生化期末习题及答案.docx

生物化学复习题 一、 名词解释 变构效应: 酶分子的非催化部位与某些化合物可逆地非共价结合后会使酶分子构象发生改变，进而会改变酶的活性状态，或是增加酶活力或是抑制酶活力，这种效应即称为酶的别构效应。等电点：在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势和程度相等，成为兼性离子，呈电中性，此时溶液的pH称为该氨基酸的等电点。盐析：若向蛋白质溶液中加入大量中性盐时反而会因自由水成为盐离子的水化水而降低蛋白质的溶解度合使其从溶液中析出，此现象称为盐析。亚基: 有些蛋白质的分子量很大，由2条或2条以上具有独立三级结构的多肽链通过非共价键相互结合而成，称为蛋白质的四级结构。构成四级结构的每条多肽链称为亚基 (subunit)诱导楔合学说：指用来解释酶的专一性的一种学说，该学说认为酶与底物的分子形状并不是正好完全互补的，而是在结合过程中，由于酶分子或底物分子，有时是二者的构象同时发生了改变才正好互补，发生催化反应的，这种动态过程即称为酶的诱导契合稳态:催化部位：酶活性中心:在酶分子中与酶活力直接相关的区域往往是由少数几个特异性的氨基酸残基集中的区域，这少数几个氨基酸残基参与底物结合和催化反应，因此这个区域称为酶活性中心或活性部位，一般可分为结合部位和催化部位.Tm: 当核酸分子发生热变性时，其 260nm 紫外吸收增加，双螺旋解体成单链，当双螺旋结构解体到一半时的温度称为核酸的热变性温度或熔解温度，以Tm 表示。Tm 大小与核酸的均一性、G+C 含量等因素有关。增色效应: DNA 变性后紫外吸收增加的现象称为增色效应减色效应：而当核酸热变性后在缓慢冷却条件下发生复性时，紫外吸收值会减少的现象称为核酸的减色效应。 终止因子：终止子是转录的终止控制元件，是基因末端一段特殊的序列，它使 RNA 聚合酶在模板上的移动减慢，停止 RNA 的合成。启动子: 启动子是 RNA 聚合酶识别、结合和开始转录的一段 DNA 序列。激酶：催化磷酸基从ATP转移到相应底物上的酶叫做激酶。信号肽：常指新合成多肽链中用于指导蛋白质的跨膜转移（定位）的N-末端氨基酸序列。巴斯德效应：在厌氧条件下,向高速发酵的培养基中通入氧气,则葡萄糖消耗减少。这种抑制发酵产物积累的现象称为巴斯德效应。P/O 比值：在氧化磷酸化中，每 1/2O2 被还原成 ADP 的摩尔数。电子从 NADH 传递给 O2 时，P/O3，而电子从 FADH2 传递给 O2 时，P/O2。三联体密码：由决定蛋白质中氨基酸顺序的核苷酸顺序，由3个连续的核苷酸组成的密码子构成。高能化合物：在标准条件下水解时，自由能大幅度减少的化合物。一般是指水解释放的能量能驱动 ADP 磷酸化合成 ATP 的化合物糖异生：由简单的非糖前体转变为糖的过程。糖异生不是糖酵解的简单逆转。虽然由丙酮酸开始的糖异生利用了糖酵解中的七步进似平衡反应的逆反应，但还必需利用另外四步酵解中不曾出现的酶促反应，绕过酵解过程中不可逆的三个反应。酮体：酮体是指脂肪酸在肝脏中氧化降解后产生的特有中间代谢产物，包括乙酰乙酸、D-羟丁酸和丙酮三种。复制子：DNA 中发生复制的独立单位称为复制子。翻译后加工: 将新合成的多肽链转变为有功能的蛋白质分子所经历的一系列化学反应过程。包括肽键形成、裂解、二硫键生成等。二、 选择题 1. 蛋白质形成三级结构的主要驱动力是 （ ） A 范德华力 B 疏水作用 C 氢键 D 离子键 2. 侧链含有咪唑基的氨基酸是 （ ） A 甲硫氨酸 B 半胱氨酸 C 精氨酸 D 组氨酸 3. 精氨酸的 Pk1=2.17、Pk2=9.04（a-NH3）Pk3=12.48（胍基）PI 是多少 （ ） A 1/2(2.17+9.04) B 1/2(2.17+12.48) C 1/2(9.04+12.48) D 1/3（2.17+9.04+12.48） 4. 蛋白质变性过程中与下列哪项无关 （ ） A 理化因素致使氢键破坏 B 疏水作用破坏 C 蛋白质空间结构破坏 D 蛋白质一级结构破坏，分子量变小 5. 亚基的描述，哪一项不恰当？ （ ） A 每种亚基都有各自的三维结构 B 亚基内除肽键外还可能会有其它共价键存在 C 亚基间次级键的结合比二、三级结构紧密 D 亚基单位独立存在时具备原有生物活性 6. 决定 tRNA 携带氨基酸特异性的关键部位是 （ ） A 3末端 B 反密码子环 C 二氢尿嘧啶环 D 额外环 7. 稀有碱基较多的核酸是 （ ） A 核 DNA B 线粒体 DNA C tRNA D RNA 8. RNA 碱水解产物是 （ ） A 2核苷酸和 5核苷酸 B 2核苷酸和 3核苷酸 C 3核苷酸和 5核苷酸 D 2核苷酸和 4核苷酸 9. DNA 复性的重要标志是 （ ） A 溶解度降低 B 溶液粘度降低 C 紫外吸收增大 D 紫外吸收降低 10. DNA的纯度可用OD260与OD280的比值来表示，下列说法正确的是 （ ） A 当 OD260/OD280 值1.8 时，说明含盐离子等杂质 B 当 OD260/OD280 值1.8 时，说明含 RNA 等杂质 C 当 OD260/OD280 值1.8 时，说明含蛋白质和苯酚等 D 当 OD260/OD280 值1.8 时，说明含 RNA 等杂质 11. 核细胞 mRNA 帽结构最多见的是 （ ） 12. A m7ApppNmP B m7GpppNmP C m7UpppNmP D 13. 下图的结构式代表哪种糖？ （ ） A -D-吡喃型葡萄糖 B -D-吡喃型葡萄糖 C -D-呋喃型葡萄糖 D -D-呋喃型葡萄糖 14. 有关糖原结构的下列叙述哪些是正确的? （ ） (1).有 -1,4 糖苷键 (2).有 -1,6 糖苷键 (3).糖原由 -D-葡萄糖组成 (4).糖原是没有分支的分子 A.1,2,3 B.1,3 C.2,4 D.4 15. 从组织中提取酶时，最理想的结果是 （ ） A 蛋白产量最高 B 转换系数最高 C 酶活力单位数值很大 D 比活力最高 16. 酶的竞争性抑制剂具有下列哪种动力学效应： （ ） A Vmax 不变，Km 增大 B Vmax 不变，Km 减小 C Vmax 增大，Km 不变 D Vmax 减小，Km 不变 17. 关于米氏常数 Km 的说法，哪个是正确的？ （ ） A 饱和底物浓度时的速度 B 在一定酶浓度下，最大速度的一半 C 饱和底物浓度的一半 D 速度达最大速度一半时的底物浓度 18. 酶催化底物时将产生哪种效应 （ ） A 提高产物能量水平 B 降低反应的活化能 C 提高反应所需活化能 D 降低反应物的能量水平 19. 催化下列反应的酶属于哪一大类： （ ） 1，6二磷酸果糖 3-磷酸甘油醛+磷酸二羟丙酮 A 水解酶 B 裂解酶 C 氧化还原酶 D 转移酶 20. 一个简单的米氏酶催化反应，当SKm 时： （ ） A 反应速度最大 B 底物浓度与反应速度成正比 C 增加酶浓度，反应速度显著变大 D S浓度增加，Km 值也随之变大 20. 胰蛋白酶原经肠激酶作用后切下六肽，使其形成有活性的酶，这一步骤是 （ ） 21. A 诱导契合 B 酶原激活 C 反馈调节 D 同促效应 22. 卵磷脂分子中的磷酸胆碱部分是这种膜脂的哪个部分？ （ ） 23. A 亲水尾部 B 疏水头部 C 极性头部 D 非极性尾部 24. 当生物膜中不饱和脂肪酸增加时，生物膜的相变温度 （ ） 25. A 增加 B 降低 C 不变 D 范围增大. 26. 目前公认的氧化磷酸化理论是 （ ） A 化学偶联假说 B 构象偶联假说 C 化学渗透假说 D 中间产物学说 27. 下面哪种酶在糖酵解和糖异生作用中都起作用 （ ） A 丙酮酸激酶 B 丙酮酸羧化酶 C 3磷酸甘油酸脱氢酶 D 己糖激酶 28. 关于磷酸戊糖途径的叙述错误的是 （ ） A 6-磷酸葡萄糖转变为戊糖 B 6-磷酸葡萄糖转变为戊糖时每生成 1 分子 CO2，同时生成 1 分子 NADHH C 6-磷酸葡萄糖生成磷酸戊糖需要脱羧 D 此途径生成 NADPHH+和磷酸戊糖 29. 脂肪酸合成时,将乙酰- CoA 从线粒体转运至胞液的是 （ ） A 三羧酸循环 B 乙醛酸循环 C 柠檬酸穿梭 D 磷酸甘油穿梭作用 30. 下列氨基酸中，直接参与嘌呤环和嘧啶环合成的是 （ ） A 天冬氨酸 B 谷氨酰胺 C 甘氨酸 D 谷氨酸 31. 下列过程不能脱去氨基的是 （ ） A 联合脱氨基作用 B 氧化脱氨基作用 C 嘌呤核甘酸循环 D 转氨基作用 32. 呼吸链的各细胞色素在电子传递中的排列顺序是： （ ） A c1bcaa3O2 B cc1baa3O2 C c1cbaa3O2 D bc1caa3O2 33. 在鸟氨酸循环中，尿素由下列哪种物质水解而得 （ ） A 鸟氨酸 B 胍氨酸 C 精氨酸 D 精氨琥珀酸 34. 操纵子是一组功能上相关的基因，以下基因不属于操纵子的是 （ ） A 调节基因 B 启动基因 C 操纵基因 D 结构基因 35. 一碳单位的载体是 （ ） A 叶酸 B 四氢叶酸 C 生物素 D 焦磷酸硫胺素 36. 嘌呤核苷酸的主要合成途径中首先合成的是 （ ） A AMP B GMP C IMP D XMP 37. 1 分子丙酮酸完全氧化分解产生多少 CO2 和 ATP？ （ ） A 3CO2 和 12.5ATP B 2CO2 和 12.5ATP C 3CO2 和 13.5ATP D 2CO2 和 13.5ATP 38. 下列呼吸链组分中氧化还原电位最高的是： （ ） A FMN B Cytb C Cytc D Cytc1 三、判断题 1. 蛋白质在小于等电点 pH 溶液中向正极移动。 （ ） 2. 肽键中相关的六个原子无论在二级或三级结构中，一般都处在一个刚性平面内。 （ 对 ） 3. 蛋白质多肽链中氨基酸的种类数目、排列次序决定它的二级、三级结构，即一级结构含有高级结构的结构信息。 （对 ） 4. 构成天然蛋白质的氨基酸，其 D构型和 L型普遍存在。 （ ） 5. b-折叠是主肽链相当伸展的结构，因此它仅存在于某些纤维状蛋白质中。 （ ） 6. DNA 的 Tm 值和 A-T 含量有关，A-T 含量高则 Tm 高。 （ ） 7. BDNA 代表细内 DNA 的基本构象，在某些情况下，还会呈现 A 型，Z 型和三股螺旋的局部构象。 （ 对） 8. 多核苷酸链内共价键断裂叫变性。 （ ） 9. 真核细胞的 DNA 全部定位于细胞核。 （ ） 10. 真核生物 mRNA 的 5端有一个多聚 A 的结构。 （） 11. 糖的变旋现象是指糖溶液放置后,旋光方向从右旋变成左旋或从左旋变成右旋。 （ ） 12. 酶有几种底物时，其 Km 值也不相同。 （ 对） 13. 对于多酶体系，正调节物一般是别构酶的底物，负调节物一般是别构酶的直接产物或代谢序列的最终产物。 （对） 14. 在非竟争性抑制剂存在下，加入足够量的底物，酶促反应能够达到正常的 Vmax。 （ ） 15. 酶促反应的初速度与底物浓度无关。 （ ） 16. 酶之所以有高的催化效率是因为它可提高反应活化能。 （ ） 17. 最适温度是酶特征的物理常数，它与作用时间长短有关。 （ ） 18. 反竞争性抑制作用的特点是 Km 值变小，Vmax 也变小。 （对 ） 19. 生物膜的不对称性仅指膜蛋白的定向排列，膜脂可做侧向扩散和翻转扩散，在双分子层中的分布是相同的。 （ ） 20. 主动运转有两个显著特点：一是逆浓度梯度进行，因而需要能量驱动，二是具有方向性。 （ 对 ） 21. 在丙酮酸经糖异生作用代谢中，不会产生 NAD+。 （ ） 22. 只有偶数碳原子脂肪酸氧化分解产生乙酰-CoA。 （） 23. 原核细胞和真核细胞中许多 mRNA 都是多顺反子转录产物。 （ ） 24. 共价修饰调节酶被磷酸化后活性增大，去磷酸化后活性降低。 （ ） 25. 生物化学中的高能键是指水解断裂时释放较多自由能的不稳定键。 （对 ） 26. HMP 途径的主要功能是提供能量。 （ ） 27. 脂肪酸的从头合成需要柠檬酸裂解提供乙酰-CoA。 （对 ） 28. 蛋白激酶和蛋白磷酸酶对蛋白质进行磷酸化和去磷酸化的共价修饰是真核细胞代谢的重要方式。（对 ） 29. 有氧或无氧条件下均可发生底物水平磷酸化。 （对 ） 30. 操纵基因又称操纵子，如同启动基因又称启动子一样。 （ ） 31. RNA 合成时，RNA 聚合酶以 35方向沿 DNA 的反意义链移动，催化 RNA 链按 53方向增长。 （ 对 ） 32. L-谷氨酸脱氨酶不仅可以使 L-谷氨酸脱氨基，同时也是联合脱氨基作用不可缺少的重要酶。 （对 ） 33. 动植物组织中广泛存在转氨酶，需要a-酮戊二酸作为氨基受体，因此它们对与之相偶联的两个底物中的一个底物，即a-酮戊二酸是专一的，而对另一个底物则无严格的专一性。 （ 对 ） 34. 非必需氨基酸和必需氨基酸是针对人和哺乳动物而言的，它们意即人或动物不需或必需而言的。 （ ） 35. 鸟氨酸循环（一般认为）第一步反应是从鸟氨酸参与的反应开始，首先生成瓜氨酸，而最后则以精氨酸水解产生尿素后，鸟氨酸重新生成而结束一个循环的。 （对 ） 36. 嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸都是先合成碱基环，然后再与 PRPP 反应生成核苷酸。 （ ） 37. 奇数碳脂肪酸的氧化分解与-氧化无关。 （ ） 38. 在脂肪酸从头合成过程中，增长的脂酰基一直连接在 ACP 上。 （ 对 ） 39. 剧烈运动后肌肉发酸是由于丙酮酸被还原为乳酸的结果。 （对） 40. 解偶联剂可抑制呼吸链的电子传递。 （） 四、填空题 1. 氨基酸按侧链基团的性质可分为非极性氨基酸、不带电荷的极性氨基酸、带电荷的氨基酸。结构中含咪唑环的氨基酸组氨酸，三字母表示方法是His 。结构中含吲哚环的氨基酸色氨酸，三字母表示方法是Trp。 2. 在生理 pH 条件下，蛋白质分子中谷氨酸和天冬 氨酸残基的侧链几乎完全带负电，而赖氨酸、精氨酸或组氨酸残基侧链完全荷正电。 3. 当氨基酸溶液的 pHpI 时，氨基酸（主要）以两性离子形式存在；当 pHpI 时，氨基酸（主要）以阴离子形式存在；当 pHpI 时，氨基酸（主要）以阳离子形式存在。 4. 某种氨基酸-COOH pK2.4，-NH3 pK9.6，w-NH3 pK10.6，该种氨基酸的等电点（pI）是 10.1 。 5. 核酸变性时，260 nm 紫外吸收显著升高，称为变性，同时伴随 A260 增大，吸光度增幅中点所对应的温度叫做解链温度，用符号Tm表示，其值的大小与 DNA 中C-G 碱基对含量呈正相关。 6. tRNA 的二级结构呈三叶草型，三级结构呈倒L型，其 3末端有一共同碱基序列 CCA ，其功能是 结合氨基酸 。 7. 乳糖是由一分子_D-葡萄糖_和一分子_D-半乳糖_组成,它们之间通过_-1，4-糖苷键_相连。 8. 判断一个糖的 D-型和 L-型是以_离羰基碳最远的那个手性_碳原子上羟基的位置作依据。 9. 结合酶是由 酶蛋白 和 辅助因子 两部分组成。 10. 构成生物膜的三类膜脂是 磷脂 、 胆固醇 和 糖脂 。 11. 真核细胞生物氧化的主要场所是 线粒体 ，呼吸链和氧化磷酸化偶联因子都定位于 线粒体内膜上 。 12. 三羧酸循环有 4次脱氢反应， 3次受氢体为 NAD+，1次受氢体为FADH2 。 13. 在丙酮酸羧化酶 、 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、 果糖-1，6-二磷酸酶 和 葡萄糖-6-磷酸酶 4 种酶的参与情况下，糖酵解可以逆转。 14. 丙酮酸形成乙酰 CoA 是由 丙酮酸脱氢酶复合物 催化的，该酶是一个包括丙酮酸脱氢酶 、二氢硫辛酰转乙酰基酶和 二氢硫辛酰脱氢酶 的复合体。 15. 丙酮酸氧化脱羧形成 丙酮酸CoA ，然后和 草酰乙酸 结合才能进入三羧酸循环，形成的第一个产物 柠檬酸 。 16. 脂肪酸-氧化是在 线粒体基质中进行的，氧化时第一次脱氢的受氢体是 FAD ，第二次脱氢的受氢体 NAD+ 。 17. 硬脂酸（18C）完全氧化所生成的 ATP 分子数为_120。 18. 一分子 14 碳长链脂酰-CoA 可经 6次-氧化生成 7个乙酰-CoA, 7 个 NADH+H+，7个 FADH2 。 19. 下列符号的中文名称分别是：PRPP 核糖-5-磷酸 ；IMP 次黄嘌呤核苷酸 ；PEP 磷酸烯醇式丙酮酸 ； 20. 核糖核酸的合成途径有 从头合成途径 和 补救途径 。 21. 嘌呤环的 C4、C5 来自 甘氨酸，嘧啶环的 N1、C6 来自 天冬氨酸 。 22. 动植物中尿素生成是通 鸟氨酸 循环进行的，此循环每进行一周可产生一分子尿素，其尿素分子中的两个氨基分别来自于 氧化脱氨基产生的氨 和 天冬氨酸的氨基 。每合成一分子尿素需消耗 3 分子 ATP。 23. DNA 聚合酶 I 的催化功能有 5-3聚合、 3-5 外切、 5-3 外切 。 24. DNA 合成时,先由引物酶合成 RNA引物 ，再由 DNA聚合酶 在其 3端合成 DNA 链，然后由 DNA聚合酶 切除引物并填补空隙，最后由 DNA连接酶 连接成完整的链。 25. 真核生物细胞合成多肽的起始氨基酸为 甲硫氨酸，起始 tRNA 为 tRNA1 甲硫 。 26. 肽链延伸过程需要 进位 、 成肽 、 转位 三步循环往复，每循环一次肽链延长 一个氨基酸残基。 27. 原核生物核糖体为 70 S，其中大亚基为 50 S，小亚基为 30 S；而真核生物核糖体为 80 S，大亚基为 60S，小亚基为 40 S。 28. 乳糖操纵子的诱导物是 别乳糖 ，色氨酸操纵子的辅阻遏物是 色氨酸 。 五、问答题 1. 简述流动镶嵌模型的结构特点。是膜结构的一种假说模型。脂类物质分子的双层，形成了膜的基本结构的基本支架，而膜的蛋白质则和脂类层的内外表面结合，或者嵌入脂类层，或者贯穿脂类层而部分地露在膜的内外表面。磷脂和蛋白质都有一定的流动性，使膜结构处于不断变动状态。这一模型有两个结构特点：一是膜的流动性，膜蛋白和膜脂均可侧向移动；二是膜蛋白分布的不对称性，蛋白质有的镶嵌在膜的内或外表面，有的嵌入或横跨脂双分子层。2. 简述化学渗透假说。一种学说，主要论点是底物氧化期间建立的质子浓度梯度提供了驱动 ADP 和 Pi 形成 ATP 的能量3. 简述蛋白质测序的一般步骤。其中 N 端测序的经典方法是什么？蛋白质的一级结构测定或称序列分析常用的方法是Edman降解和重组DNA法。Edman降解是经典的化学方法，比较复杂。首先要纯化一定量的待测蛋白质，分别作分子量测定、氨基酸组成分析、N-末端分析、C-末端分析；要应用不同的化学试剂或特异的蛋白内切酶水解将蛋白质裂解成大小不同的肽段，测出它们的序列，对照不同水解制成的两套肽段，找出重叠片段，最后推断蛋白质的完整序列。重组DNA法是基于分子克隆的分子生物学方法，比较简单而高效，不必先纯化该种蛋白质，而是先要得到编码该种蛋白质的基因（DNA片段），测定DNA中核苷酸的序列，再按三个核苷酸编码一个氨基酸的原则推测蛋白质的完整序列。这两种方法可以相互印证和补充。 4. 简述维持蛋白质高级结构稳定的次级键。蛋白质的一级结构是由共价键形成的，如肽键和二硫键。而维持空间构象稳定的是非共价的次级键。如氢键、盐键、疏水键、范德华引力等。5. 简述肽基的结构特点。 6. 简述 DNA 复制过程。DNA复制是指DNA双链在细胞分裂以前的分裂间期进行的复制过程，复制的结果是一条双链变成两条一样的双链（如果复制过程正常的话），每条双链都与原来的双链一样。这个过程通过边解旋边复制和半保留复制机制得以顺利完成。DNA复制主要包括引发、延伸、终止三个阶段。7. 简述 螺旋的结构特征。 -螺旋是肽键平面通过-碳原子的相对旋转形成的一种紧密螺旋盘绕，是有周期的一种主链构象。其特点是： 螺旋每转一圈上升3.6个氨基酸残基，螺距约0.54nm（每个残基上升0.15nm，旋转100O）。 相邻的螺圈之间形成链内氢键，氢键的取向几乎与中心轴平行。典型-螺旋一对氢键O与N之间共有13个原子（3.613），前后间隔3个残基。螺旋的走向绝大部分是右手螺旋，残基侧链伸向外侧。R基团的大小、荷电状态及形状均对-螺旋的形成及稳定有影响。8. 描述 DNA 双螺旋结构模型。 二条反向平衡的多核苷酸链共同围绕中心轴盘旋而成的双螺旋结构，两链的碱基按碱基互补配对规律互补配对，并靠氢键维系。糖、磷酸在螺旋外侧、碱基在螺旋内侧。（1） 两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕，两条链均为右手螺旋。 （2） 嘌呤与嘧啶位于双螺旋的内侧，磷酸与核糖在外侧，彼此通过 3,5-磷酸二酯键相连接，形成 DNA 分子的骨架，碱基平面与纵轴垂直，糖环平面则与纵轴平行。多核苷酸链的方向取决于核苷酸间磷酸二酯键的走向，习惯上以 C3-C5为正向。两条链配对偏向一侧，形成一条大沟和一条小沟。 （3） 双螺旋的平均直径为 2nm，两个相邻的碱基对之间的高度，即碱基堆积距离为 0.34nm，两个核苷酸之间的夹角为 36，沿中心轴每旋转一周有 10 个核苷酸，每一转的高度（即螺距）为 3.4nm。 （4） 两条核苷酸依靠彼此碱基之间形成的氢键相联系而结合在一起。 （5） 碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制。但根据碱基配对原则，当一条多核苷酸链的序列彼此确定后，即可决定另一互补的序列。 解释生命活动：双螺旋 DNA 是储存遗传信息的分子，通过半保留复制，储存遗传信息，通过转录和翻译表达出生命活动所需信息（蛋白质和酶）。 9. 简述高等动植物脂肪酸的共性。 10. 简述尿素合成的特点。 （1）部位：肝脏线粒体和胞液。（2）机理：1932年，德国学者Krebs和Hensleit根据实验研究，提出了鸟氨酸循环（ornithine cycle）合成尿素的学说，这比三羧酸循环发现早5年。实验的根据是：将鼠肝切片置于胺盐和重碳酸盐介质中，有氧条件下保温数小时，发现胺盐含量减少，而尿素增多。当加入少量鸟氨酸、瓜氨酸或精氨酸能大大加速尿素的合成。肝脏又含有精氨酸酶，可催化精氨酸水解生成鸟氨酸和尿素。于是一个循环机制就出现。（3）反应过程：有5步反应，前2步在肝细胞线粒体，其他3步在胞质溶液中进行。尿素循环本身是四步酶促反应组成。氨甲酰磷酸合成酶（CPS-）激活氨结合CO2形成氨甲酰磷酸。鸟氨酸转氨甲酰酶催化氨甲酰磷酸转移到鸟氨酸上生成瓜氨酸。精氨琥珀酸合成酶催化瓜氨酸与天冬氨酸缩合生成精氨琥珀酸。这是尿素中第2个氮原子的来源。精氨琥珀酸酶催化精氨琥珀酸裂解为精氨酸和延胡索酸（后者可进入三羧酸循环，并转变为草酰乙酸，转氨后又形成天冬氨酸）。精氨酸酶水解精氨酸生成尿素，并重新产生鸟氨酸，进入第二轮循环。总反应式：NH3 + HCO3- +天冬氨酸 +3ATP CO( N H 2)2 + 延胡索酸 + 2ADP+2Pi+AMP+PPi尿素的合成是一个耗能的过程，循环中使用了4个高能磷酸键（3分子ATP水解为2ADP及Pi、一个AMP和PPi，后者随之水解为Pi）。尿素循环产生的延胡索酸可进入TCA，精氨酸与甘氨酸缩合形成瓜基乙酸，进而合成肌酸磷酸（肌肉中的一种高能仓库）。（4）调节：氨甲酰磷酸合成酶是变构酶，乙酰谷氨酸（AGA）是该酶的激活剂，而精氨酸又是AGA合成酶的激活剂，因此，精氨酸浓度增高时，尿素生成加速。精氨琥珀酸合成酶活性最低，是限速酶。11. 根据糖酵解的过程，回答如下问题：（反应物、产物写中文名即可，不要求结构式） 1.己糖激酶（hexokinase）催化葡萄糖生成G-6-P，消耗一分子ATP。己糖激酶（HK）分布较广，而葡萄糖激酶（GK）只存在于肝脏，这是第一个关键酶催化的耗能的限速反应。若从糖原开始，由磷酸化酶和脱支酶催化生成G-1-P，再经变位酶转成G-6-P。2.G-6-P异构酶催化G-6-P转化为F-6-P。3.磷酸果糖激酶（PFK-）催化F-6-P磷酸化生成F-1，6-DP，消耗一分子ATP。这是第二个关键酶催化的最主要的耗能的限速反应。4.醛缩酶裂解F-1，6-DP为磷酸二羟丙酮和甘油醛-3-磷酸。平衡有利于逆反应方向，但在生理条件下甘油醛-3-磷酸不断转化成丙酮酸，驱动反应向裂解方向进行。5.丙糖磷酸异构酶催化甘油醛-3-磷酸和磷酸二羟丙酮的相互转换。6.甘油醛-3-磷酸脱氢酶催化甘油醛-3-磷酸氧化为1，3 -二磷酸甘油酸。这是酵解中唯一的一步氧化反应，是由一个酶催化的脱氢和磷酸化两个相关反应。反应中一分子NAD+被还原成NADH，同时在 1，3-二磷酸甘油酸中形成一个高能酸酐键，为在下一步酵解反应中使ADP变成ATP。7.磷酸甘油酸激酶催化1，3-二磷酸甘油酸生成3-磷酸甘油酸。反应（6）和反应（7）联合作用，将一个醛氧化为一个羧酸的反应与ADP磷酸化生成ATP偶联。这种通过一高能化合物将磷酰基转移ADP形成ATP的过程称为底物水平磷酸化。底物水平磷酸化不需氧，是酵解中形成ATP的机制。8.磷酸甘油酸变位酶催化 3-磷酸甘油酸转化为2-磷酸甘油酸9.烯醇化酶催化2-磷酸甘油酸生成磷酸烯醇式丙酮酸（PFP）。PFP具有很高的磷酰基转移潜能，其磷酰基是以一种不稳定的烯醇式互变异构形式存在的。10.丙酮酸激酶催化PFP生成丙酮酸和ATP。这是第三个关键酶催化的限速反应。也是第二次底物水平磷酸化反应。丙酮酸是酵解中第一个不再被磷酸化的化合物。其去路：在大多数情况下，可通过氧化脱羧形成乙酰辅酶A进入柠檬酸循环；在某些环境条件（如肌肉剧烈收缩），乳酸脱氢酶可逆地将丙酮酸还原为乳酸；在酵母，厌氧条件下经丙酮酸脱羧酶和乙醇脱氢酶催化，丙酮酸转化成乙醇（酒精发酵）。1） 糖酵解包含几步反应？分成那两个阶段？ 10.葡萄糖转变成磷酸丙糖，甘油醛-3-磷酸转变成丙酮酸2） 糖酵解中消耗 ATP、产生 ATP 的反应包括哪些？ 消耗1，3 产生7，103） 糖酵解中哪一步反应脱氢？ 64） 糖酵解的限速酶是什么？ （1）葡萄糖在已糖激酶作用下生成葡萄糖-6-磷酸；（2）果糖-6-磷酸在磷酸果糖激酶作用下生成果糖-1，6-二磷酸；（3）磷酸烯醇式丙酮酸在丙酮酸激酶作用下生成丙酮酸。区别糖异生：（1）丙酮酸在丙酮酸羧化酶作用下生成草酰乙酸；（2）草酰乙酸在磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶作用下生成磷酸烯醇式丙酮酸；（3）果糖-1，6-二磷酸在果糖-1，6-二磷酸酶作用下水解成果糖-6-磷酸；（4）葡萄糖-6-磷酸在葡萄糖-6-磷酸酶作用下生成葡萄糖。12. 写出 TCA 循环的总反应式，统计 TCA 循环中： 三羧酸循环是由四个碳原子的草酰乙酸与二个碳原子的乙酰辅酶 A 缩合成具有三个羧基的柠檬酸开始，经过二次脱羧和四次氧化还原反应后又以草酰乙酸结束。由于循环中首先生成含有三个羧基的柠檬酸，故又称三羧酸循环或柠檬酸循环，简称 TCA 循环，为纪念德国科学家 Hans Krebs 在阐明三羧酸循环中所做出的突出贡献，三羧酸循环又称 Krebs 循环。TCA 的生理意义主要包括二个方面：（1）为机体提供大量能量。1 分子葡萄糖经酵解、 TCA 和呼吸链氧化后，可产生 38 分子 ATP。（2）TCA 是糖代谢、蛋白质代谢、脂肪代谢、核酸代谢以及次生物质代谢联络的枢纽，它的中间产物可参与其它代谢途径，其它代谢的产物最终可通过 TCA 循环氧化为 CO2 和 H2O，并释放出能量。1.柠檬酸合成酶催化乙酰CoA与草酰乙酸缩合成柠檬酸和CoASH。是第一个关键酶催化的限速反应。2.顺乌头酸酶催化柠檬酸异构成异柠檬酸。3.异柠檬酸在异柠檬酸脱氢酶的催化下生成草酰琥珀酸，再脱羧生成-酮戊二酸。此步是第一次氧化脱羧，异柠檬酸脱氢酶是第二个关键酶。4.- 酮戊二酸由- 酮戊二酸脱氢酶系催化氧化脱羧生成琥珀酰CoA。此酶系由3种酶和5种辅助因子组成，是第三个关键酶催化的第二次氧化脱羧。5.琥珀酰CoA在琥珀酰辅酶A合成酶催化下生成琥珀酸。这是循环中惟一的一次底物水平磷酸化，GDP磷酸化形成GTP。6.琥珀酸在琥珀酸脱氢酶催化下氧化为延胡索酸。这是第三步脱氢，生成FADH2。7.延胡索酸在延胡索酸酶作用下水化形成苹果酸。8.苹果酸在苹果酸脱氢酶催化下氧化为草酰乙酸。这是第四步脱氢，生成NADH+H+1） 共发生几次脱羧？生成的 CO2 中的 C 来源于哪种物质？ 2，原初的草酰乙酸部分2） 共发生几次脱氢，氢和电子受体分别是什么？ 43） 共发生几次底物水平磷酸化，写出反应式。（反应物、产物写中文名即可，不要求结构式）1 ，琥珀酰CoA在琥珀酰辅酶A合成酶催化下生成琥珀酸4）1 分子的乙酰 CoA 经 TCA 循环与氧化磷酸化后可产生多少 ATP? 2.53+1.5+113. 一个酶的分离纯化分为 4 步： 步骤 总活力（U） 总蛋白质（mg） 1 6 20 2 4 10 3 3 5 4 2 2 请计算出每个纯化步骤的比活力、纯化倍数和回收率。 14. 说明链终止法进行 DNA 测序的原理。 核酸模板在核酸聚合酶、引物、四种单脱氧碱基存在条件下复制，如果在四管反应系统中分别按比例引入四种双脱氧碱基，只要双脱氧碱基掺入链端，该链就停止延长，链端掺入单脱氧碱基的片段可继续延长。如此每管反应体系中便合成以共同引物为 5端，以双脱氧碱基为 3端的一系列长度不等的核酸片段，反应终止后，分四个泳道进行电泳。以分离长短不一的核酸片段（长度相邻者仅差一个碱基），根据片段 3端的双脱氧碱基，便可依次阅读合成片段的碱基排列顺序。 15. 描述原核生物蛋白质的生物合成过程。 蛋白质生物合成全过程可以分为起始、延长和终止三个阶段。 1） 起始阶段：核糖体 50S 和 30S 大小两类亚基，mRNA，起始作用的 fMet-tRNAfMet，GTP 供能，在 3 种起始因子(IF1、IF2、IF3)的蛋白因子等的参与下，形成 70S 起始复合物。 2） 延长阶段：在转肽酶作用下延长肽链。此阶段还需 Mg2+ 参与及消耗 GTP 供能，并且包括进位、成肽和转位三个步骤的反复循环。进位是指特定的氨基酰 tRNA 进入核糖体 A 位，成肽是转肽酶催化 P 位的氨基酰转移到 A 位形成肽键的过程，转位是指在 EF-G 和 GTP 作用下，核糖体向 mRNA 3端方向移动一个密码子距离。 3） 终止阶段：当终止密码子 UAA、UAG 或 UGA 出现在核糖体的 A 位时，没有相应的氨基酰 tRNA 能与之结合，此时即转入了终止阶段。释放因子(RF)进入核糖体 A 位与终止密码子相结合，RF 随即诱导16. 什么是磷酸戊糖途径？有何生物学意义？ 是指从 6-磷酸葡萄糖开始,经过氧化脱羧、糖磷酸酯间的互变，最后形成 6-磷酸果糖和 3-磷酸甘油醛的过程。其生物学意义为：产生生物体重要的还原剂NADPH；供出三到七碳糖等中间产物，以被核酸合成、糖酵解、次生物质代谢所利用；在一定条件下可氧化供能。 17. 描述蛋白质凝胶层析与离子交换层析的原理。 凝胶层析原理：当含有各种组分的样品流经凝胶层析柱时，大分子物质由于分子直径大，不易进入凝胶颗粒的微孔，沿凝胶颗粒的间隙以较快的速度流过凝胶柱。而小分子物质能够进入凝胶颗粒的微孔中，向下移动的速度较慢，（分子筛效应）从而使样品中各组分按相对分子质量从大到小的顺序先后流出层析柱，而达到分离的目的。 离子交换层析原理：电荷不同的物质，对管柱上的离子交换剂有不同的亲和力，改变冲洗液的离子强度和 pH 值，物质就能依次从层析柱中分离出来。蛋白质具有两性解离性质，则分子上的净电荷取决于氨基酸的等电点和溶液的 pH 值。pHpI 时，蛋白质带净负电荷，且 pI 越小，带负电荷越多，与阴离子交换柱的结合力越强。pHpI 时，蛋白质带净正电荷，且 pI 越大，带正电荷越多，与阳离子交换柱的结合力越强。