生物件柠檬酸循环

会计学1生物件柠檬酸循环生物件柠檬酸循环（一）（一）丙酮酸进入柠檬酸循环的准备阶段丙酮酸进入柠檬酸循环的准备阶段氧化氧化脱羧生成乙酰脱羧生成乙酰-COA CH3CCOOHO+ HS-CoANAD+CH3COSCoA+CO2NADH丙酮酸脱氢酶系丙酮酸辅酶A乙酰辅酶Aw丙酮酸氧化脱羧反应是连接糖酵解和三羧酸循环的中间环节。此反应在真核细胞的线丙酮酸氧化脱羧反应是连接糖酵解和三羧酸循环的中间环节。此反应在真核细胞的线粒体基质中进行。粒体基质中进行。w丙酮酸脱氢酶系是一个非常复杂的多酶体系，主要包括：三种不同的酶（丙酮酸脱氢酶系是一个非常复杂的多酶体系，主要包括：三种不同的酶（丙酮酸脱羧丙酮酸脱羧酶酶E E1 1、二氢硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸乙酰转移酶E E2 2和二氢硫辛酸脱氢酶和二氢硫辛酸脱氢酶E E3 3），和），和6 6种辅因子（种辅因子（TTPTTP、硫辛酸、硫辛酸、FADFAD、NADNAD+ +、CoACoA和和MgMg2+2+）。）。9696页页三、三、TCA循环循环三种酶60条肽链形成的复合体CO2CH3OCOOCTPPCH3CHOHTPPS(CH2)4COOSOCH3CS(CH2)4COOSH-SH(CH2)4COOSH-FADH2FADNADNADH+H+SCoACH3CSCoAOHH乙酰二氢硫辛酸乙酰二氢硫辛酸硫辛酸硫辛酸二氢硫辛酸二氢硫辛酸丙酮酸丙酮酸乙酰乙酰CoA CO2CH3OCOOCTPPCH3CHOHTPPS(CH2)4COSOCH3CS(CH2)4COSHSH(CH2)4COSHFADH2FADNADNADH+H+SCoACH3CSCoAOHH乙酰二氢硫辛酸乙酰二氢硫辛酸硫辛酸硫辛酸二氢硫辛酸二氢硫辛酸丙酮酸丙酮酸乙酰CoA NHNHNH中间产物在氨基酸臂作用下进入酶活性中间产物在氨基酸臂作用下进入酶活性中心中心快速准确快速准确！相当于酶复合体相当于酶复合体由于第一步为不可逆反应，直接决定整个循环反应的速度，而且是许多其它反应体系的分支点，因而该酶复合物受到严密的调节控制；三、三、TCA循环循环（二）（二）柠檬酸循环概貌（柠檬酸循环概貌（98页）页） 是乙酰是乙酰CoA与草酰与草酰乙酸结合进入循环经乙酸结合进入循环经一系列反应再回到草一系列反应再回到草酰乙酸的过程。在这酰乙酸的过程。在这个过程中乙酰个过程中乙酰CoA被被氧化成氧化成H2O和和CO2并并产生大量的能。其反产生大量的能。其反应途径可表示如图应途径可表示如图 线粒体膜线粒体膜第三个碳以第三个碳以COCO2 2形式失形式失去去四碳二羧酸四碳二羧酸第二个碳以第二个碳以COCO2 2形形式失去式失去五碳二羧酸五碳二羧酸基基质中质中丙酮酸丙酮酸基质中基质中六碳三羧酸六碳三羧酸三种羧酸！三种羧酸！草酰乙酸大循环！草酰乙酸大循环！第一个碳以第一个碳以COCO2 2形形式失去式失去重新加入到草酰重新加入到草酰乙酸库乙酸库 CH3COCOOHNAD+NADH + H+CoASHCO2CH3COSCoAOCCOOHCH2COOHCH2COOHC(OH)COOHCH2COOHCH2COOHCHCOOHCH(OH)COOHNAD(P)NAD(P)H+HCH2COOHCHCOOHCOCOOHCH2COOHCH2COCOOHNADH+HNADNADH + H+COSCoACH2CH2COOHGDP+PiGTPCoASHH2 OCH2COOHCH2COOHFADH2FADCHCOOHCHCOOHHOCCOOHCH2COOHH+NAD+CO2+CoASHH 2 OCoASHCO2丙酮酸丙酮酸乙酰乙酰 CoA(2)(1)(7)(8)(9)(10)(5)(6)(3)(4)柠檬酸柠檬酸异柠檬酸异柠檬酸草酰琥珀酸草酰琥珀酸-酮戊二酸酮戊二酸琥珀酰琥珀酰 CoA琥珀酸琥珀酸延胡索酸延胡索酸L-苹果酸苹果酸草酰乙酸草酰乙酸H O2(1)(1) 丙酮酸丙酮酸脱氢酶脱氢酶复合体复合体(2)(2) 柠檬酸合成酶柠檬酸合成酶(3)(3) 顺乌头酸酶顺乌头酸酶(4)(5)(4)(5)异柠檬酸异柠檬酸脱氢酶脱氢酶(6)(6) - -酮戊二酸酮戊二酸脱氢酶脱氢酶复合体复合体(7)(7) 琥珀酰琥珀酰CoACoA合成酶合成酶(8)(8) 琥珀酸琥珀酸脱氢酶脱氢酶(9)(9) 延胡索酸酶延胡索酸酶(10)(10)L-L-苹果酸苹果酸脱氢酶脱氢酶产能步骤产能步骤2NAD(P)H1FADH21GTP(1)(6)-产能产能脱碳脱碳2NADH + 2 CO2(5)-脱碳脱碳-1CO2 3步步不可逆反应不可逆反应三、三、TCA循环循环（三）（三）柠檬酸循环的柠檬酸循环的化学途径化学途径 （98页）页）1草酰乙酸草酰乙酸-酮戊二酸酮戊二酸 （三）（三）柠檬酸循环的柠檬酸循环的化学途径化学途径 （98页）页）三、三、TCA循环循环2-酮戊二酸酮戊二酸琥珀酰琥珀酰CoA 需要需要-酮戊二酸脱氢酶系的酮戊二酸脱氢酶系的3种酶和它们的辅助因子如种酶和它们的辅助因子如NAD+、CoA、TPP、硫辛酰胺、硫辛酰胺、FAD和和Mg2+等等 。三、三、TCA循环循环（三）（三）柠檬酸循环的柠檬酸循环的化学途径化学途径 （98页）页）3由琥珀酰由琥珀酰-CoA琥珀酸琥珀酸 琥珀酰琥珀酰CoA与二磷酸鸟苷（与二磷酸鸟苷（GDP）及磷酸作用迅速分解成琥珀酸，在此反应）及磷酸作用迅速分解成琥珀酸，在此反应中产生一个中产生一个ATP分子。催化这一反应的酶为琥珀酰分子。催化这一反应的酶为琥珀酰CoA合成酶合成酶 三、三、TCA循环循环（三）（三）柠檬酸循环的柠檬酸循环的化学途径化学途径 （98页）页）4由琥珀酸由琥珀酸草酰乙酸草酰乙酸 从上述各反应中（参阅图从上述各反应中（参阅图9898页图及反应式）可见三羧酸循环反应主要是脱水（反应页图及反应式）可见三羧酸循环反应主要是脱水（反应2 2）、加水（反应）、加水（反应1 1、3 3、9 9）、脱羧（反应）、脱羧（反应5 5、6 6）及脱氢（反应）及脱氢（反应4 4、6 6、8 8、1010）。丙酮酸转）。丙酮酸转变为乙酰变为乙酰CoACoA过程中亦脱出两个过程中亦脱出两个H H。在脱氢作用中脱氢酶及。在脱氢作用中脱氢酶及NADNAD、NADPNADP、FADFAD、TPPTPP、硫辛酸、硫辛酸各辅酶均发生了重要作用。各辅酶均发生了重要作用。由丙酮酸氧化成由丙酮酸氧化成COCO2 2的各反应可总结如下式：的各反应可总结如下式：丙酮酸丙酮酸+CoA+CoASH+NADSH+NAD+ +乙酰乙酰CoA+NADH+HCoA+NADH+H+ +CO+CO2 2 乙酰乙酰-CoA+3NAD-CoA+3NAD+ +FAD+GDP+Pi+2H+FAD+GDP+Pi+2H2 2O2COO2CO2 2+CoASH+3NADH+3H+CoASH+3NADH+3H+ +FADH+FADH2 2+GTP+GTP净反应净反应：（三）（三）柠檬酸循环的柠檬酸循环的化学途径化学途径 （98页）页）n + 4NAD(P)+ +FAD+GDP+Pi+3H2O n 3CO2 +4NAD(P)H +4H+ +FADH2+GTPCOOHCOCH3n4NAD(P)H +4H+ 10ATP 4H2OnFADH2 1.5ATP 1H2On ADP ATP - 3H2On GTP GDP 1ATP 1H2Onn 2H2O氧化磷酸化作用氧化磷酸化作用O2COOHCOCH3三、三、TCA循环循环（四）（四）TCA循环特点：循环特点： （1）TCA循环一次消耗一个乙酰基。即两个碳原子进入循环。又有两个碳原子循环一次消耗一个乙酰基。即两个碳原子进入循环。又有两个碳原子以以CO2的形式离开循环。但这两个碳原子并不是刚刚进入循环的那两个碳原子（的形式离开循环。但这两个碳原子并不是刚刚进入循环的那两个碳原子（代谢更新代谢更新）。）。（2） TCA循环有四次氧化脱氢反应（其中三次以循环有四次氧化脱氢反应（其中三次以NAD+为受氢体，一次以为受氢体，一次以FAD为受氢体）、一次底物水平磷酸化反应以为受氢体）、一次底物水平磷酸化反应以GTP形式产生一个高能键、二次脱羧反形式产生一个高能键、二次脱羧反应。糖的有氧氧化过程中能量和应。糖的有氧氧化过程中能量和CO2主要在主要在TCA循环中产生。循环中产生。 （3） TCA循环所产生的循环所产生的3个个NADH和一个和一个FADH2分子只能通过电子传递链和氧分子只能通过电子传递链和氧分子（分子（氧化磷酸化氧化磷酸化）才能够再被氧化，释放的能量）才能够再被氧化，释放的能量ATP形式产生。形式产生。 TCA循环在线粒体中进行，整个循环不可逆。循环在线粒体中进行，整个循环不可逆。一次循环、二次脱羧、三次加水、四次脱氢一次循环、二次脱羧、三次加水、四次脱氢四、糖的有氧氧化及四、糖的有氧氧化及TCA循环的意义（循环的意义（107页页）1、糖的有氧氧化的基本生理功能是氧化供能。、糖的有氧氧化的基本生理功能是氧化供能。 能量计算：能量计算： 每一次每一次TCA循环：循环：32.5 + 11.5 +1 =10分子分子ATP 从丙酮酸开始：从丙酮酸开始：10 + 2.5 =12.5分子分子ATP 从葡萄糖开始：从葡萄糖开始：2 + 2.5 2 + 12.5 2 = 32分子分子ATP 而糖的无氧酵解仅产生而糖的无氧酵解仅产生2分子分子ATP2、TCA循环不仅是糖代谢的重要途径，也是甘油、脂肪酸和氨基酸氧化分解的循环不仅是糖代谢的重要途径，也是甘油、脂肪酸和氨基酸氧化分解的必经途径，是体内糖、脂肪和蛋白质三大营养物质分解代谢的最终共同途径。必经途径，是体内糖、脂肪和蛋白质三大营养物质分解代谢的最终共同途径。3、TCA循环也是糖、脂肪和氨基酸代谢联系的枢纽。循环也是糖、脂肪和氨基酸代谢联系的枢纽。异柠檬酸异柠檬酸柠檬酸柠檬酸延胡索酸延胡索酸苹果酸苹果酸草酰乙酸草酰乙酸CoASH三羧酸循环三羧酸循环三羧酸循环三羧酸循环乙酰乙酰CoA -酮戊二酸酮戊二酸琥珀酰琥珀酰CoACoA乙酰乙酰乙酰乙酰CoA苯丙氨酸苯丙氨酸酪氨酸酪氨酸亮氨酸亮氨酸赖氨酸赖氨酸色氨酸色氨酸丙氨酸丙氨酸苏氨酸苏氨酸甘氨酸甘氨酸丝氨酸丝氨酸半胱氨酸半胱氨酸丙酮酸丙酮酸精氨酸精氨酸组氨酸组氨酸谷氨酰胺谷氨酰胺脯氨酸脯氨酸谷氨酸谷氨酸异亮氨酸异亮氨酸甲硫氨酸甲硫氨酸缬氨酸缬氨酸苯丙氨酸苯丙氨酸酪氨酸酪氨酸天冬酰胺天冬酰胺谷氨酰胺谷氨酰胺三羧酸循环三羧酸循环焚烧炉焚烧炉中间酸是合成其他化合物的碳骨架中间酸是合成其他化合物的碳骨架百宝库百宝库。例如例如 草酰乙酸草酰乙酸 天冬氨酸、天冬酰胺等等天冬氨酸、天冬酰胺等等 -酮戊二酸酮戊二酸 谷氨酸谷氨酸 其他氨基酸其他氨基酸 琥珀酰琥珀酰CoA 血红素血红素既是既是“焚烧炉又是百宝库焚烧炉又是百宝库”五、五、TCA循环中碳骨架的不对称反应循环中碳骨架的不对称反应 用同位素标记乙酰用同位素标记乙酰COA碳原子，发现乙酰碳原子，发现乙酰COA从碳骨架的一端掺入，而从另从碳骨架的一端掺入，而从另一端发生脱羧反应，说明反应是不对称的。一端发生脱羧反应，说明反应是不对称的。六、六、TCA循环的双重作用和回补反应循环的双重作用和回补反应 TCA循环不仅是产生循环不仅是产生ATP的途径，其产生的中间物也是生物合成的前体，具的途径，其产生的中间物也是生物合成的前体，具有分解代谢和合成代谢双重性（有分解代谢和合成代谢双重性（或两用性，或两用性，110页页）。这些中间物必需不断补充）。这些中间物必需不断补充才能保证才能保证TCA循环的正常进行。对柠檬酸循环中间产物有补充作用的反应称为回循环的正常进行。对柠檬酸循环中间产物有补充作用的反应称为回补反应。补反应。Chapter23 柠檬酸循环柠檬酸循环七、七、TCA循环的调控（循环的调控（108页）页）三羧酸循环有三个调节点。三羧酸循环有三个调节点。 第一个调节点是草酰乙酸与乙酰第一个调节点是草酰乙酸与乙酰CoA结合成柠檬酸的反应结合成柠檬酸的反应 柠檬酸合成酶，柠檬酸合成酶的活性受草酰乙酸的有效浓度和能与乙柠檬酸合成酶，柠檬酸合成酶的活性受草酰乙酸的有效浓度和能与乙酰酰CoACoA竞争的其他脂酰竞争的其他脂酰CoACoA水平所限制。水平所限制。 第二个调节点是异柠檬酸转变为第二个调节点是异柠檬酸转变为-酮戊二酸的反应酮戊二酸的反应 异柠檬酸脱氢酶，异柠檬酸脱氢酶，ADPADP能增强异柠檬酸脱氢酶同异柠檬酸之间的亲和能增强异柠檬酸脱氢酶同异柠檬酸之间的亲和力。但力。但NADHNADH及琥珀酰及琥珀酰CoACoA都对异柠檬酸脱氢酶有抑制作用都对异柠檬酸脱氢酶有抑制作用 第三个调节点是第三个调节点是-酮戊二酸转变为琥珀酰酮戊二酸转变为琥珀酰CoA的反应的反应 -酮戊二酸脱氢酶系是三羧酸循环的关键酶，琥珀酰酮戊二酸脱氢酶系是三羧酸循环的关键酶，琥珀酰CoACoA是强抑制剂，是强抑制剂，ATPATP和和NADHNADH也可抑制这个酶的活力，都可降低三羧酸循环的速度。也可抑制这个酶的活力，都可降低三羧酸循环的速度。 （一）（一）丙酮酸进入柠檬酸循环的准备阶段丙酮酸进入柠檬酸循环的准备阶段氧化氧化脱羧生成乙酰脱羧生成乙酰-COA CH3CCOOHO+ HS-CoANAD+CH3COSCoA+CO2NADH丙酮酸脱氢酶系丙酮酸辅酶A乙酰辅酶Aw丙酮酸氧化脱羧反应是连接糖酵解和三羧酸循环的中间环节。此反应在真核细胞的线丙酮酸氧化脱羧反应是连接糖酵解和三羧酸循环的中间环节。此反应在真核细胞的线粒体基质中进行。粒体基质中进行。w丙酮酸脱氢酶系是一个非常复杂的多酶体系，主要包括：三种不同的酶（丙酮酸脱氢酶系是一个非常复杂的多酶体系，主要包括：三种不同的酶（丙酮酸脱羧丙酮酸脱羧酶酶E E1 1、二氢硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸乙酰转移酶E E2 2和二氢硫辛酸脱氢酶和二氢硫辛酸脱氢酶E E3 3），和），和6 6种辅因子（种辅因子（TTPTTP、硫辛酸、硫辛酸、FADFAD、NADNAD+ +、CoACoA和和MgMg2+2+）。）。9696页页三、三、TCA循环循环 CH3COCOOHNAD+NADH + H+CoASHCO2CH3COSCoAOCCOOHCH2COOHCH2COOHC(OH)COOHCH2COOHCH2COOHCHCOOHCH(OH)COOHNAD(P)NAD(P)H+HCH2COOHCHCOOHCOCOOHCH2COOHCH2COCOOHNADH+HNADNADH + H+COSCoACH2CH2COOHGDP+PiGTPCoASHH2 OCH2COOHCH2COOHFADH2FADCHCOOHCHCOOHHOCCOOHCH2COOHH+NAD+CO2+CoASHH 2 OCoASHCO2丙酮酸丙酮酸乙酰乙酰 CoA(2)(1)(7)(8)(9)(10)(5)(6)(3)(4)柠檬酸柠檬酸异柠檬酸异柠檬酸草酰琥珀酸草酰琥珀酸-酮戊二酸酮戊二酸琥珀酰琥珀酰 CoA琥珀酸琥珀酸延胡索酸延胡索酸L-苹果酸苹果酸草酰乙酸草酰乙酸H O2(1)(1) 丙酮酸丙酮酸脱氢酶脱氢酶复合体复合体(2)(2) 柠檬酸合成酶柠檬酸合成酶(3)(3) 顺乌头酸酶顺乌头酸酶(4)(5)(4)(5)异柠檬酸异柠檬酸脱氢酶脱氢酶(6)(6) - -酮戊二酸酮戊二酸脱氢酶脱氢酶复合体复合体(7)(7) 琥珀酰琥珀酰CoACoA合成酶合成酶(8)(8) 琥珀酸琥珀酸脱氢酶脱氢酶(9)(9) 延胡索酸酶延胡索酸酶(10)(10)L-L-苹果酸苹果酸脱氢酶脱氢酶产能步骤产能步骤2NAD(P)H1FADH21GTP(1)(6)-产能产能脱碳脱碳2NADH + 2 CO2(5)-脱碳脱碳-1CO2 3步步不可逆反应不可逆反应三、三、TCA循环循环（三）（三）柠檬酸循环的柠檬酸循环的化学途径化学途径 （98页）页）3由琥珀酰由琥珀酰-CoA琥珀酸琥珀酸 琥珀酰琥珀酰CoA与二磷酸鸟苷（与二磷酸鸟苷（GDP）及磷酸作用迅速分解成琥珀酸，在此反应）及磷酸作用迅速分解成琥珀酸，在此反应中产生一个中产生一个ATP分子。催化这一反应的酶为琥珀酰分子。催化这一反应的酶为琥珀酰CoA合成酶合成酶 三、三、TCA循环循环（四）（四）TCA循环特点：循环特点： （1）TCA循环一次消耗一个乙酰基。即两个碳原子进入循环。又有两个碳原子循环一次消耗一个乙酰基。即两个碳原子进入循环。又有两个碳原子以以CO2的形式离开循环。但这两个碳原子并不是刚刚进入循环的那两个碳原子（的形式离开循环。但这两个碳原子并不是刚刚进入循环的那两个碳原子（代谢更新代谢更新）。）。（2） TCA循环有四次氧化脱氢反应（其中三次以循环有四次氧化脱氢反应（其中三次以NAD+为受氢体，一次以为受氢体，一次以FAD为受氢体）、一次底物水平磷酸化反应以为受氢体）、一次底物水平磷酸化反应以GTP形式产生一个高能键、二次脱羧反形式产生一个高能键、二次脱羧反应。糖的有氧氧化过程中能量和应。糖的有氧氧化过程中能量和CO2主要在主要在TCA循环中产生。循环中产生。 （3） TCA循环所产生的循环所产生的3个个NADH和一个和一个FADH2分子只能通过电子传递链和氧分子只能通过电子传递链和氧分子（分子（氧化磷酸化氧化磷酸化）才能够再被氧化，释放的能量）才能够再被氧化，释放的能量ATP形式产生。形式产生。 TCA循环在线粒体中进行，整个循环不可逆。循环在线粒体中进行，整个循环不可逆。一次循环、二次脱羧、三次加水、四次脱氢一次循环、二次脱羧、三次加水、四次脱氢四、糖的有氧氧化及四、糖的有氧氧化及TCA循环的意义（循环的意义（107页页）1、糖的有氧氧化的基本生理功能是氧化供能。、糖的有氧氧化的基本生理功能是氧化供能。 能量计算：能量计算： 每一次每一次TCA循环：循环：32.5 + 11.5 +1 =10分子分子ATP 从丙酮酸开始：从丙酮酸开始：10 + 2.5 =12.5分子分子ATP 从葡萄糖开始：从葡萄糖开始：2 + 2.5 2 + 12.5 2 = 32分子分子ATP 而糖的无氧酵解仅产生而糖的无氧酵解仅产生2分子分子ATP2、TCA循环不仅是糖代谢的重要途径，也是甘油、脂肪酸和氨基酸氧化分解的循环不仅是糖代谢的重要途径，也是甘油、脂肪酸和氨基酸氧化分解的必经途径，是体内糖、脂肪和蛋白质三大营养物质分解代谢的最终共同途径。必经途径，是体内糖、脂肪和蛋白质三大营养物质分解代谢的最终共同途径。3、TCA循环也是糖、脂肪和氨基酸代谢联系的枢纽。循环也是糖、脂肪和氨基酸代谢联系的枢纽。