高考生物二轮复习 第八单元 生物技术实践 专题一 微生物的培养、应用及传统发酵技术

第八单元 生物技术实践 专题一 微生物的培养、应用及传统发酵技术(时间：40分钟满分：60分)B级必测1(2016南通、扬州、泰州二模)下列关于“腐乳的制作”叙述错误的是()A制作腐乳时毛霉等多种微生物共同发挥作用B毛霉生长的最适温度为3035C后期发酵时间长短与盐用量、卤汤成分等有关D封瓶时最好将瓶口通过酒精灯的火焰解析腐乳的制作原理：起主要作用的是真菌中的毛霉，还有其他微生物，A正确；毛霉生长的适宜温度为1518，B错误；后期发酵时间长短与盐用量、卤汤成分等有关，C正确；为防止杂菌污染，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，D正确。答案B2(2016苏锡常镇二模)下图表示利用苹果制备果酒、果醋的流程图。下列有关叙述错误的是()A过程接种人工培育的酵母菌可以提高苹果酒的品质B苹果醋可以为过程提供所需菌种C过程所需的最适温度低于过程D整个发酵过程都必须在严格无菌条件下才能正常进行解析过程接种人工培育的酵母菌可以减少杂菌污染的机会，提高苹果酒的品质，A正确；苹果原醋中含有醋酸菌，可以为过程提供所需的菌种，B正确；过程为果酒发酵，适宜的温度为1825，过程为果醋发酵，适宜的温度为3035，C正确；果酒的发酵不需要严格灭菌，D错误。答案D3(2016南通三模)下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是()A应根据微生物代谢类型选择合适培养基并控制好培养基pHB实验操作时应避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触C待培养基冷却至室温后，在酒精灯火焰附近倒平板D使用过的培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃解析培养基冷却到50左右才能倒平板，C错误。答案C4(2016盐城三模)下列有关微生物培养的叙述，错误的是()A培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌B各种微生物培养基的配方中必须包含碳源、氮源、水、无机盐及琼脂等成分C纯化培养微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法D以尿素为唯一氮源的培养基可以选择培养分解尿素的微生物解析培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌，A正确；琼脂是配制固体培养基时常用的凝固剂，液体培养基中不需添加琼脂，B错误；纯化培养微生物常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，C正确；绝大多数微生物不能利用尿素作氮源，但分解尿素的微生物可以分解尿素作氮源，所以，利用以尿素作唯一氮源的培养基可以选择培养分解尿素的微生物，D正确。答案B5(2016南通、扬州、泰州二模)在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种(甲)、培养结果(乙)如下图。有关叙述错误的是()A接种前应对培养基进行髙压蒸汽灭菌B连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落C接种过程中至少需要对接种环灼烧5次D甲中a区域为划线的起始位置解析培养基一般用高压蒸汽灭菌，A正确；菌液经过连续划线，菌液中的菌体越来越少，最后容易形成单菌落，B正确；在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，因此按照图中划线顺序(dcba)，整个划线过程中需要对接种环进行灼烧的次数为5次，C正确；每次划线的菌种来自上一区域的末端，因此划线的起始区域菌落更多，由图乙可知，d区域菌落多，为起始位置，D错误。答案D6(2015南通市一模)下列关于实验室制作果酒、果醋、腐乳的叙述，错误的是()A果酒制作过程中，不能对葡萄进行消毒处理，以保存野生菌种B果醋发酵温度较高，且发酵过程要特别注意氧气供应C腐乳制作过程中，添加料酒、香辛料和盐等，均可以抑制杂菌生长D果酒、果醋、腐乳制作的主要菌种都是有氧呼吸型真核生物解析传统发酵技术使用的是野生型酵母菌，主要附着在葡萄皮上，A正确；醋酸菌发酵的最适温度在3035，属于需氧型微生物，B正确；腐乳制作过程最大问题是控制杂菌生长，前期发酵用盐，后期发酵用料酒及香辛料，既改变风味，又可抑制杂菌繁殖，C正确；果酒、腐乳制作都使用真菌，果醋发酵用的是细菌，D错误。答案D7(2016常州期末)关于“果酒、果醋的制作”实验，下列叙述错误的是()A一般含糖量较高的水果可用来制作果酒B适当加大接种量可以提高发酵速度，抑制杂菌生长繁殖C醋酸菌是嗜温菌，所以果醋发酵所需的最适温度较高D先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵解析果酒是水果本身的糖分被酵母菌发酵成为酒精的酒，含有水果的风味与酒精，在制作果酒时，一般选择含糖量较高的水果，A正确；适当加大接种量可以提高发酵速度，抑制杂菌生长繁殖，B正确；醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为3035，所以果醋发酵所需的最适温度较高，C正确；果酒的制作的原理是酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵产生酒精，制作果醋的菌种是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧菌，在氧气充足的条件下才能进行旺盛的生命活动，所以在果酒、果醋的制作过程中，先隔绝空气进行果酒发酵，然后供氧进行果醋发酵，D错误。答案D8(2016南京六校联考)下列有关微生物实验室培养的叙述，正确的是(多选)()A在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生焦糊B灼烧、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等都属于无菌技术C样品中活菌数量统计时，接种方法应采用划线法D用平板培养基培养微生物时，应将平板倒过来放置解析琼脂属于多糖，在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生焦糊，A正确；灭菌和消毒都属于无菌技术，常用的灭菌方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌，静止的空气常用紫外线照射等都属于无菌技术，B正确；样品中活菌数量统计时，接种方法应采用稀释涂布平板法，C错误；用平板培养基培养微生物时，为防止水蒸气凝集滴入培养基造成干扰或污染，应将平板倒过来放置培养，D正确。答案ABD9(2015宿迁市下学期质检卷)常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖，自然界中一些酵母菌能分解木糖产生酒精但对酒精的耐受能力较差。下面是利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母培育的过程，请分析回答下列问题：(1)将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用_将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，瓶中液体经适当稀释后，接种于_培养基上，适宜条件下培养，获得各种菌落。(2)将培养基上的酵母菌菌株转接到以木糖作为唯一碳源的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌_。从存活的酵母菌提取DNA，并用PCR技术大量扩增目的基因。(3)将目的基因连接到一种穿梭质粒(可以在大肠杆菌中复制和在酿酒酵母中表达的质粒)上。该质粒具有两种标记基因，即氨苄青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。大肠杆菌被该质粒转化后，应接种于含_的培养基上进行筛选。将质粒导入酵母菌时，由于氨苄青霉素不能抑制酵母菌繁殖，应选择缺乏_能力的酿酒酵母作为受体菌。(4)对转基因酿酒酵母发酵能力进行测试，结果如下图所示。据图分析，将转基因酿酒酵母接种在_为碳源的培养基中进行发酵能力测试，最初培养基中的_被快速消耗，随着发酵继续进行，酿酒酵母能够_，说明所需菌株培育成功。解析(1)将自然界中采集到的葡萄带回实验室，必须使用无菌水将葡萄皮上的野生酵母菌冲洗到无菌的三角瓶中，防止水中杂菌污染；常用的微生物分离方法有平板划线法和稀释涂布平板法，采用的培养基必须是固体培养基，才能分离出单个菌落。(2)以木糖为唯一碳源的培养基是选择培养基，可以筛选出能利用木糖的酵母菌，不能在该培养基上生存的酵母菌缺乏木糖发酵途径。(3)转入重组质粒的大肠杆菌对氨苄青霉素有抗性，故可以培养在含有氨苄青霉素的培养基上进行筛选，可以筛选出含有目的基因的受体菌；以缺乏尿嘧啶合成酶的酵母菌作为受体细胞，可以利用缺乏尿嘧啶的培养基筛选出导入质粒的酵母菌菌株。(4)分析题图，图示实验结果表明，葡萄糖和木糖为该培养基的碳源；最初培养基中的葡萄糖被快速消耗，随着发酵继续进行，转基因酿酒酵母能够利用木糖产生酒精，并且酒精浓度升高对木糖发酵无明显影响，说明所需菌株培育成功。答案(1)无菌水固体(2)不能利用木糖发酵(或缺乏木糖发酵途径)(3)氨苄青霉素尿嘧啶合成(4)葡萄糖和木糖葡萄糖利用木糖产生酒精，并且酒精浓度升高对木糖发酵无明显影响10(2016苏锡常镇二模)柴油是重要的燃料油之一，也因泄露与不当排放等造成了严重的环境污染。科研人员从遭受柴油污染的土壤样品中取土样5g，加入含100mL培养基M的锥形瓶中，在30条件下震荡培养5天，取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基，按此步骤连续培养5次，分离获得醋酸钙不动杆菌DB(一种柴油降解菌)。利用该菌，科研人员进一步探索其降解柴油的最佳条件，获得实验结果如下图。请回答下列问题：(1)为获得醋酸钙不动杆菌DB，培养基M应以_为唯一碳源，还要考虑无机盐的_和比例。(2)在实验过程中，科研人员“30条件下震荡培养5天，取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基，按此步骤，连续培养5次”的主要目的是_。(3)在分离醋酸钙不动杆菌DB操作时，在严格无菌条件下，采用_(填接种方法)在制备好的牛肉膏蛋白胨培养基上进行接种，接种完，对接种环进行_灭菌处理。培养一段时间后，观察、挑取平板上形态、颜色、大小和隆起度等一致的_进行重复培养，直到分离出单一菌株。(4)据图分析，若某地区土壤发生柴油重度污染时，则可以将_，并添加浓度为_的表面活性剂，以有利于提高对柴油的降解效果。解析(1)为了从被污染土壤样品中分离得到能分解柴油的醋酸钙不动杆菌DB，应选用以柴油为唯一碳源的培养基培养土壤样品中的微生物，同时还要考虑培养基中无机盐的种类和比例。(2)利用以柴油为唯一碳源的培养基连续培养分离到的醋酸钙不动杆菌DB，目的是使醋酸钙不动杆菌DB的数量增加。(3)利用接种环进行微生物接种的方法是平板划线法。接种结束后必须通过灼烧灭菌法对接种环严格灭菌，以防止残留在接种环上的微生物污染环境。由单个细菌细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群体叫菌落。(4)分析图1、图2实验结果可知，当柴油浓度为4000 mg/kg左右、表面活性剂浓度为6 mg/g左右时，醋酸钙不动杆菌DB对柴油的降解效率高，故应对被柴油重度污染的土壤进行稀释，使柴油浓度降低至4000 mg/kg左右，同时添加浓度为6 mg/g左右的表面活性剂，以提高对柴油的降解效果。答案(1)柴油种类(2)使醋酸钙不动杆菌DB的数量增加(或“使柴油分解菌富集”)(3)平板划线法灼烧菌落(4)被柴油重度污染的土壤进行稀释，使柴油浓度降低至4000 mg/kg左右6 mg/gA级自悟11(2016南通一模)下列有关果酒、果醋和腐乳制作实验的叙述，错误的是()A通过控制发酵温度，可抑制其他微生物的生长繁殖B都是利用微生物胞内酶催化获得最终产品C果酒、果醋发酵的培养基呈液态而腐乳发酵培养基呈固态D都可以通过人工接种菌种提高产品质量解析果酒、果醋和腐乳制作的温度是不一样的，果酒和果醋是利用的胞内酶，而腐乳主要是利用的毛霉的胞外酶，果酒和果醋是液体培养基而腐乳是固态的，一般工业上是采用人工接种优良菌株而提高新产品质量的。评讲时要着重复习果酒、果醋和腐乳的联系和区别。答案B12(2016南京、盐城二模)图示装置可用于生物技术实践的相关实验。下列有关叙述正确的是()A制作果酒、果醋或腐乳时，所需控制的温度都是相同的B两种装置都可以先用于果酒的制作，后用于果醋的制作C用装置甲制作腐乳时，自下而上随着豆腐块加高逐渐减少用盐量D装置乙中b为排气品，c为充气口，可防止空气中微生物的污染解析果酒发酵的适宜温度应控制在1825，醋酸发酵的适宜温度应控制在3035，制作腐乳的环境温度应控制在1518，A错误；制作果酒时选用的菌种为酵母菌，其原理是利用酵母菌无氧呼吸产生酒精，制作果醋时的菌种为醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，在氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌可以先将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，因此两种装置都可以先用于果酒的制作，后用于果醋的制作，B正确；利用甲装置进行腐乳制作时，自下而上随着豆腐块加高逐渐增加用盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些，C错误；装置乙中b为充气口，c为排气口，可防止空气中微生物的污染，D错误。答案B13(2016南京三模)苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物，某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，为土壤样品。下列相关叙述错误的是()A使用平板划线法可以在上获得单个菌落B如果要测定中的活细菌数量，常采用稀释涂布平板法C图中培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源D微生物培养前，需对培养基和培养皿进行消毒处理解析使用平板划线法可以在固体培养基上得到单个菌落，A正确；利用稀释涂布平板法可以对培养基上的菌落进行计数，进而进一步推算出样品中的活菌数量，B正确；因为绝大多数细菌都不能以苯酚作碳源，所以利用以苯酚为唯一碳源的培养基可以筛选出能降解利用苯酚的细菌菌株，C正确；微生物培养前，需对培养基和培养器皿进行严格的灭菌处理，D错误。答案D14(2015扬州中学质量检测)下图表示运用影印培养法(使在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测重组质粒是否导入大肠杆菌。下列相关叙述正确的是(多选)()A导入大肠杆菌的重组质粒中有特殊的标记基因B影印培养法使用的是固体培养基进行微生物培养C培养基A和B提供有利于目的菌株生长的营养、pHD培养基B中含有的特殊成分能抑制其他微生物生长解析导入大肠杆菌的重组质粒中有特殊的标记基因，作为检测的依据，A正确；影印培养法使用的是固体培养基，B正确；培养基A和B提供有利于目的菌株生长的营养、pH，B中菌株减少是因为培养基中有抑制其他微生物的物质，所以C、D都正确。答案ABCD15(2016南通一模)土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验：菌株透明圈直径(D)菌落直径(d)D/dM30118.812.31.5B35620.78.02.6T14019.16.51.4实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈(如上图)，透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解磷的能力大小。实验步骤：步骤1取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72h。步骤2在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养34d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株(如上表)。分析回答：(1)从物理形态看，培养基A属于_培养基。培养基中磷源应该是_。(2)步骤1中接种方法是_，步骤2中接种环的灭菌方法是_。(3)根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是_。(4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37、200rmin1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到上图所示曲线。用摇床进行培养的好处是_。结果表明最优良的解磷菌株是_。解析(1)菌落必须在固体培养基上才能形成(培养过程中菌体不能运动)；要筛选难溶性磷能力强的菌株，必须以难溶性磷酸盐作为唯一磷源。(2)步骤1的目的是从土壤微生物中筛选解磷微生物，由于土壤样液中微生物种类和数量多，因此最好采用稀释涂布平板法进行接种(如果用平板划线法，则有可能不能将全部种类的微生物进行接种，当然本题步骤1中“取稀释液1mL接种”也暗示接种方法是稀释涂布平板法)。(3)接种环灭菌方法是灼烧，涂布器的灭菌方法是先将涂布器浸入酒精中，再将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。(4)根据实验原理中“透明圈直径与菌落直径比代表微生物溶解磷的能力大小”，结合表格数据可以确定解磷能力最强的菌株是B356。(5)摇床培养是实验室培养需氧微生物的常用方法，使用摇床培养，不仅可以增大培养液中溶氧量，促进微生物的有氧呼吸，而且能够增加菌体与培养液的接触，提高营养物质的利用率。(6)根据实验曲线图，不难看出M301实际溶解磷能力最强。答案(1)固体难溶性磷酸盐(2)稀释涂布平板法灼烧(3)B356(4)增加培养液中的溶氧量；使菌株与培养液充分接触，有利于物质的交换M301