糖类脂肪蛋白质的鉴定PPT课件

（一）生物组织中可溶性还原糖的鉴定（一）生物组织中可溶性还原糖的鉴定1.1.实验原理实验原理 当质量浓度为0.1g/mL0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量浓度为0.05g/mL0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)Cu(OH)2 2悬浊液。 Cu(OH)Cu(OH)2 2与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热，能够生成砖红色的CuCu2 2O O沉淀。因此，利用该反应，可证明样液中含可溶性还原糖。RRCHOCHO+2Cu(OH)+2Cu(OH)2 2RRCOOHCOOH+ +CuCu2 2O O+2H+2H2 2O O第1页/共19页2.2.实验材料实验材料 做可溶性还原糖的鉴定实验，还原糖做可溶性还原糖的鉴定实验，还原糖的含量、生物组织有无色素是影响实验结的含量、生物组织有无色素是影响实验结果及其观察的最重要因素。果及其观察的最重要因素。 因此要选用可溶性还原糖含量高、白色或近于白色的植物组织，其中以苹果、梨最好，也可用白萝卜替代。第2页/共19页3.3.试剂配制试剂配制 甲液（0.1g/mL0.1g/mL的氢氧化钠溶液）斐林试剂 乙液（0.05g/mL的硫酸铜溶液）甲液乙液等量混合，现用现配，甲液乙液等量混合，现用现配，切不可分开滴加，或者久置后切不可分开滴加，或者久置后才用。才用。第3页/共19页4.4.实验步骤实验步骤（1 1）制备组织样液（教师制备）制备组织样液（教师制备）（2 2）鉴定样液）鉴定样液先在试管中加入2mL组织样液第4页/共19页再加入2mL刚配制的斐林试剂水浴煮沸2分钟注意观察整注意观察整个实验过程个实验过程中，溶液颜中，溶液颜色的变色的变化！化！第5页/共19页第6页/共19页（二）生物组织中脂肪的鉴定（二）生物组织中脂肪的鉴定1.1.实验原理实验原理 苏丹苏丹是可以对脂肪染色的试剂，是可以对脂肪染色的试剂，因此，当含有大量油滴的植物细胞用苏因此，当含有大量油滴的植物细胞用苏丹丹染色后，在显微镜下可以看到细胞染色后，在显微镜下可以看到细胞内橘黄色的颗粒。内橘黄色的颗粒。第7页/共19页2.2.实验材料实验材料 做脂肪的鉴定实验时，所用材料一要脂肪含量高，二要有一定大小才能做徒手切片，花生种子符合该实验的要求。 将花生种子经过3-43-4小时的浸泡使其变软，有利于切成薄片；但浸泡时间也不宜过长，否则切片时易碎裂，切不成薄片。3.3.试剂配制试剂配制 苏丹溶液：将0.1g0.1g苏丹干粉溶于100mL100mL体积分数为95%95%的酒精溶液中，待全部溶解后即成。第8页/共19页4.4.实验步骤实验步骤（1 1）切片制作）切片制作去掉花生种皮用左手的三个手指夹住花生的一片子叶，使花生子叶高于手指之上（为什么？）。右手持刀片，将子叶削去一层，形成平面。刀口向内，与花生断面平行，以均匀的动作，自左前方向右后方快速拉刀，滑行切片（注意要整个臂部用力，而不要腕部用力。）如此连续动作，切下一些薄片。第9页/共19页（2 2）染色）染色 用毛笔将最 薄的几片材料移至洁净的载玻片的中央滴苏丹溶液2-32-3滴于花生子叶薄片上2-2-1min1min后，吸去染液滴50%50%的酒精洗去浮色吸去多余酒精再滴1-21-2滴蒸馏水盖上盖玻片，制成临时装片。（3 3）镜检鉴定）镜检鉴定 在低倍镜下观察，找到花生子叶切片的最薄处（），移至视野的中心换用高倍镜观察，调焦至最清晰。可发现细胞内橘黄色的圆形小颗粒，这就是脂肪滴（油滴）。若发现观察物外围也有许多橘黄色小颗粒，则是脂肪跑了出来。第10页/共19页第11页/共19页若用物理方法如何鉴定脂肪的存在? ?烘烤种子后, ,把子叶放在白纸上用手指挤压, ,白纸上会出现透明的油迹, ,说明子叶含有脂肪。 第12页/共19页（三）生物组织中蛋白质的鉴定（三）生物组织中蛋白质的鉴定1 1 实验原理实验原理 在碱性溶液（NaOHNaOH）中，双缩脲（H H2 2NOC-NH-CONHNOC-NH-CONH2 2）能与Cu Cu 2+2+作用，形成紫色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。 由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。第13页/共19页3.3.试剂配制试剂配制 A A液（0.1g/mL0.1g/mL的氢氧化钠溶液）双缩脲试剂 B B液（0.01g/mL0.01g/mL的硫酸铜溶液）2.2.实验材料实验材料 做蛋白质的鉴定实验，一般选用蛋白质含量较高的大豆(可用豆浆替代）或鸡蛋清。第14页/共19页4.4.实验步骤：实验步骤：（1 1）制备生物组织样液（教师制备）制备生物组织样液（教师制备）（2 2）鉴定）鉴定先加2mL组织样液再加2mL双缩脲试剂A液加3-4滴双缩脲试剂B液第15页/共19页第16页/共19页注意：在鉴定蛋白质时要分别滴加两种试剂，并且硫酸铜只能加3434滴，不能过量如过量，CuSOCuSO4 4在碱性溶液中生成大量蓝色CuCu（OHOH）2 2沉淀，遮盖了紫色。鉴定蛋清组织中存在蛋白质时，要充分稀释。如稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后，会粘固在试管内壁上，使反应不易彻底，并且试管中也不易冲洗干净。第17页/共19页5.如稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后，会粘固在试管内壁上，使反应不易彻底，并且试管中也不易冲洗干净。6.若用物理方法如何鉴定脂肪的存在?烘烤种子后,把子叶放在白纸上用手指挤压,白纸上会出现透明的油迹,说明子叶含有脂肪 第18页/共19页感谢您的观看！第19页/共19页