药理实验

实验一 常用动物的捉拿与给药方法【实验目的】1、了解小鼠的饲养方法2、练习并掌握小鼠的捉拿与给药方法【实验材料】1、 器材：鼠笼、饮水瓶、大烧杯、托盘天平、灌胃器、注射器、棉签2、 药品：生理盐水、苦味酸溶液、75%酒精3、 动物：小白鼠，2030g【实验方法】1、 捉拿与固定：用右手捉住鼠尾，将其提起置于鼠笼或者粗糙平面上，向后轻拉鼠尾，用左手的拇指和食指抓住小鼠两耳及颈背部皮肤，将小鼠置于左手掌心，以小指夹住小鼠尾巴即可。2、 给药法 灌胃：将小鼠固定，口朝上，颈部拉直，右手持灌胃针，先从口角处插入口腔，再沿上颚轻轻插入食管。一般给药剂量0.1-0.3ml/10g。 腹腔注射：将小鼠固定，右手持注射器自下腹部一侧刺入皮下后，再刺入腹腔，缓慢注入药物。一般给药剂量0.1-0.3ml/10g。 皮下注射：两人合作，一人左手抓住小鼠头部，右手拉住小鼠尾巴固定小鼠，另外一人用左手提起皮肤，右手持注射器刺入皮下注入药物。一般给药剂量为0.1-0.2ml/10g 肌肉注射：最好两人合作，一人固定小鼠，另外一人将针头迅速垂直刺入后肢外侧肌肉，回抽无回血即可注入药物，一侧给药剂量为0.02-0.05ml/10g。 静脉注射：一般采用尾静脉注射。将小鼠固定，使尾巴露出来，在50热水中浸泡或者用75%酒精擦拭尾巴，使血管扩张，左手拉住鼠尾，右手持注射器，从鼠尾巴末梢开始进针，注入药液。一般给药剂量为0.1-0.2ml/10g【心得体会】实验二 不同给药途径对药物作用的影响【实验目的】观察不同给药途径对药物作用的影响【实验材料】4、 器材：大烧杯、托盘天平、灌胃器、注射器、棉签少许5、 药品：10%硫酸镁溶液、5%氯化钙溶液、苦味酸溶液6、 动物：小鼠，1822g【实验方法】1、 取小鼠3只，称重编号，分别放入大烧杯中，观察小鼠的正常活动，记录半个小时内活动、呼吸、粪便情况。2、给药：一号小鼠灌胃10%硫酸镁溶液0.2ml/10g二号小鼠肌肉注射10%硫酸镁溶液0.2ml/10g三号小鼠静脉注射10%硫酸镁溶液0.2ml/10g3、观察小鼠的反应及活动，记录半小时内小鼠活动、呼吸及粪便变化。4、当第三只小鼠出现垂头，俯卧时，立即静脉缓慢注射5%氯化钙溶液0.4-0.8ml，直至恢复站立。5、 比较分析【实验结果】不同给药途径对小鼠的作用鼠号体重给药前情况给药途径药物及剂量用药后反应123【实验结论】【实验讨论】实验三 药物对肠蠕动的影响 【实验目的】通过测定墨汁在胃肠道内的移动距离，观察硫酸镁、阿托品、新斯的明等药物对小鼠肠蠕动的影响，掌握相关药物的药理作用和临床应用。【实验材料】1、器材：大烧杯、托盘天平、灌胃器、注射器、剪刀，眼科镊子，钢尺，棉球2、药品：20%硫酸镁溶液、0.03%甲基硫酸新斯的明溶液、0.02%硫酸阿托品溶液、生理盐水，以上药液每100ml加墨汁2ml。3、动物：小鼠，1822g【实验方法】1、选取体重相近小鼠4只，称重编号，禁食12小时，2、给药：一号鼠灌胃20%硫酸镁溶液0.2ml/10g二号鼠灌胃0.03%甲基硫酸新斯的明溶液0.2ml/10g三号鼠灌胃0.02%硫酸镁溶液0.2ml/10g四号鼠灌胃生理盐水溶液0.2ml/10g记录给药时间3、观察肠蠕动情况。给药40分钟后，采用颈椎脱臼法处死小鼠，立即打开腹腔，先观察肠蠕动3分钟，然后将小肠从幽门至回盲部全段剪下，剔除肠系膜，将肠管拉成直线，放在实验台上，测量小肠的总长度及肠道内墨汁向前移动的最远距离，计算墨汁推进百分率。 墨汁移动距离（cm）墨汁推进百分率= - 100% 小肠总长度（cm）【实验结果】药物对小鼠肠蠕动的影响鼠号体重药物及剂量给药时间墨汁移动距离小肠总长度墨汁推进率实验四 药物的抗惊厥作用、局麻药的毒性比较【实验目的】1、观察中枢神经系统兴奋药尼可刹米中毒发生惊厥的特点及地西泮的抗惊厥作用2、观察普鲁卡因和利多卡因对小鼠全身作用结果，判断两药毒性的大小【实验材料】1、器材：大烧杯、托盘天平、注射器、棉签少许2、药品：2.5%尼可刹米溶液、0.5%地西泮溶液、生理盐水、1%盐酸普鲁卡因、1%盐酸丁卡因、苦味酸溶液3、动物：小鼠，1822g【实验方法】一、药物抗惊厥作用1、取小鼠2只，称重编号，计算给药量，至于烧杯中观察小鼠的正常活动。2、两鼠均腹腔注射2.5%尼可刹米溶液0.2ml/10g，观察其反应，待出现惊厥抽搐后，一只小鼠立即腹腔注射0.5%地西泮溶液0.05ml/10g，另外一只腹腔注射生理盐水0.05ml/10g.观察记录给药后的反应。二、局麻药毒性比较1、取小鼠2只，称重编号，分别放入大烧杯中，观察小鼠的正常活动2、分别给药： 一号小鼠腹腔注射1%盐酸普鲁卡因0.1ml/20g二号小鼠腹腔注射1%盐酸丁卡因0.1ml/20g观察小鼠用药前后的反应及活动，做详细记录【实验结果】一、药物的抗惊厥作用鼠号体重给药前情况用药后的反应救治药物剂量给药后的反应二、局麻药的毒性比较鼠号体重药物用药后的反应毒性大小【实验结论】【实验讨论】实验五 硝酸甘油的扩血管作用、普萘洛尔的抗缺氧作用【实验目的】1、 观察硝酸甘油对兔血管的舒张作用2、 观察普萘洛尔提高动物对缺氧耐受力的作用，了解用小鼠进行耐缺氧的实验方法【实验材料】1、器材：大烧杯、广口瓶、托盘天平、兔固定器、滴管、秒表2、药品：1%硝酸甘油乙醇溶液、0.1%盐酸普萘洛尔溶液、0.1%硫酸异丙肾上腺素溶液、钠石灰，凡士林。3、动物：家兔、小鼠【实验方法】一、硝酸甘油的扩血管作用1、取家兔1只，放入兔固定器中，在强光的透照下观察正常兔耳血管的粗细和密度，并用手捂着兔耳，感测其温度。2、用滴管吸取1%硝酸甘油乙醇溶液，滴于家兔舌下4-5滴3、观察给药后兔耳血管粗细、密度和温度的变化二、普萘洛尔的抗缺氧作用1、取小鼠3只，称重编号2、给药：一号鼠腹腔注射0.1%普萘洛尔溶液0.2ml/10g二号鼠腹腔注射0.1%异丙肾上腺素溶液0.2ml/10g三号鼠腹腔注射生理盐水0.2ml/10g3、 给药15分钟后，将小鼠置于装有20g钠石灰的250ml广口瓶中，瓶口涂适量凡士林后加盖密闭，并记录封盖时间。以呼吸停止为死亡指标，观察并记录小鼠活动变化及存活时间。【实验结果】 将实验结果记录下来，综合全班各组实验结果，计算存活时间延长百分率。 给药组平均存活时间-对照组平均存活时间存活时间延长百分率= - 100% 对照组平均存活时间实验六 呋塞米对家兔的利尿作用【实验目的】观察呋塞米对水电解质排泄的影响【实验材料】1、器材：烧杯、量筒、注射器、婴儿秤、兔手术台、10号导尿管、兔灌胃器、2、药品：25%乌拉坦、1%呋塞米注射液、50%葡萄糖溶液3、动物：雄性家兔，2kg以上【实验方法】1、 水负荷 取雄性家兔2只，称重编号，分别用胃灌胃器灌入温水40ml/kg2、 麻醉 0.5小时后，耳缘静脉缓慢注入25%乌拉坦4ml/kg，随时观察角膜反射，反射消失即停止注射3、 插入导尿管 背部固定家兔，将10号导尿管尖端用液状石蜡润滑后自尿道轻而慢地插入，待导尿管通过膀胱括约肌进入膀胱后，即有尿液滴出，然后再插入2cm，用胶布将导尿管与兔体固定4、 收集给药前尿样 轻轻按压兔下腹部将膀胱内尿液挤出，将最初5分钟内的尿液弃去，待滴速稳定后，在导尿管下接一量筒，收集20分钟内滴出的尿液，作为给药前的对照值5、 收集给药后尿样 甲兔耳缘静脉注射50%葡萄糖5ml/kg，乙兔耳缘静脉注射1%呋塞米0.4ml/kg，并分别收集注射药物后20分钟内的尿量，同给药前比较。【实验结果】兔号体重给药前尿量药物及剂量给药后的尿量实验七 阿司匹林及糖皮质激素抗炎作用比较【实验目的】1、 观察阿司匹林的抗炎作用2、 观察糖皮质激素对毛细血管通透性的影响【实验材料】1、 器材：大烧杯、托盘天平、灌胃器、打孔器、注射器、电子秤2、 药品：阿司匹林溶液、0.9%氯化钠溶液、二甲苯、5%氢化可的松注射液、1%伊文思蓝溶液、生理盐水3、 动物：小鼠，2530g【实验方法】一、阿司匹林抗炎作用1、取小鼠2只，称重编号2、两只小鼠分别灌胃阿司匹林溶液和氯化钠溶液，连续两天给药3、第三天，用二甲苯0.050.1ml涂抹于左耳前后两面，半小时后再给药4、2小时后将动物颈椎脱臼处死，在每只小鼠左右两耳相同部位分别用打孔器取一耳片，称重，每只小鼠的左耳重量减去右耳重量即为肿胀程度5、 将全组数据进行分析比较二、糖皮质激素对毛细血管通透性影响1、取小鼠两只，称重编号2、一号鼠皮下注射0.5%氢化可的松溶液0.1ml/10g 二号鼠皮下注射生理盐水0.1ml/10g3、给药10分钟后分别给两鼠腹腔注射1%的伊文思蓝溶液0.15ml/10g4、 10分钟后分别在两只小鼠的耳朵上滴2滴二甲苯，观察两鼠耳廓颜色变化【实验结果】一、阿司匹林抗炎作用鼠号体重药物剂量 左耳重量 右耳重量 肿胀度二、糖皮质激素对毛细血管通透性的影响鼠号体重药物剂量 10分钟后 20分钟后 耳廓颜色实验八 胰岛素过量反应及其解救【实验目的】观察胰岛素过量引起的低血糖反应及葡萄糖的解救作用【实验材料】1、器材：大烧杯2个、托盘天平1台、1ml注射器2支、棉签少许2、药品：5U/ml胰岛素注射液、25%葡萄糖注射液3、动物：小鼠，1822g【实验方法】1、取禁食24h的小鼠2只，称重编号，分别放入大烧杯中，放入37-38恒温水浴锅中，观察并记录小白鼠的正常活动2、 两只小鼠分别腹腔注射胰岛素5U/10g。分别放入大烧杯中，放入37-38恒温水浴锅中，盖上板子，观察并记录小白鼠的活动3、 当小鼠出现惊厥时候，迅速取出，一号小鼠腹腔注射25%葡萄糖0.5-1ml二号小鼠腹腔注射等量生理盐水观察小鼠的反应及活动，做详细记录4、 比较分析【实验结果】药物的不同理化性质对药物作用的影响鼠号体重药物用药前的反应药物给药后的反应思考题1、 为什么实验前小鼠要禁食？2、 为什么在37恒温水浴锅中进行实验？实验九 原代细胞及传代细胞培养技术【实验目的】1、 学习、了解原代细胞的培养技术2、 学习、了解传代细胞的培养技术【实验材料】1、器材：各种试剂瓶、各种型号移液枪和枪头、微孔滤膜及滤器、封口膜、培养瓶、EP管、冻存管（所有器材均需消毒灭菌）2、药品：培养基、胰酶、PBS溶液、小牛血清、谷氨酰胺、碳酸氢钠、青链霉素（所有药品均需消毒灭菌）3、动物：小鼠，1822g【实验方法】1、 取小鼠颈椎脱臼处死，迅速放到75%酒精消毒2-3秒，无菌条件下解剖，取肝脏。2、 剪碎肝脏，加入胰酶充分消化3、 过滤，滤液加入到培养瓶中，加入培养基培养8