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专题专题5、6DNA和蛋白质技术和蛋白质技术植物有效成分的提取植物有效成分的提取本节目录本节目录回归教材回归教材夯实基础夯实基础知能演练知能演练强化闯关强化闯关高频考点高频考点深度剖析深度剖析回归教材回归教材 夯实基础夯实基础 基础盘点基础盘点蒸馏水蒸馏水物理和化学物理和化学DNA含量含量滤液滤液(3)杂质的去除方案杂质的去除方案利用利用DNA在不同浓度的在不同浓度的_ 溶液中溶解度的不同，溶液中溶解度的不同，通过控制其溶液的浓度去除杂质。通过控制其溶液的浓度去除杂质。用木瓜蛋白酶去除用木瓜蛋白酶去除_。用高温用高温(6075 )使使_变性。变性。(4)DNA的析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相的析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、等的、 _溶液可使溶液可使DNA析出。析出。(5)DNA的鉴定：将析出的的鉴定：将析出的DNA溶于物质的量浓度为溶于物质的量浓度为2 mol/L的的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂，沸水浴加热，溶溶液中，加入二苯胺试剂，沸水浴加热，溶液变蓝。液变蓝。NaCl蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质冷却的酒精冷却的酒精二、多聚酶链式反应扩增二、多聚酶链式反应扩增DNA片段片段1PCR原理原理在在80100 的温度范围内的温度范围内,DNA发生发生_,双螺旋结构双螺旋结构解体解体,在温度缓慢降低后在温度缓慢降低后,DNA发生发生_,DNA单链与单链与_通过碱基互补配对结合通过碱基互补配对结合,耐高温的耐高温的DNA聚合酶从聚合酶从_开始延伸开始延伸DNA链。链。2PCR的条件的条件缓冲溶液、缓冲溶液、DNA模板、模板、2种种_、4种脱氧核苷酸、耐种脱氧核苷酸、耐热的热的DNA聚合酶，同时要控制温度。聚合酶，同时要控制温度。变性变性复性复性引物引物引物的引物的3端端引物引物三、血红蛋白的提取和分离实验三、血红蛋白的提取和分离实验1常用的分离方法：常用的分离方法： _法、凝胶电泳法等。法、凝胶电泳法等。2基本原理基本原理(1)凝胶色谱法的原理：相对分子质量大的分子通过多孔凝凝胶色谱法的原理：相对分子质量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙胶颗粒的间隙,路程路程_,流动流动_；相对分子质量小的分子；相对分子质量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部穿过多孔凝胶颗粒内部,路程路程_,流动流动_。(2)凝胶电泳法的原理：不同蛋白质的带电性质、凝胶电泳法的原理：不同蛋白质的带电性质、 _、形状和形状和_不同不同,在电场中受到的作用力大小、在电场中受到的作用力大小、 _、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动_和运动和运动_不同。不同。凝胶色谱凝胶色谱短短快快长长慢慢电量电量大小大小方向方向方向方向速度速度3血红蛋白的提取和分离程序血红蛋白的提取和分离程序(1)样品处理样品处理红细胞的洗涤红细胞的洗涤_的释放的释放分离血红蛋白溶液。分离血红蛋白溶液。(2)粗分离粗分离_：除去样品中相对分子质量较：除去样品中相对分子质量较_的杂质。的杂质。(3)纯化：一般采用纯化：一般采用_法对血红蛋白进行分离法对血红蛋白进行分离和纯化。和纯化。(4)纯度鉴定：一般用纯度鉴定：一般用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法来测定聚丙烯酰胺凝胶电泳法来测定蛋白质的相对分子质量，即对血红蛋白进行纯度鉴定。蛋白质的相对分子质量，即对血红蛋白进行纯度鉴定。血红蛋白血红蛋白透析透析小小凝胶色谱凝胶色谱 四、植物有效成分的提取四、植物有效成分的提取 1植物芳香油的提取植物芳香油的提取 (1)植物芳香油的主要化学成分：萜类化合物及其衍生物，植物芳香油的主要化学成分：萜类化合物及其衍生物，具有很强的具有很强的挥发挥发性。提取方法有蒸馏、性。提取方法有蒸馏、_和萃取和萃取等。等。压榨压榨水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法NaCl无水无水Na2SO4过滤过滤压榨压榨压榨压榨过滤过滤水水萃取萃取石油醚石油醚纸层析法纸层析法 知识导图知识导图高频考点高频考点 深度剖析深度剖析考点一考点一DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定考点突破考点突破1基本原理基本原理(1)DNA在不同浓度的在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在溶液中的溶解度不同，在0.14 mol/L的的NaCl溶液中的溶解度最低。溶液中的溶解度最低。(2)DNA不溶于酒精溶液。不溶于酒精溶液。(3)DNA不被蛋白酶所水解。不被蛋白酶所水解。(4)DNA在沸水浴条件下可被二苯胺染成蓝色。在沸水浴条件下可被二苯胺染成蓝色。2DNA与蛋白质在不同与蛋白质在不同NaCl溶液中溶解度不同溶液中溶解度不同2 mol/L NaCl溶液溶液0.14 mol/L NaCl溶液溶液溶解规律溶解规律DNA溶解溶解析出析出蛋白质蛋白质部分发生部分发生盐析沉淀盐析沉淀溶解溶解NaCl溶液从溶液从2 mol/L降低过程中，溶解度降低过程中，溶解度逐渐增大逐渐增大3.DNA的析出与鉴定的析出与鉴定(1)析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液等体积的冷却析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液等体积的冷却酒精溶液酒精溶液(体积分数为体积分数为95%)，静置，静置23 min，溶液中会出现，溶液中会出现白色丝状物白色丝状物(此即粗提取的此即粗提取的DNA)，用玻璃棒沿一个方向搅，用玻璃棒沿一个方向搅拌卷起丝状物。拌卷起丝状物。(2)鉴定鉴定比较比较加入物质加入物质结果结果图示图示实验组实验组均加入：均加入：4 mL二二苯苯胺试剂胺试剂2 mol/L NaCl溶溶液液5 mL丝状物丝状物(DNA)溶溶液逐液逐渐变渐变蓝蓝对照组对照组不变蓝不变蓝 特别提醒特别提醒 本实验用鸡血细胞作实验材料，不能用哺乳动物的成熟本实验用鸡血细胞作实验材料，不能用哺乳动物的成熟红细胞，原因是哺乳动物的成熟红细胞内无细胞核，但红细胞，原因是哺乳动物的成熟红细胞内无细胞核，但它可以作为血红蛋白提取和制备细胞膜的理想材料。它可以作为血红蛋白提取和制备细胞膜的理想材料。对点突破对点突破1(2011高考江苏卷高考江苏卷)在利用鸡血进行在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴的粗提取与鉴定定”的实验中，相关叙述正确的是的实验中，相关叙述正确的是()A用蒸馏水将用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至溶液浓度调至0.14 mol/L，滤去析出物，滤去析出物B调节调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质分杂质C将丝状物溶解在将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺试剂溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色即呈蓝色D用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同 解析：选解析：选B。在物质的量浓度为。在物质的量浓度为0.14 mol/L的的NaCl溶液中，溶液中，DNA的溶解度最低，的溶解度最低，DNA存在于析出物中，故不能滤去存在于析出物中，故不能滤去析出物，析出物，A项错误；利用项错误；利用DNA与与RNA、蛋白质和脂质等、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，进行相应操作，可在实验在物理和化学性质方面的差异，进行相应操作，可在实验中去除部分杂质，中去除部分杂质，B项正确；进行项正确；进行DNA鉴定时，加入二苯鉴定时，加入二苯胺试剂后再经沸水浴才能出现蓝色，胺试剂后再经沸水浴才能出现蓝色，C项错误；用菜花作项错误；用菜花作为实验材料时，要加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分搅为实验材料时，要加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分搅拌和研磨，过滤后收集研磨液，拌和研磨，过滤后收集研磨液，D项错误。项错误。 2在在“DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定”实验中，将提取获得的实验中，将提取获得的DNA的黏稠物的黏稠物(还含有许多杂质还含有许多杂质)分别处理如下：分别处理如下： 第一，放入第一，放入0.14 mol/L的的NaCl溶液中，搅拌后过滤，得溶液中，搅拌后过滤，得滤液滤液A和黏稠物和黏稠物a。 第二，放入第二，放入2 mol/L的的NaCl溶液中，搅拌后过滤，得滤溶液中，搅拌后过滤，得滤液液B和黏稠物和黏稠物b。 第三，放入冷却的第三，放入冷却的95%的酒精溶液中，搅拌后过滤，得的酒精溶液中，搅拌后过滤，得滤液滤液C和黏稠物和黏稠物c。 以上过程获得的滤液和黏稠物中，因含以上过程获得的滤液和黏稠物中，因含DNA少而可以丢少而可以丢弃的是弃的是_。 解析：在不同浓度的解析：在不同浓度的NaCl溶液中，溶液中，DNA的溶解度不同。的溶解度不同。在在0.14 mol/L的的NaCl溶液中溶液中DNA溶解度最小，溶解度最小，DNA析出，析出，呈丝状物，过滤后存在于黏稠物呈丝状物，过滤后存在于黏稠物a中；在中；在2 mol/L的的NaCl溶液中溶液中DNA溶解度最大，所以溶解度最大，所以DNA溶解，过滤后存在于溶解，过滤后存在于滤液滤液B中；酒精可使中；酒精可使DNA分子凝集，因此，在冷却的分子凝集，因此，在冷却的95%的酒精溶液中的酒精溶液中DNA凝集，呈丝状物，过滤后存在于凝集，呈丝状物，过滤后存在于黏稠物黏稠物c中。中。 答案：答案：A、b、C考点二考点二PCR技术的基本操作和应用技术的基本操作和应用 1PCR相关技术原理与条件相关技术原理与条件 (1)PCR：多聚酶链式反应的简称，是一种体外迅速扩增：多聚酶链式反应的简称，是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。片段的技术。 (2)引物：是一小段引物：是一小段RNA或单链或单链DNA，它能与，它能与DNA母链的一母链的一段碱基序列互补配对。段碱基序列互补配对。 (3)扩增方向：扩增方向：DNA的合成方向总是从子链的的合成方向总是从子链的5端向端向3端延端延伸。伸。 (4)解旋：利用了解旋：利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制的热变性原理，通过控制温度来控制双双 链的解聚与结合，即双链链的解聚与结合，即双链DNA 单链单链DNA。(5)酶：耐高温的酶：耐高温的Taq DNA聚合酶，高温不会失活。聚合酶，高温不会失活。(6)PCR的条件：一定的缓冲溶液下才能进行，需提供的条件：一定的缓冲溶液下才能进行，需提供DNA模板、两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的模板、两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚聚合酶，同时要控制温度。合酶，同时要控制温度。2PCR的过程的过程(1)变性：变性：90 以上时，双链以上时，双链DNA解聚为单链。解聚为单链。(2)复性：温度下降到复性：温度下降到50 左右，两种引物通过碱基互补左右，两种引物通过碱基互补配对方式与两条单链配对方式与两条单链DNA结合。结合。(3)延伸延伸:温度上升到温度上升到72 左右左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。链。3PCR的结果：的结果：DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的物之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增。序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增。 对点突破对点突破 3PCR(多聚酶链式反应多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特技术是一项在生物体外复制特定的定的DNA片段的核酸合成技术，如图表示合成过程。下片段的核酸合成技术，如图表示合成过程。下列说法错误的是列说法错误的是() AA过程高温使过程高温使DNA变性解旋，该过程不需要解旋变性解旋，该过程不需要解旋酶的作用酶的作用 BC过程要用到的酶在高温下失活，因此在过程要用到的酶在高温下失活，因此在PCR扩增扩增时需要再添加时需要再添加 C如果把模板如果把模板DNA的两条链用的两条链用15N标记，游离的脱标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制氧核苷酸不做标记，控制“95 55 72 ”温度温度循环循环3次，则在形成的子代次，则在形成的子代DNA中含有中含有15N标记的标记的DNA占占25% DPCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变中由碱基错配引起的变异属于基因突变 解析：选解析：选B。高温所起的作用类似于解旋酶，使双链。高温所起的作用类似于解旋酶，使双链DNA变为单链。变为单链。C过程为过程为PCR技术的延伸阶段，当系统技术的延伸阶段，当系统温度上升至温度上升至72 左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸在左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下合成新的聚合酶的作用下合成新的DNA链。链。Taq DNA聚合聚合酶是耐热的，高温下不变性，所以一次性加入即可。酶是耐热的，高温下不变性，所以一次性加入即可。PCR技术遵循半保留复制的特点，经过三次循环，共技术遵循半保留复制的特点，经过三次循环，共产生产生23个个DNA分子，其中有分子，其中有2个个DNA分子含有分子含有15N。基。基因中的碱基对改变属于基因突变。因中的碱基对改变属于基因突变。 4PCR是一种体外快速扩增是一种体外快速扩增DNA的方法，用于扩增特的方法，用于扩增特定的定的DNA片段，数小时内可使目的基因片段扩增到数百片段，数小时内可使目的基因片段扩增到数百万份的拷贝。请回答相关问题：万份的拷贝。请回答相关问题： (1)DNA分子的两条链在碱基关系上表现为分子的两条链在碱基关系上表现为_，DNA的两条链在方向上表现为的两条链在方向上表现为_；通常将；通常将_的末端称为的末端称为5端；当引物与端；当引物与DNA母链通过碱基母链通过碱基互补配对结合后，互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的聚合酶就能从引物的_开开始延伸始延伸DNA链，故链，故DNA子链复制的方向是子链复制的方向是_。 (2)PCR与体内与体内DNA复制的不同之处主要表现在温度环境复制的不同之处主要表现在温度环境上，在上，在PCR中先用中先用95 高温处理的目的是高温处理的目的是_；而这一过程在细胞内是通过而这一过程在细胞内是通过_实现的。实现的。 (3)PCR需要模板需要模板DNA、引物、引物、_和和_等条件，其中引物实质上是一小段等条件，其中引物实质上是一小段_。解析：解析：DNA的两条链在碱基关系上表现为互补配对，在方的两条链在碱基关系上表现为互补配对，在方向上表现为反向平行。通常将含有磷酸基团的一端称为向上表现为反向平行。通常将含有磷酸基团的一端称为5端，端，DNA聚合酶只能从引物的聚合酶只能从引物的3端连接脱氧核苷酸，故端连接脱氧核苷酸，故子链复制的方向是子链复制的方向是5端到端到3端。在端。在PCR技术中，技术中，95 高高温处理的目的是使两条链之间的氢键断裂，在细胞内通过温处理的目的是使两条链之间的氢键断裂，在细胞内通过解旋酶来实现。解旋酶来实现。PCR技术中除需要模板技术中除需要模板DNA、引物、脱氧、引物、脱氧核苷酸外，还需要耐热的核苷酸外，还需要耐热的DNA聚合酶等条件，其中的引物聚合酶等条件，其中的引物是一小段是一小段DNA或或RNA。答案：答案：(1)互补配对反向平行磷酸基团互补配对反向平行磷酸基团3端端5端端到到3端端(2)使两条链之间的氢键断裂解旋酶使两条链之间的氢键断裂解旋酶(3)脱氧脱氧核苷酸耐热的核苷酸耐热的DNA聚合酶聚合酶DNA或或RNA 1玫瑰精油、橘皮精油、胡萝卜素的性质、提取方法、玫瑰精油、橘皮精油、胡萝卜素的性质、提取方法、原理、实验流程比较原理、实验流程比较考点三考点三从生物材料中提取某些特定从生物材料中提取某些特定成分成分提取成分提取成分比比较项目较项目玫瑰精油玫瑰精油橘皮精油橘皮精油胡萝卜素胡萝卜素性质性质化学性质稳化学性质稳定、难溶于定、难溶于水、易溶于水、易溶于有机溶剂、有机溶剂、能随水蒸气能随水蒸气一同蒸馏一同蒸馏无色透明、无色透明、具有橘香具有橘香味；重要味；重要成分为柠成分为柠檬烯檬烯橘黄色结晶，化橘黄色结晶，化学性质比较稳定，学性质比较稳定，不溶于水，微溶不溶于水，微溶于乙醇，易溶于于乙醇，易溶于石油醚等有机溶石油醚等有机溶剂剂提取方法提取方法蒸馏蒸馏压榨压榨萃取萃取 2.注意事项注意事项 (1)水蒸气蒸馏要适当延长蒸馏时间，温度不能太高。水蒸气蒸馏要适当延长蒸馏时间，温度不能太高。 (2)使用石灰水充分浸泡原料，破坏细胞结构，分解果胶，使用石灰水充分浸泡原料，破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率。防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率。 (3)用于萃取的有机溶剂必须事先精制，除去杂质。萃取用于萃取的有机溶剂必须事先精制，除去杂质。萃取剂应选用具有较高的沸点，且不溶于水的有机溶剂。剂应选用具有较高的沸点，且不溶于水的有机溶剂。 (4)提取胡萝卜素时，要控制干燥的温度和时间，若温度提取胡萝卜素时，要控制干燥的温度和时间，若温度太高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解。太高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解。 对点突破对点突破 5在玫瑰精油的提取和胡萝卜素的提取过程中共有的在玫瑰精油的提取和胡萝卜素的提取过程中共有的操作是操作是() A纸层析纸层析B水浴加热水浴加热 C过滤过滤 D加入加入NaCl 解析：选解析：选C。纸层析法用于胡萝卜素的鉴定；水浴加热。纸层析法用于胡萝卜素的鉴定；水浴加热用于胡萝卜素的萃取；在玫瑰精油的提取和胡萝卜素的用于胡萝卜素的萃取；在玫瑰精油的提取和胡萝卜素的提取过程中都要用到过滤；在玫瑰精油的提取中加入提取过程中都要用到过滤；在玫瑰精油的提取中加入NaCl使油水分层。使油水分层。 6下图是某同学设计的茉莉油的提取实验。图甲是实验下图是某同学设计的茉莉油的提取实验。图甲是实验流程，图乙是茉莉油提取的实验装置，请回答：流程，图乙是茉莉油提取的实验装置，请回答： (1)该同学提取茉莉油的方法是该同学提取茉莉油的方法是_。采摘原料应在。采摘原料应在茉莉油含量较高的茉莉油含量较高的_(填填“花开的盛期花开的盛期”或或“花开的花开的晚期晚期”)采收。采收。 (2)图甲中图甲中B过程表示过程表示_，通常应向油水混合物中加，通常应向油水混合物中加入入_来促进来促进B过程的进行。要完成图甲中过程的进行。要完成图甲中C过程需过程需要向提取液中加入要向提取液中加入_， 因为通过因为通过B过程获得的提取物可能含有过程获得的提取物可能含有_。 (3)蒸馏完毕，应先蒸馏完毕，应先_，然后停止，然后停止_，最后拆卸蒸馏装置，拆卸顺序与安装顺序相反。最后拆卸蒸馏装置，拆卸顺序与安装顺序相反。 (4)茉莉油等芳香油挥发性强，茉莉油等芳香油挥发性强，_溶于水，溶于水，_溶于有机溶剂。溶于有机溶剂。 (5)橘皮精油主要贮藏在橘皮部分，提取时一般不采用图橘皮精油主要贮藏在橘皮部分，提取时一般不采用图乙所示的方法，原因是乙所示的方法，原因是_。 为了防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率，需要将柑橘皮为了防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率，需要将柑橘皮干燥去水，然后用干燥去水，然后用_浸泡，使橘皮变得粗糙，细浸泡，使橘皮变得粗糙，细胞变得疏松，防止橘皮压榨时滑脱。胞变得疏松，防止橘皮压榨时滑脱。 答案：答案：(1)水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法花开的盛期花开的盛期(2)分离油层分离油层NaCl无水无水Na2SO4一定的水分一定的水分(3)撤出酒精灯撤出酒精灯供供水水(4)不不易易(5)橘皮精油的有效成分在水蒸气蒸馏时橘皮精油的有效成分在水蒸气蒸馏时会发生部分水解会发生部分水解石灰水石灰水易错警示易错警示对对DNA粗提取与血红蛋白提取易于混淆粗提取与血红蛋白提取易于混淆 (2013江苏南京江苏南京模拟模拟)下列关于下列关于DNA和血红蛋白的和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中，错误的是提取与分离实验的叙述中，错误的是()A可用蒸馏水涨破细胞的方法从猪的红细胞中提取到可用蒸馏水涨破细胞的方法从猪的红细胞中提取到DNA和蛋白质和蛋白质B用不同浓度的用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出溶液反复溶解与析出DNA可除去部可除去部分杂质分杂质C透析法分离蛋白质的依据是蛋白质不能通过半透膜透析法分离蛋白质的依据是蛋白质不能通过半透膜D进一步分离与纯化血红蛋白时可用凝胶色谱法、离心进一步分离与纯化血红蛋白时可用凝胶色谱法、离心法和电泳法等法和电泳法等【解析解析】猪是哺乳动物，哺乳动物成熟的红细胞中无细猪是哺乳动物，哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核和线粒体，不能从其红细胞中提取出胞核和线粒体，不能从其红细胞中提取出DNA。【答案答案】A【纠错笔记纠错笔记】提取物质提取物质DNA血红蛋白血红蛋白提取方法提取方法盐析法盐析法凝胶色谱法、电泳法凝胶色谱法、电泳法提取原理提取原理DNA在不同浓度的在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同溶液中溶解度不同DNA不溶于酒不溶于酒精精,但但某某些蛋白质则溶于酒精些蛋白质则溶于酒精根据相对分子质量根据相对分子质量的大小的大小各种分子带电性质各种分子带电性质的差异的差异步骤步骤溶解在溶解在2 mol/L的的NaCl溶液中溶液中加水稀释至加水稀释至0.14 mol/L NaCl溶液使溶液使DNA析出过析出过滤滤加入冷却酒精析出加入冷却酒精析出样品处理样品处理粗提取粗提取纯化纯化纯度鉴定纯度鉴定没有注意纸层析操作的注意事项没有注意纸层析操作的注意事项 图中为胡萝卜素的纸层析结果示意图，属于标准样图中为胡萝卜素的纸层析结果示意图，属于标准样品的层析点的是品的层析点的是()ABC D【解析解析】标准样品中的色素种类单一，在滤纸上扩散的标准样品中的色素种类单一，在滤纸上扩散的速度相同，因此只出现一个色素圆点。速度相同，因此只出现一个色素圆点。【答案答案】B【纠错笔记纠错笔记】(1)层析时注意选择干净的滤纸，为了防止操作时对滤纸的污层析时注意选择干净的滤纸，为了防止操作时对滤纸的污染，应尽量避免用手直接接触滤纸，可以戴手套进行操作。染，应尽量避免用手直接接触滤纸，可以戴手套进行操作。(2)点样时应注意点样斑点不能太大点样时应注意点样斑点不能太大(直径应小于直径应小于0.5 cm)，如，如果用吹风机吹干，温度不宜过高，否则斑点会变黄。果用吹风机吹干，温度不宜过高，否则斑点会变黄。(3)将点好样的滤纸卷成筒状，卷纸时注意滤纸两边不能相互将点好样的滤纸卷成筒状，卷纸时注意滤纸两边不能相互接触，以免因毛细管现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快，接触，以免因毛细管现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快，溶剂前沿不齐，影响结果。溶剂前沿不齐，影响结果。(4)层析液不可没及样品原点，以免色素溶解于层析液中，使层析液不可没及样品原点，以免色素溶解于层析液中，使鉴定失败。鉴定失败。(5)层析是否提取到胡萝卜素，通过与标准样品中的层析是否提取到胡萝卜素，通过与标准样品中的胡萝卜胡萝卜素作对比予以确认。素作对比予以确认。
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