培养微生物的代谢类型是_(填“自养型”或“异养型”)。(3)该培养基中的碳源是_。不论何种培养基，在各成分均溶化后分装前，都要进行的是_。(4)若用该培养基培养分离纤维素分解菌，应除去的物质是_，应加入的物质是_，为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入_。8. 炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病，炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状，对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。（1）细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。（2）细菌鉴定：实验流程如图所示对配制的液体培养基等需采取_灭菌；实验所用液体培养基的碳源为_（填“无机碳”或“有机碳”）。挑选可疑菌落制片后，用_观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。接种可疑菌后，35 培养24 h，液体培养基变浑浊，原因是_，对照组试管中应加入_，与实验组同时培养6 h后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_（填“高”或“低”），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有_。9紫杉醇具有独特的抗肿瘤作用。研究人员从红豆杉中发现了一种具有产紫杉醇能力的内生真菌。为探究制备红豆杉内生真菌原生质体的适宜pH和温度，进行了如下实验：培养菌株，离心收集菌丝体，并用渗透压稳定剂洗涤两次；将获得的菌丝体，分别置于不同pH或温度的培养液中，并加入适量酶液，震荡、摇匀后，每隔一段时间，取样、过滤、离心，用渗透压稳定剂洗涤两次后，收集纯化的原生质体。统计原生质体数量，结果如下。分析回答：酶解温度()25283235原生质体产量(106个mL)12223126(1) 步骤中，加酶液的目的是 _ ，洗涤时选用渗透压稳定剂的理由是 _ 。(2) 结果表明，制备红豆杉内生真菌原生质体的适宜条件是 _ 、 _ 、 _ 。(3) 检验原生质体再生能力，需要配制再生固体培养基，培养基灭菌常采用_ 法，灭菌后需要冷却到 _ 左右才能用来倒平板。(4) 实验中将收集到的原生质体浓度为30106个mL培养液先稀释l04倍，再各取0.1mL稀释液分别均匀涂布在3个再生固体培养基上培养。一段时间后，统计得到的菌落数分别为：27、21、24。则原生质体再生率(能再生的原生质体数占全部原生质体的比例) 约为_ 。10. 回答下列有关微生物培养的问题（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑_、_和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_、_等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行_（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和_；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能_。（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_。（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_。（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。参考答案1.（1）废液上清液 pH 灭菌 （2）接种 扩大培养 异养需氧型（3）滤纸 恒重（质量基本不变） 恒重时的质量与滤纸质量之差（答案合理即可）解析：从题干可知，该实验是用发酵法产生酒精后的废液来培养白地霉菌，再分析题中的流程图可知废液上清液就是白地霉菌的培养液。制备培养液的几个要点：营养要均衡，pH要适宜，无菌。所以在分装前首先要调节pH，然后进行灭菌，杀死所有的微生物，冷却后接种。接种完成后要进行扩大培养以便获得更多的微生物菌体。用发酵法产生酒精后的废液含有大量的有机物，并且培养菌体的锥形瓶是开放的，可推知白地霉菌的代谢类型是异养需氧型。经过一段时间的培养要获得菌体的重量，可采用差值法，即先称滤纸的重量，再用滤纸过滤培养液，将得到的过滤物连同滤纸一起进行烘干，直至烘干物的重量不发生变化，此时的重量减去滤纸的重量即获得所培养微生物菌体的重量。2.（1）海滩等高盐 （2）以淀粉为唯一碳源 高温（3）稀释涂布平板法 平板划线法 （4）调节pH 高压蒸汽灭菌 无菌解析：噬盐菌的菌样应从高盐环境采集。微生物产生淀粉酶说明其碳源是淀粉，应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养。图A菌落分布较均匀，接种方法是稀释涂布平板法，图B菌落集中呈线状，接种方法是平板划线法。配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH，接种前要进行高压蒸汽灭菌，在实验中要注意在无菌条件下进行。3.（1）圆褐固氮菌 （2）硝化细菌 （3）某种抗生素，如青霉素（4）伊红和美蓝 （5）大肠杆菌、乳酸菌、酵母菌 大肠杆菌和酵母菌 乳酸菌解析：圆褐固氮菌为固氮微生物，可以利用空气中的氮气，因而可以在不含氮源的培养基上生存。硝化细菌为自养型微生物，可在不含有机碳源的培养基上生长。在培养基上加入青霉素，可抑制细菌、放线菌生长，从而可分离出酵母菌和霉菌。伊红和美蓝与大肠杆菌代谢产物结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽。乳酸菌产生的乳酸可抑制其他微生物的生长，但对自己的生长影响不大。4. (1)表层土纤维素丰富 (2)303712(3)酚红升高刚果红透明圈 (4)6.31075.（1）NADPH 叶绿体基质 （2）自然选择 （3）高压蒸汽 （4）初步选择能降解莠去津的细菌（目的菌）并提高其密度培养液中缺少甲类细菌可利用的氮源或（和）有氧条件抑制了甲类细菌的生长（5）氮气 莠去津解析：由于长期使用莠去津，通过莠去津的选择作用，该地土壤中可能含有能分解莠去津的细菌。图中的培养流程一定要注意无氮培养基和过量莠去津及振荡培养，A、B、C三瓶中各类细菌密度不同，通过对比三者的生活条件，A瓶刚从土壤浸出液中分离出来，可能含有少量的氮源，随着培养的进行氮源逐渐减少，甲类细菌不能适应而迅速减少，也可能是振荡造成培养液中溶氧增加，使甲类细菌迅速减少。对培养结果进行分析可知，无透明带菌落利用的氮源可能是空气中的氮气，因培养基中的莠去津未被利用而未出现透明圈，出现透明带菌落说明莠去津被分解利用，据此可筛选出目的菌。6.(1)稀释涂布平板法D(2)是因为需要判断培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格)(3)(4)通过无菌操作向试管内注入一定量待测水样，再注入已灭菌的乳糖蛋白胨培养液将试管充满，塞上塞子，混匀后置于37 恒温箱培养24 h，若试管内有气泡生成，则说明水样中有大肠杆菌解析(1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数，这种方法称为稀释涂布平板法。题图所示的四种菌落分布图中，D图是通过平板划线法得到的。(2)用稀释涂布平板法统计菌落数时需要对照组：需要用空白的培养基做对照来判断培养基是否被污染。(3)在三种材料或用具中，需要消毒，需要灭菌。(4)根据题意，大肠杆菌能利用乳糖发酵并产酸、产气，所以可以通过是否产生气体判断是否有大肠杆菌。可以通过无菌操作向试管内注入一定量待测水样，再注入已灭菌的乳糖蛋白胨培养液将试管充满，塞上塞子，混匀后置于37 恒温箱培养24 h。若试管内有气泡生成，则说明水样中有大肠杆菌。7. 解析 本题主要考查培养基种类、纤维素分解菌的特点，由表的成分可知此培养基为液体、选择培养基，用于培养分离纤维素分解菌应除去 C6H12O6 和青霉素，同时加入纤维素粉，用刚果红来检测纤维素分解菌的存在与否。答案(1)液体选择(2)异养型(3)C6H12O6调整pH值(4)C6H12O6 和青霉素纤维素粉刚果红8. 解析：对微生物的培养基一般采用高压蒸汽灭菌，以维持各成分比例及pH的稳定性。液体培养基的浑浊度与微生物的密度呈正相关，由培养基的浑浊度可推断微生物的密度。答案：（每空2分）（2）高压蒸汽有机碳显微镜细菌大量繁殖等量生理盐水低吞噬细胞、浆细胞9. （1）原生质体是没有细胞壁的活细胞，真菌有细胞壁，加酶后破坏真菌的细胞壁，获得真菌的原生质体；由于真菌的细胞壁遭到破坏，所以洗涤时，渗透压稳定剂加入为防止原生质体被破坏。（2）由图可知，原生质体的产量最高：在PH值=5，酶解时间在45小，酶解温度为32。（3）对固体培养基进行灭菌最常用的方法是高压蒸汽灭菌；灭菌后需要冷却，需要将培养基冷却到不烫手，即大约在50作用时才能倒平板。（4）实验中将收集到的原生质体浓度为30106个mL培养液先稀释l04倍，原生质体浓度为300个mL，取0.1mL稀释液，得到30个。但实际测得是27、21、24。平均值是24。所以2430=0.8。即原生质体再生率为8%。10. 答案：（1）温度 酸碱度 易培养 生活周期短（2）灭菌 消毒 损伤DNA的结构（3）比例合适（4）鉴定(或分类)（5）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生.（6）灭菌解析：（1）大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点，培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。（2）灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，所以对培养基和培养皿进行灭菌，消毒使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，操作者的双手需要进行清洗和消毒， 紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，应保证样品稀释的比例适合。（4）对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。（6）因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠管出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。9