实验-影响酶促反应速度的因素

实验 影响酶促反应速度的因素1、 实验目的通过本实验了解温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。2、 实验原理 唾液淀粉酶催化淀粉水解生成各种糊精和麦芽糖。淀粉溶液与碘反应呈蓝色；糊精根据分子大小，与碘反应分别呈蓝、紫、红、无色等不同的颜色；麦芽糖不与碘呈色。唾液淀粉酶的活性受温度、酸碱度、抑制剂与激活剂等的影响。温度：温度降低，酶促反应减弱或停止；温度升高，反应速度加快。当上升至某一温度时，酶促反应速度达最大值，此温度称为酶的最适温度。由于酶的化学本质是蛋白质，温度过高会导致蛋白质构象的改变，因此如果温度继续升高，反应速度反而会迅速下降甚至完全丧失。酸碱度：唾液淀粉酶最适pH为pH6.9，高于或低于酶的最适pH值，都将引起酶活性的降低，过酸或过碱的反应条件可使酶活性丧失。抑制剂与激活剂：酶的活性常受某些物质的影响，能增加酶的活性称为酶的激活剂：降低酶活性且不使酶蛋白变性的称为酶的抑制剂。如Cl-为唾液淀粉酶的激活剂，Cu2+为唾液淀粉酶的抑制剂。根据上述性质，可以用碘检查淀粉是否水解及其水解程度，间接判断唾液淀粉酶是否存在及其活性大小。三、试剂及器材1.试剂：1淀粉溶液，1氯化钠溶液，1硫酸铜溶液，1硫酸钠溶液，碘液，磷酸氢二钠（0.2mmol/L）, 柠檬酸溶液(0.1mmol/L)。2.器材：试管，试管夹，恒温水浴锅(37),吸管，滴管，试管架。四、实验操作：1.收集唾液：实验者先将痰咳尽, 用自来水漱口, 清除口腔内食物残渣, 再含蒸馏水约15 mL, 作咀嚼咕漱运动, 3min后吐入小烧杯中备用。2.观察温度对酶促反应速度的影响 取试管3支，编号1,2,3，按下表操作：试剂(ml)123唾液1111%淀粉222水浴5min100（冷却）370碘液1滴（冷却）1滴1滴现象3. 观察pH对酶促反应速度的影响（1）配制一系列pH不等的缓冲液。试剂(ml)1230.2mmol/L磷酸氢二钠5.157.729.720.1mmol/L柠檬酸4.852.280.28pH5.006.808.00（2）取试管3支，编号1,2,3，按下表操作：试剂(ml)123唾液222缓冲液3（pH5.00）3（pH6.80）3（pH8.00）1%淀粉22237水浴10min碘液1滴1滴1滴现象4观察激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响 取试管4支，编号1,2,3,4，按下表操作：试剂 滴12341%淀粉20202020唾液10101010蒸馏水61氯化钠61硫酸铜61硫酸钠637水浴510min碘液1滴1滴1滴1滴现象5、 实验结果及分析6、 思考题影响酶促反应速度的因素有哪些？它们如何影响酶的活性？